年轻干部要在主题教育中走在前列

在全党深入开展学习贯彻习近平新时代中国特色社会主义思想主题教育,是党中央为全面贯彻党的二十大精神、动员全党同志为完成党的中心任务而团结奋斗所作出的重大部署。年轻干部是党和国家事业发展的希望,要深刻领会主题教育的重大意义,牢牢把握“以学铸魂、以学增智、以学正风、以学促干”的12条具体要求,切实在学懂、弄通、做实上下功夫,努力在主题教育中走在前列。

赶黄草总黄酮对小鼠肝损伤的保护作用

为研究赶黄草总黄酮对脂多糖(LPS)诱发的肝损伤的保护作用,将50只昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、联苯双酯阳性对照组及赶黄草总黄酮高、低剂量组,每组10只。赶黄草总黄酮高、低剂量组分别按照10 mg/kg、2 mg/kg的剂量灌服;联苯双酯阳性对照组按照5 mg/kg的剂量灌服;空白组和模型组分别灌胃等容积的生理盐水。连续给药14 d,观察小鼠生长状况,末次给药之后2 h,空白组尾静脉注射生理盐水2 m L/kg,其余各组尾静脉注射5 mg/kg LPS,12 h后眼球取血处死小鼠,测定小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性以及肝匀浆中的超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。同时将肝脏进行HE染色,观察小鼠肝脏组织病理学变化。结果显示,赶黄草总黄酮对小鼠生长有抑制作用。与模型组比较,赶黄草总黄酮高、低剂量组血清中ALT活性分别降低26.53%(P<0.01)、16.74%(P<0.05),AST活性分别降低12.50%(P<0.05)、9.88%(P<0.05),SOD活性分别升高26.46%(P<0.05)、21.77%(P<0.05),MDA含量分别降低48.73%(P<0.05)、59.80%(P<0.01);小鼠肝脏指数分别降低10.36%(P<0.05)、3.80%(P>0.05);赶黄草总黄酮各剂量组肝组织病变程度明显减轻。以上结果表明,赶黄草总黄酮对LPS诱导的小鼠肝损伤有保护作用。

匹鲁卡品致小鼠癫痫神经元模型的建立及其F-actin、Calponin 3和ROCK2的表达

目的:探讨匹鲁卡品所致小鼠癫痫神经元中细胞骨架丝状肌动蛋白(F-actin)、调宁蛋白3(Calponin 3)和Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶2(ROCK2)的表达,研究癫痫发作后RhoA/ROCK2通路与Calponin 3和F-actin解聚和重构之间的关系。方法:采用木瓜蛋白酶消化法分离ICR新生小鼠乳鼠皮层神经元,生长至第7天时用微管关联蛋白2(MAP2)抗体进行免疫组织化学染色鉴定神经元。将培养7d的神经元分为对照组和癫痫模型组,对照组用神经元培养基培养,癫痫模型组在神经元培养基中分别加入终浓度为2、3和4mmol·L^(-1)匹鲁卡品,24h后换为正常培养基。分别在造模后不同时间点取出各组细胞固定,进行免疫组织化学染色和荧光染色。采用Alex-546标记的phalloidin进行荧光染色观察神经元中F-actin分布;免疫组织化学染色观察神经元中Calponin 3、ROCK2和磷酸化ROCK2(p-ROCK2)表达和分布。结果:光镜下观察和F-acitn荧光染色,与对照组比较,造模24h后,2mmol·L^(-1)匹鲁卡品组细胞无明显变化;3mmol·L^(-1)匹鲁卡品组神经元中F-acitn出现解构,神经元部分突起消失,但在更换正常培养基后,细胞形态和F-actin结构在造模7d后逐渐恢复;4mmol·L^(-1)匹鲁卡品组神经元中F-actin结构崩解破坏严重,神经元突起不可逆性消失。免疫组织化学染色,对照组Calponin 3和ROCK2弥散分布于胞质中;在造模1d时癫痫模型组(3mmol·L^(-1)匹鲁卡品)神经细胞中Calponin 3和ROCK2明显聚集在细胞膜下方,随培养时间延长其表达量明显上调,位于细胞膜下方的p-ROCK2表达量也较对照组明显增加,同样随培养时间延长其表达量逐渐升高。结论:利用3mmol·L^(-1)匹鲁卡品成功建立癫痫神经元模型。3mmol·L^(-1)匹鲁卡品可使神经元细胞内ROCK2活化为p-ROCK2,并上调神经元内的ROCK2和p-ROCK2表达量,促使F-actin解聚导致神经元突起部分消失,p-ROCK2激活Calponin 3磷酸化,促进F-actin重构和神经元形态结构的恢复。

人性化护理对门诊输液患者护理满意度及护患纠纷发生率的影响

目的:分析门诊输液患者在人性化护理干预下,护理满意度及护患纠纷发生率的影响。方法:采用随机抓阄的方式,将2017年7月至2018年7月在门诊输液的600例患者分为干预组(人性化护理)和对照组(常规护理)各300例,并对护理效果进行分析。结果:干预组满意度(92%)显著高于对照组(48%),两组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。干预组纠纷发生率(4%)低于对照组(16%),两组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人性化护理干预在门诊输液室应用效果佳,临床推广价值高。

PTZ诱导的癫痫急性发作大鼠大脑神经元中F-actin、Calponin3和ROCK2的表达及其意义

目的:探讨戊四氮(PTZ)诱发的大鼠癫痫急性发作对大脑神经元中F-actin、Calponin3和ROCK2蛋白表达水平的影响,阐明癫痫急性发作时阻断F-actin异常解聚、触发F-actin重构的可能机制。方法:3周龄Wistar幼鼠56只分为对照组(n=6)和癫痫组(n=50)。对照组大鼠给予腹腔注射生理盐水;癫痫组大鼠经腹腔注射60mg·kg-1 PTZ建立癫痫急性发作模型,造模成功的24只大鼠分别在癫痫急性发作后的相应时间点(1、2、3和7d时)随机处死6只用于取材。采用Alex-488标记的phalloidine进行荧光染色观察大鼠大脑海马组织中分子层的F-actin荧光强度;采用免疫荧光染色法观察大鼠大脑皮层和海马神经元中Calponin3和ROCK2的分布;采用Western blotting法检测大鼠海马组织中Calponin3、ROCK2和磷酸化ROCK2蛋白的相对表达水平。结果:与对照组比较,癫痫急性发作1d后,癫痫组大鼠大脑树突棘密集的海马中分子层的F-actin荧光强度降低(P<0.05),点状聚集结构消失。免疫荧光染色,对照组大鼠Calponin3在神经元胞质中弥漫性分布,而癫痫急性发作7d后,癫痫组大鼠神经元中Calponin3则聚集在细胞皮质;对照组大鼠ROCK2仅在少量神经元突起中分布,而癫痫急性发作7d后,癫痫组大鼠大量神经元胞体和突起中均可见ROCK2分布。Western blotting检测,与对照组比较,癫痫组大鼠各时间点海马组织中Calponin3相对表达水平显著降低(P<0.05),但是随着时间延长,1周内逐渐升高并趋向正常水平。与对照组比较,癫痫组大鼠海马组织中ROCK2蛋白相对表达水平从癫痫急性发作后3d开始显著增加并持续至造模后7d(P<0.05);磷酸化ROCK2蛋白相对表达水平则从癫痫急性发作后1d就开始显著增加并持续到7d(P<0.05),且随着时间延长逐渐降低。结论:PTZ诱导幼鼠癫痫急性发作导致F-actin异常解聚,同时激活RhoA/ROCK2信号途径,上调ROCK2和Calponin3蛋白表达水平。

匹鲁卡品诱导的神经元癫痫模型

用不同浓度的匹鲁卡品处理提取的较高纯度的成熟神经元,筛选合适的匹鲁卡品诱导浓度并验证癫痫模型。方法 把培养了8天的神经元随机分为对照组和癫痫模型组,对照组给予正常神经元培养基培养,癫痫模型组在神经元培养基中分别加入终浓度为1、2、3和4mmol·L-1匹鲁卡品,24小时后换为正常培养基;采用全细胞膜片钳技术记录神经元的放电情况,检测神经元动作电位(AP)的变化。结果 正常培养8天的神经元仅有偶尔或单个的自发性放电,放电频率低; 3mmol·L-1 匹鲁卡品神经元兴奋性明显增加,放电频率变高,呈现短时间内自发的反复癫痫样放电,且放电幅度更高。结论 3mmol·L-1 匹鲁卡品诱导神经元癫痫样放电,成功建立细胞癫痫模型。

KKAy糖尿病脑病模型的探索及相关机制研究

目的:针对糖尿病引起的认知障碍而目前研究缺少比较理想动物模型的难题,我们探索采用KKAy自发性2型糖尿病小鼠建立糖尿脑病模型,为糖尿病脑病机制以及新药筛选评价研究提供实验基础和依据。方法:采用转基因KKAy小鼠作为模型对照组,野生型C57BL/6小鼠作为正常对照组。通过对其体重血糖及糖耐量等指标的测定,判断是否出现了典型的2型糖尿病症状及胰岛素抵抗。通过行为学实验Morris水迷宫和小鼠自主活动实验验证认知功能损伤,通过病理染色检测其海马皮层神经元的改变、脑室皮层萎缩程度及眼微血管病变,采用免疫组化测定脑内BDNF的表达,生化法和ELISA检测其胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高、低密度脂蛋白、胰岛素水平及炎症因子水平变化,Western Blot测定PI3K/AKT通路及Tau蛋白磷酸化表达变化程度。结果:与正常对照组相比,自发性KKAy小鼠血糖明显升高并维持高糖状态,体重明显增加,自主活动程度显著下降(P <0. 05或P <0. 01)。生化法结果显示,与正常对照组相比,模型对照组小鼠TC、TG、LDL-C水平显著升高,GSP含量显著增加,血清胰岛素增加,胰岛素抵抗指数增加(P <0. 05或P <0. 01)。Morris水迷宫结果发现,与正常对照组相比,模型对照组通过高脂饮食诱导至28周龄后出现认知功能显著下降,通过病理组织染色观察发现模型对照组小鼠脑室有明显扩张趋势,大脑皮层变薄萎缩,大量神经元细胞固缩,排列紊乱,海马椎体细胞层结构清晰,较多神经元细胞固缩。免疫组化结果发现,与正常对照组相比,模型对照组脑中BDNF表达明显减少。眼视网膜PAS染色发现,模型对照组视网膜血管出现明显损伤,可能诱导脑微血管病变。ELISA结果显示,与正常对照组相比,模型对照组TNF-α水平显著升高,IL-6和CRP水平有明显升高趋势。WB结果发现,模型对照组中海马和皮层组织中GSK-3β磷酸化表达显著增加,Tau蛋白及其磷酸化程度显著增加,Aβ表达明显增加(P <0. 05或P <0. 01)。结论:糖脂代谢障碍相关疾病导致的认知功能障碍作为糖尿病的一种容易忽略但非常重要的并发症应当重新认识,本研究发现KKAy小鼠是一种稳定可靠的2型糖尿病模型,通过高脂饮食长时间诱导后可出现严重认知功能障碍及脑部病理生理改变,符合糖尿病脑病基本病理情况,可作为糖尿病脑病模型进行研究。其发病机制可能与PI3K/AKT/GSK-3β通路有极大的关系,也可能通过炎症的产生和脑血管病变而导致认知障碍的发生,本模型可用于糖尿病脑病的药效及机制研究。