胶质瘤浸润组织中MMP-2、MMP-9、VEGF、Flk-1和P16的表达及其临床意义

目的:检测人脑胶质瘤浸润组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体Flk-1和多种肿瘤抑制基因1(multiple tumor suppressor 1,P16)的表达,阐述其与胶质瘤浸润的相关性。方法:用原位杂交和免疫组织化学方法检测33例胶质瘤浸润组织中MMP-2、MMP-9、VEGF、Flk-1和P16的表达,并比较不同分组胶质瘤间表达率及P16的缺失率。结果:在Ⅰ-Ⅱ级与Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤的浸润组织中,MMP-2和MMP-9的阳性表达率分别为20.00%、61.11%和13.33%、55.56%(P<0.01);VEGF和Flk-1阳性表达率分别为26.67%、66.67%和20.00%、72.22%(P<0.01);P16缺失率分别为13.33%和77.78%,两者之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:基质金属蛋白酶降解构成血脑屏障的基底膜和血管内皮细胞的过度增殖是胶质瘤浸润发生的必要条件。P16的缺失反映了恶性胶质瘤浸润组织具有增殖性生物学行为。

神经干细胞分化过程中c-myc内含子结合蛋白1与c-myc基因表达研究

目的研究神经干细胞分化为胶质细胞过程中c-myc内含子结合蛋白1(MIBP1)基因与c-myc基因的表达变化。方法从孕16d胚胎鼠脑组织中分离神经干细胞,以专用培养基IMDM(含有B27添加剂,重组人上皮生长因子、重组人碱性成纤维细胞生长因子-2、L-谷氨酸和黄体酮)进行培养。应用胶原及含10%胎牛血清、抗生素的分化培养基,诱导细胞向胶质细胞及神经元方向分化,第1天细胞贴壁启动分化,第7天明显分化,第14天进入终末分化。经过振荡处理,进一步得到纯化星形胶质细胞,采用胶质纤维酸性蛋白免疫组化方法鉴定细胞分化。分别提取分化前及分化后第1、7和14天神经干细胞的RNA,应用逆转录-多聚酶链反应方法检测神经干细胞中MIBP1与c-myc基因的表达,以β-actin作为内参照物,应用图像分析仪对电泳条带进行定量分析,观察两基因在神经干细胞分化中的作用。结果在神经干细胞分化过程中,MIBP1基因表达逐渐增强,其中未分化神经干细胞为(63.53±11.97)%,培养第1、7和14天表达率分别为(70.04±16.10)%、(79.09±15.40)%和(99.65±0.54)%。而c-myc基因表达呈逐渐降低,未分化神经干细胞为(99.76±7.62)%;培养第1、7和14天表达率分别为(75.20±12.33)%、(45.65±10.11)%和(33.31±4.34)%。两基因分别与相应未分化组比较,差异具有极显著性意义(均P<0.001)。星形胶质细胞纯化前后MIBP1基因表达量无明显变化。结论在神经干细胞分化为胶质细胞的过程中MIBP1基因表达逐渐增强,同时c-myc基因表达受到抑制。提示MIBP1基因与胶质细胞的分化过程相关,可能通过抑制c-myc基因的表达而实现调控作用。

血管内皮生长因子在颅内动脉瘤中的表达

目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在脑动脉瘤中的表达情况与临床特征之间是否存在相关性,为动脉瘤的病因研究提供线索。方法 脑动脉瘤标本18例,将3例尸检的Willis动脉环血管标本作为对照,切片做VEGF和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)的免疫组化染色。光镜下观察,记录染色部位,并对染色的强度进行分级,计算阳性指数。结合病变特点和临床特征,统计分析VEGF在动脉瘤中的表达与动脉瘤的大小、患者年龄、Hunt-Hess分级以及和bFGF表达的关系。结果 3例Willis动脉环均无VEGF和bFGF染色,而动脉瘤的VEGF和bFGF染色阳性率分别为88.9％(16／18)和55.5％(10／18)。经统计学分析,动脉瘤壁的中膜和外膜VEGF表达阳性率较内膜阳性率高(X2=9.94,P<0.05);VEGF在动脉瘤壁的表达与患者的年龄、动脉瘤的大小、Hunt-Hess分级无关(P>0.05)。VEGF较bFGF的表达阳性率高(X2=4.985,P<0.05)。结论 VEGF可能与动脉瘤的增长和结构的维持有关。动脉瘤的发生、生长和破裂是个复杂的过程,VEGF可能是主要的影响因素之一。

MMP-2、MMP-9在人脑胶质瘤及其浸润组织中的表达和临床意义

目的阐述MMP-2、MMP-9与胶质瘤的浸润机制。方法应用免疫组化方法和原位杂交方法检测胶质瘤和胶质瘤浸润组织中的MMP-2、MMP-9蛋白及MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA的表达。结果MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级胶质瘤的阳性表达分别为5.26±1.47、9.51±0.96、14.58±1.42、20.56±1.56和7.90±0.50、14.46±0.75、23.54±1.32、28.07±0.81。MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA在Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤浸润组织与Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤浸润组织中的阳性表达分别为5.70±0.95、8.20±0.43和2.30±0.14、10.32±0.65。两者之间有显著差异(P<0.01)。结论胶质瘤的恶性程度与MMP-2、MMP-9表达呈正相关,随着胶质瘤的恶性程度的增高而增加。恶性程度高的胶质瘤,分泌基质金属蛋白酶能力越强,肿瘤的浸润性也越强。在胶质瘤治疗的过程中,即使肿瘤组织自身被切除,浸润组织则是胶质瘤复发的根源。

兔颅脑创伤后血清抗脑抗体变化及脑组织谷氨酸的表达

目的:研究家兔颅脑创伤后抗脑抗体的变化及脑组织谷氨酸的表达。方法:16只成年新西兰白兔分为两组,颅脑创伤组(n=8)、假手术对照组(n=8),建立兔脑单侧重型液压冲击创伤模型,收集所有家兔创伤前2h及创伤后3、7、14、21、28、35、42、49d各时间点血清标本,用ELISA法检测血清抗脑抗体的浓度;用免疫组化方法检测脑组织谷氨酸(Glu)的表达。结果:在予以单侧液压打击后,颅脑创伤组家兔血清中抗脑抗体浓度增高并有峰值出现,假手术对照组抗脑抗体浓度变化则不明显,两组比较差异有统计学意义(P﹤0.05);颅脑创伤组家兔脑组织Glu的表达较假手术组增高,两组比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论:颅脑创伤后,血清中抗脑抗体与伤前相比有明显升高;颅脑创伤后脑组织Glu的表达增高,提示抗脑抗体可能是颅脑创伤后出现癫痫的原因之一。

分化相关基因MIBP1的表达与人脑胶质瘤恶性程度的关系

目的:应用荧光定量实时PCR技术检测与肿瘤分化相关的基因MIBP1(c-myc内含子结合蛋白1)在不同恶性程度的人脑胶质瘤中的表达。方法:收集病理确诊的30例不同恶性程度胶质瘤以及5例正常脑组织手术标本,抽提RNA,应用荧光定量PCR技术检测MIBP1基因在人脑胶质瘤中的表达,并分析该基因在不同级别胶质瘤中的表达情况。结果:荧光定量PCR系统稳定,WHOⅣ级胶质瘤与正常对照及Ⅱ级胶质瘤比较有显著性差异,多形性胶质母细胞瘤MIBP1基因表达明显降低。2例自身对照标本分析,Ⅳ级肿瘤中表达亦降低。结论:c-myc调控基因MIBP1在高度恶性胶质瘤中表达受抑制,提示该基因的下调可能为癌变的晚期事件。MIBP1基因可能有抑癌作用。

体温对颅脑创伤患者细胞间液葡萄糖和乳酸的影响

目的 观察不同体温条件下颅脑创伤患者脑部和腹部细胞间液中葡萄糖（Glu）、乳酸（Lac）及乳酸/丙酮酸（L/P）等指标的变化趋势.方法 将微透析导管分别插入51例患者脑创伤病灶半暗带区、相对正常脑组织区和腹部皮下组织,收集微透析液,灌流速度为0.3 μl/min.每小时收集1管透析液,平均收集时间为（67.10±18.27）h;生化分析仪测定收集的透析液中Glu、Lac及丙酮酸浓度.将患者根据所测定的直肠温度（RT）按每1度分组：RT＜33.0℃、33.0～33.9℃、34.0～34.9℃、35.0～35.9℃、36.0～36.9℃、37.0～37.9q和≥38.0℃,共7组.结果 腹部Glu在各体温下均显著高于脑部Glu（P＜0.05）,相对正常脑组织中Glu在RT＜36.0℃均显著高于受伤区Glu（P＜0.05）,以33.0～33.9℃时为最高（P＜0.05）.腹部Lac显著低于脑部的Lac（P＜0.05）,相对正常脑组织中Lac在RT＜35.0℃或≥37.0℃时均显著高于受伤区Lac（P＜0.05）.受伤脑组织的L/P随着体温的上升而下降（P＜0.001）;在RT＜33.0℃时,L/P值为脑受伤区＞腹部＞相对正常脑组织;在RT≥34.0℃时,L/P值为相对正常脑组织＞脑受伤区＞腹部.结论 维持RT在33～34℃或36～37℃更有利于患者脑部组织的生化代谢,可能更具有脑保护作用.

人外周血内皮祖细胞分离和诱导分化的实验研究

目的探讨人外周血内皮祖细胞和单个核细胞分离培养、诱导向内皮祖细胞分化的方法与鉴定。方法采取人外周血抗凝,用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离外周血中的内皮祖细胞和单个核细胞,于体外以细胞因子诱导单个核细胞向内皮祖细胞分化,用免疫荧光法和流式细胞仪分离鉴定单个核细胞向内皮祖细胞分化的细胞特异性标志。结果外周血内皮祖细胞和单个核细胞共同培养3d大部分贴壁密集生长,培养6d梭形细胞增多,培养12d收获细胞进行鉴定。Dil标记乙酰化低密度脂蛋白摄取率为(70.00±11.21)%,AC133,CD31,CD34,血管内皮生长因子受体鄄2和血管性假血友病因子免疫荧光染色阳性。流式细胞仪分类计数,AC133、CD31、CD34和血管内皮生长因子受体鄄2阳性细胞分别为95.80%、87.60%、1.27%和96.40%。结论外周血循环中的内皮祖细胞和单个核细胞共同培养,诱导后者分化的内皮祖细胞具有祖细胞特性且诱导分化率高。

颅脑创伤基础与临床研究十年回顾

针对颅脑创伤（TBI）救治的基础与临床研究，始终是近年来学术界关注的重点。虽然，在21世纪的最初10年该领域未能出现里程碑式的突破性进展，但在与其相关的诸多领域内，医学工作者仍然取得了可喜的进步。本文将对此进行简要回顾、总结、展望。

显微神经外科解剖学的现状与未来

显微神经外科解剖学，顾名思义是为神经外科医疗服务的应用解剖学，它通过手术显微镜观察神经系统的精细结构，加深神经外科医师对目标区域神经系统结构、生理和病理情况的了解，从而更好地完成手术，改善手术方式和结果。

强脑因子抗脑衰老作用的实验研究

对动物脑组织提取物 强脑因子,进行了类神经营养因子抗脑衰老功能的检测。结果表明该因子对人胚胎脑神经培养细胞有促生存活性和促突起生长活性,对成年小鼠的学习能力有一定程度的改善,并可显著提高老化鼠抗自由基能力。证明强脑因子是具有抗神经系统衰老作用的生物活性制剂。

影响神经导航准确性因素及校正方法

目的 探讨影响神经导航准确性的因素并研究校正方法。方法 应用神经导航系统切除颅内病变90例,在手术前成像,手术计划设计,体位摆放及手术操作各个环节进行改进,并通过术中校正顺利达至靶点。结果 应用上述方法,神经导航准确性良好,完整切除病变,无严重并发症和手术死亡。结论 在神经导航手术中,应防止各种因素影响导航的准确性,正确的手术操作,术中对导航系统的校正及丰富的临床经验是手术成功的关键。

利用国外政府贷款谋求医院自身发展

我院早在90年代初期就利用奥地利、美国政府贷款购买医疗仪器,对促进医院发展起到了重要的作用.2001年,我们还进行了申请美国政府大额贷款的尝试.在此过程中接触学习到许多有关信贷方面的专业知识及我国关于外债管理的相关政策,现谈谈我院利用外国政府贷款的一些相关知识、相关政策及学习体会,以便与大家共同交流,互相学习.

细胞间缝隙连接通讯改变在神经系统疾病中的应用

细胞间缝隙连接通讯（gap junctional intercellular communication，GJIC）概念的提出已达40年，随着划痕标记染料示踪（scrape—loading and dye transfer，SLDT）技术和激光扫描共聚焦显微镜下荧光淬灭后恢复（fluorescence redistribution after photobleacing，FRAP）技术的创立，使得近10余年来各学科关于细胞间缝隙连接通讯的研究快速发展，业已成为生命科学的研究热点之一。

运用循证医学思想进行门诊业务流程模式再造

为了减少患者看病盲目性,提高门诊医生诊疗效率,由循证医学要求出发,在综合医院建立"全科医生轮流值守参与的分诊咨询的机构"和"症状诊疗单元",对门诊诊疗程序进行业务流程模式再造的探索。

亚低温抑制大鼠弥漫性脑损伤后细胞凋亡的研究

目的 探讨大鼠不同程度弥漫性脑损伤后脑组织的凋亡变化过程及亚低温治疗对脑细胞凋亡的抑制作用。方法 采用大鼠Marmarou颅脑创伤装置制作弥漫性脑损伤模型,然后将128只Wistar大鼠分为未损伤组(对照组)、重度损伤组、轻度损伤组和亚低温治疗组。通过电子显微镜、组织切片原位末端标记DNA片段(TUNEL染色)、琼脂糖凝胶电泳(DNA Ladder法)等方法,观察和比较不同程度脑损伤后,大鼠脑皮层及海马区凋亡细胞的形态、特点和数量。结果 (1)损伤后24～48 h,皮层及海马区可见大量细胞皱缩、核碎裂、核不规则等细胞凋亡现象,48 h较24 h更为严重;亚低温治疗后24～48 h,电子显微镜观察皮层及海马区未见细胞皱缩、核碎裂等细胞凋亡现象。(2)TUNEL染色结果显示,随着损伤程度的加重凋亡明显加重,损伤后48 h达高峰,然后逐渐下降。轻度损伤组细胞凋亡主要限于海马CA2和CA3区;重度脑损伤组细胞凋亡涉及整个海马结构,同时还广泛累及额顶区皮质。损伤后第24、48、72 h,皮层及海马区的凋亡细胞数量较同期未治疗组明显减少。(3)重度损伤后48 h,海马和皮层区细胞琼脂糖电泳可见典型的DNA梯状带,其他时间未见梯状带。亚低温治疗组、轻度脑损伤组及未损伤组亦未见梯状带。结论 轻度弥漫性脑损伤后,脑细胞凋亡多发生于海马CA2和CA3?

亚低温脑保护研究的发展与现状

早在两千多年前,古埃及人就已发现应用冷敷的方法有明显的止痛效果.