成体大凉疣螈肝脏的组织形态学观察

本文采用HE染色和Masson染色方法,研究了成体大凉疣螈肝脏的基本组织形态和胶原纤维分布情况。解剖观察见成体大凉疣螈的肝脏发达,体积较大,分两叶,外观呈虎斑状;组织形态学观察显示其肝内结缔组织少,肝小叶分界不清晰;肝索排列呈放射状,肝细胞体积较大,胞浆丰富,细胞核位于中央或被胞质内丰富的糖原和脂滴挤到一侧,表明肝脏是其重要的贮能器官。肝实质内大量的黑色素颗粒聚缩形成黑色素团,分析认为这与已报道的蝾螈科种类相似,是低氧环境下保护性适应的结果。染色结果表明,成体大凉疣螈肝脏表面覆盖有浆膜,肝小叶内分布有较为丰富的胶原纤维。

不同宿主来源犬瘟热病毒H基因的克隆测序与分析

应用RT-PCR的方法从2013-2015年来自我国部分地区20份犬、貂、狐和貉源犬瘟热阳性病料中克隆得到犬瘟热病毒（CDV）H基因。序列分析结果表明,20株CDV的H基因核苷酸与推导氨基酸序列的同源性分别为：90.6%~100%和90.5%~100%;相应地,与CDV3、Onderstepoort等传统疫苗株相比,其同源性分为90.4%~99.9%和89.0%~99.8%。基于CDV H基因推导氨基酸序列构建系统进化树的结果显示,除TS1510属于Amecica-1型外,其余全部为Asia-1型。表明Asia-1型犬瘟热病毒仍为目前一些地区流行基因型,弱毒感染动物也可使之产生典型犬瘟热症状。

犬瘟热病毒细胞受体研究进展

犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)是一种宿主广泛的病原,能引起患病动物的严重呼吸道和消化道症状。CDV具有信号淋巴细胞激活分子(SLAM)和细胞粘附分子4(Nectin-4)2种主要受体。当病毒进入动物上呼吸道后,表达SLAM的淋巴细胞与CDV血凝素(H)蛋白相互作用,以囊膜与宿主细胞融合的方式使病毒进入细胞,启动病毒感染过程,随血液循环通过黏膜上皮细胞淋巴细胞浸润的方式广泛地感染体内表达Nectin-4的上皮组织和器官,最终通过呼吸道和消化道上皮细胞释放病毒粒子造成疾病的传播。CDV与该2种受体的相互作用是病毒跨物种间感染的重要基础。本文就国内、外最新研究进展并结合作者的工作,对上述问题进行了综述和探讨。

不同毒株犬瘟热病毒结构基因的通用扩增及序列测定

为了更准确、快速、高通量地追溯犬瘟热病毒流行毒株来源,揭示其进化规律,本研究分析比对了GenBank中已公布的23株犬瘟热病毒全基因组序列,针对6个结构基因的保守区设计了特异性通用引物,用于扩增犬瘟热病毒野毒株和疫苗株的6个结构基因。经过优化引物对的特异性、通用性、工作浓度及退火温度等,最终确定6对特异性通用扩增引物,对本室保存的3株疫苗毒CDV-3株、OR12株、CDV/R-20/8株,及2个流行毒HBF-1株和SD(14)07株的6个结构蛋白基因进行RT-PCR通用扩增。取5μL扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳,结果显示,以上述5株犬瘟热病毒的cDNA为模板,用6对通用引物扩增,分别获得6个特异性条带,大小与预期相符。选取疫苗毒CDV-3株和野毒HBF-1株N、P、M、F、H和L基因连接至p EASY-Blunt载体上,进行序列测定。测序结果显示,与GenBank中已公布的序列同源性均大于99.0%,证实筛选的6对特异性引物能够实现对犬瘟热病毒野毒株和疫苗株的不同结构基因的准确扩增,并获得精准序列。这提高了犬瘟热病毒检测鉴定的效率和特异性,有利于人们快速、准确地获取犬瘟热病毒未知毒株结构基因的序列,追溯病原来源和分析其进化规律,为疫苗研制提供思路。