心脏直视手术中输自体血前后脑电图和颈动脉血流变化的观察

采用输自体血，可减少术后库血的用量，减少了因输库血引起的并发症，有明显的社会意义和经济效益。为观察输自体血前后对脑电图的变化，我们进行一系列的观察，结果显示：在体外循环开始前脑电波波率、波幅两组无明显差异（Ｐ＞０．０５）。放血后颈动脉平均流速、流量较放血前明显加快，这与同时输入液体，血液稀释有关。在手术结束时各项指标表明输自体血对患者脑电图无影响。

颈动脉血流监测在心内直视手术中的应用

目的：在体外循环（ＣＰＢ）心内直视手术中，术后脑部并发症仍时有发生，颈动脉血流可间接反映脑循环状态。我们用颈动脉血流结合脑电图（ＥＥＧ），对脑功能的判断进行了研究。方法：选择２０例心内直视手术患者，用日本ＱＦＭ－１０００型激光多普勒颈动脉血流测定仪测量颈动脉平均血流量、颈动脉平均血流速度、颈动脉血管直径。用日本ＮＩＨＯＮＫＯＨＤＥＮ７２０９型八导脑电图仪进行枕部脑电波波率、波幅的连续观察。结果：①ＣＰＢ开始前及结束后颈动脉流量基本平稳（Ｐ＞０．０５），而ＣＰＢ结束后颈动脉平均流速较ＣＰＢ开始前有所加快，颈动脉血管直径也较ＣＰＢ开始前略小，分析其原因可能与ＣＰＢ结束后麻醉偏浅及血液的稀释有关。②颈动脉平均血流量与平均动脉压有较好的相关性（ｒ＝０．８１１５，Ｐ＜０．００１）。③颈动脉平均血液流速与血管直径呈明显负相关（ｒ＝－０．８３６１，Ｐ＜０．００１），与脑电波幅呈明显负相关（ｒ＝－０．７５１５，Ｐ＜０．００１）。④在ＣＰＢ中，平均动脉压与脑电波呈明显正相关。⑤鼻咽温度与脑电波有明显正相关（ｒ＝０．８９６７，Ｐ＜０．００１），说明ＣＰＢ中脑电波随温度而变化，即温度愈低对脑电波的抑制愈明显。结论：①脑电图既无创?

盐酸关附甲素对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道(J_(Ca-L))的影响

目的:研究盐酸关附甲素对正常大鼠心室肌细胞L型钙离子通道(I_(Ca-L))的影响。方法:应用膜片钳全细胞记录法,记录关附甲素对I_(Ca-L)的作用并对通道动力学进行初步评价。结果:关附甲素呈浓度依赖性阻滞I_(Ca-L),在25,125,250和1000μmol·L^(-1)时I_(Ca-L)峰值电流密度(去极化至0mV时)分别减少为用药前的81．76%, 77．54%,76．46%和64．77%(P＜0．05)。关附甲素使I_(Ca-L)的I-V曲线上移,但不改变其激活电位、峰值电位。关附甲素呈轻度使用依赖性阻滞I_(Ca-L),对I_(Ca-L)静息态有阻滞作用。关附甲素对I_(Ca-L)激活曲线无明显影响,但使I_(Ca-L)失活后再激活的恢复时间常数(τ)延长,有作用于I_(Ca-L)的失活态的可能。结论:因为关附甲素产生明显I_(Ca-L)阻滞的浓度远大于临床浓度,其对I_(Ca-L)的阻滞作用可能不是抗心律失常的主要作用机制。关附甲素呈浓度依赖性阻滞I_(Ca-L),其作用于L型钙通道的静息态,也有可能作用于失活态。

反相离子对高效液相色谱法测定心肌组织中的三磷酸腺苷

采用反相离子对高效液相色谱法测定心肌组织中三磷酸腺苷 (ATP)的含量。样品经高氯酸溶液沉淀蛋白 ,上清液用KOH溶液中和后用反相离子对高效液相色谱法分离测定。色谱柱为SpherisorbODS2柱 ,流动相为甲醇 KH2 PO4缓冲液 (内含 5mmol/LIPR A离子对试剂 ) ,在 2 59nm波长处检测。方法最低检测限为 2mg/L,在 5mg/L～ 1 0 0 mg/L范围内有良好的线性关系 (r=0 9998) ,方法的回收率为 97 8%～ 1 0 4 % ,日内精密度 <4 85% ,日间精密度 <8 81 %。方法准确、灵敏、快速 ,适用于动物和人心肌组织中ATP含量的测定。

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响

目的研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)的影响,探讨心肌肽素抗心律失常的作用机制。方法用急性酶解法分离豚鼠心室肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的心肌肽素对内向整流钾电流的影响。结果在测试电压100mV的条件下,观察豚鼠心室肌细胞IK1内向电流对心肌肽素的影响。10μg/ml心肌肽素使IK1从给药前21.0±6.3pA/pF降低到给药后18.4±5.4pA/pF(P<0.05),抑制率为(20±3)%。50μg/ml心肌肽素使IK1从给药前22.8±5.5pA/pF降低到给药后16.0±3.8pA/pF(P<0.01),抑制率为(32±6)%。50μg/ml心肌肽素没有改变IK1的电流密度电压曲线形态。结论心肌肽素抑制豚鼠心室肌细胞IK1,可能是其抗心律失常作用的机理之一。

缺血预处理联合停搏液对未成熟兔心脏的保护作用

目的 利用Langendorff模型研究缺血预处理 (IschemicPreconditioning,IPC)联合高钾停搏液对兔未成熟心脏缺血再灌注损伤的影响。方法 幼兔 (14～ 2 1d)离体灌注心脏 ,经历 5min缺血、10min再灌的IPC处理后 ,使用St.ThomasⅡ号液使其停跳 ,观察其在生理体温 (39℃ )下接受 4 5min缺血、4 0min再灌注后血流动力学、冠脉流出液心肌酶及心肌能量变化。结果 IPC联合高钾停搏液组较单纯高钾停搏液组再灌注后心率 (HR)、冠脉流出量 (CF)、左室发展压 (LVDP)及左室最大上升和下降速率 (±dp/dt)的恢复率明显改善 ,并保存了心肌ATP含量 ,减少了肌酸磷酸激酶同工酶 (CK MB)漏出。

温血诱导心脏停搏和主动脉开放前温血灌注的心肌保护作用

将１５只犬随机分为低温心脏停搏（下简称停搏）、主动脉开放前温血灌注、常温停搏十主动脉开放前温血灌注３组。结果发现低温诱导停搏对心肌代谢、心脏收缩及舒张功能的保护均不理想，主动脉开放前温血灌注能改善低温停搏的保护效果，但对冠状循环及舒张功能的保护仍不完善，常温停搏十主动脉开放前温血灌注能较完善的保护心肌代谢、心脏收缩及舒张功能。

蛋白激酶A在缺血预处理抑制心肌细胞核因子-κB-DNA结合活性中的作用

目的:探讨蛋白激酶A在缺血预处理抑制心肌细胞核因子-κB-脱氧核糖核酸(DNA)(NF-κB-DNA)结合活性中的作用。方法:采用Langendorff离体心脏灌注模型。40只SD大鼠随机分为4组,缺血/再灌注组、缺血预处理组、蛋白激酶A抑制剂组(H89组)和脯氨酸二硫氨基甲酸组(PDTC组,核因子-κB抑制剂)。在平衡期、复灌10 min、20 min、30 min记录心率、左心室发展压,在平衡期、复灌30 min时记录冠状动脉流量,测定冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量。复灌30 min后留取心肌用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白[p-CREB(Ser133)]含量,凝胶电泳迁移率法(EMSA)检测核因子-κB-DNA结合活性。结果:与缺血/再灌注组相比,缺血预处理组和PDTC组心肌细胞核内p-CREB(Ser133)含量升高了2.31倍和1.65倍;与缺血预处理组相比,H89组p-CREB(Ser133)含量显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.01)。与缺血/再灌注组相比,缺血预处理组心肌细胞核内核因子-κB-DNA结合活性明显降低;与缺血预处理组相比,H89组和PDTC组核因子-κB-DNA结合活性显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01)。复灌30min时,与缺血预处理组相比,缺血/再灌注组、H89组和PDTC组心率、左心室发展压和冠脉流量明显降低,乳酸脱氢酶和肌酸激酶活性显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05～0.01)。结论:缺血预处理可通过激活蛋白激酶A抑制核因子-κB-DNA结合活性减轻心肌缺血再灌注损伤。

钾离子通道开放剂对未成年兔心肌的保护作用

目的：探讨钾离子通道开放剂对未成年兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：在改良Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ模型上，对Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ液（Ｓ组）及用１０μｍｏｌ／ＬＮｉｃｏｒａｎｄｉｌ强化的Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ液（Ｓ＋Ｎ组）两种停跳液进行低温缺血再灌注离体心脏实验。观察缺血前、后心功能变化（左心室变化压、左心室舒张末压、最大压力变化速率、心肌含水量及冠状动脉流量等指标）。结果：离体心脏缺血再灌注后，Ｓ＋Ｎ组左心室变化压、左心室舒张末压、最大压力变化速率及冠状动脉流量等指标方面恢复明显好于Ｓ组。结论：Ｎｉｃｏｒａｎｄｉｌ作为新的有效的停跳液成分，可增强Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ对未成年兔心肌的保护作用。

体外循环中康斯特保护液肺动脉灌注的肺保护作用

目的采用体外循环下肺动脉灌注动物模型观察康斯特保护液（HTK液）对体外循环所致肺损伤的保护作用。方法20只大耳白兔,体重2.5-3Kg,随机分为对照组（体外循环组）;实验组（体外循环＋HTK液肺动脉灌注组）。于麻醉后、复跳60min、90min时抽取血样检测髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）和细胞因子白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）浓度。实验结束后取肺组织作干湿比检测并作光镜和电镜检查。结果实验组MPO、MDA和IL-6在复跳60min、90min时浓度均低于对照组,其中90min时差异显著（P〈0.05）;IL-8浓度低于对照组,但无显著差异（P〉0.05）;实验组肺组织干湿比低于对照组（P〈0.05）;光、电镜结果显示：实验组肺组织病理改变明显轻于对照组。结论HTK液肺动脉灌注能明显抑制体外循环引起的炎症反应,减轻体外循环所造成的肺损伤。

肾上腺髓质素对大鼠离体血管平滑肌张力作用的影响

目的 研究肾上腺髓质素 (Adrenomedullin,Adm)对大鼠离体血管平滑肌的影响及其作用机制。方法 大鼠离体胸主动脉血管环张力记录法。结果 Adm1- 5 0和降钙素基因相关肽 (CGRP)呈浓度依赖的方式抑制苯肾上腺素 (Phe)所致的血管环收缩。血管环预先用β1受体抑制剂atenolol( 10 -6 mol/L)或β2 受体抑制剂ICI- 118,5 5 1( 10 -7mol/L)处理后 ,Adm1- 5 0仍能增强血管环对异丙肾上腺素 (Iso)所致的舒张反应。此外 ,Adm1- 5 0对磷酸二酯酶抑制剂 (rolipram)所致的血管舒张反应亦有增强作用 ,但这种作用在腺苷环化酶激动剂 (forskolin)存在的条件下被抑制。结论 Adm1- 5 0是一种强血管舒张因子。其舒张血管平滑肌的机制与活化腺苷环化酶 ,增加细胞内cAMP 。

黄芪注射液预处理对兔未成熟心肌保护作用的研究

目的 探讨单纯黄芪预处理对兔未成熟心肌再灌注 (I/ R)损伤的影响。方法 2 4只幼兔 (14～ 2 1d)随机分 3组 ,每组 8只 ,利用 L angendorff模型灌注其离体心脏。平稳灌注 3 0 m in后 ,向球囊缓慢注入生理盐水 ,调整至左室舒张末压 (L VEDP)为 10 mm Hg(1mm Hg=0 .13 3 k Pa)。对照组继续灌注 15 min;黄芪预处理组 :则用黄芪注射液灌注 15 min。两组心脏均经历停灌 3 0 min(保温、保湿 )、缺血自动停跳及再灌注 40 min复制全心 I/ R模型。观察各组的血液动力学、冠脉流出液心肌酶、心肌能量变化、病理学变化及分子生物学改变。结果 黄芪预处理组左心功能、冠脉流量恢复及再灌后心肌组织内 ATP含量明显优于对照组 ,心肌酶值明显低于对照组 ,心肌细胞线粒体半定量分析显示预处理组线粒体损伤轻于对照组 ,心肌诱导型一氧化氮合酶 i NOS高于对照组。

大鼠体外循环模型的建立

目的建立大鼠体外循环(extracorporeal c ircu lation,ECC)动物模型,为心血管外科ECC术后重要器官损伤,尤其是脑损伤的研究提供简单可靠、经济的实验平台。方法选用雄性SD大鼠,经右颈静脉、股静脉插管引流,股动脉插管灌注建立ECC。ECC 1 h,监测血流动力学指标及血气、电解质的变化。结果ECC中动物血流动力学稳定,血气结果满意,完全符合满意ECC标准。停机后心血管和呼吸功能恢复顺利。结论利用特制动物实验膜肺,建立经右颈静脉、股静脉插管引流,股动脉插管灌注的大鼠体外循环模型,具有安全、稳定、简单、实用的特点,是进行与体外循环有关脏器损伤,尤其是脑损伤研究可靠的实验平台。

三甲氧苄嗪对低温保存大鼠离体心脏的保护作用

目的 研究三甲氧苄嗪 ( 10 -6 M)对离体心脏低温保存的影响 ,并探讨其作用机制。方法 以改良的Langendorff离体鼠心灌注模型 ,观察三甲氧苄嗪加入UW(三甲氧苄嗪 - 10 -6 M)液后 ,离体鼠心在 4℃保存 6h后血流动力学、冠脉流出液心肌酶漏出量、心肌含水量、心肌ATP、MDA含量、心肌超微结构的变化。结果 UW液加入三甲氧苄嗪组与未加入三甲氧苄嗪组相比 ,复灌后心功能恢复率明显增高 ( p<0 .0 1) ;心肌含水量 ( p<0 .0 5 )和丙二醛含量较低 ( p<0 .0 1) ;心肌酶漏出量明显减少 ( p<0 .0 1) ;心肌ATP水平得到很好地维持 ( p <0 .0 1) ;心肌超微结构尤其是线粒体结构改变轻 ,损伤小。结论 10 -6

高钾溶液对猪冠状动脉内皮细胞功能影响的实验研究

目的 :探讨高钾溶液对猪冠状动脉内皮细胞功能的影响及其机制。方法 :取新鲜猪心外膜下冠状动脉前降支下三分之一 ,切成 3mm长的血管环。采用器官槽法 ,分别用Krebs Henseleit重碳酸盐缓冲液 (KH)、2 0mmol/L的高钾溶液、50mmol/L的高钾溶液浸泡血管环 1h后 ,检测在 7μmol/L环加氧酶阻断剂消炎痛、3 0 0 μmol/L一氧化氮合成酶阻断剂N 硝基 L 精氨酸、1mmol/L钙激动性钾通道阻断剂四乙胺、或 3μmol/LATP敏感性钾通道阻断剂优降糖的作用下 ,3 0nmol/L前列腺素F2α引发的预收缩强度和非受体介导钙离子载体 ( 10 -1 0 ～ 10 -6mol/L)引发的内皮源性舒张反应。结果 :与单纯浸泡于KH的冠状动脉相比 ,内皮源性超极化因子 (EDHF)介导的内皮源性舒张反应 ,经 2 0mmol/L、50mmol/L高钾溶液及四乙胺作用后显著降低 ,但加入优降糖后改变不明显。结论 :EDHF在冠状动脉内皮源性舒张中起重要的作用 ,高浓度钾离子抑制EDHF的作用。

选择性钠/氢离子交换抑制剂预处理对未成熟心肌的保护作用

目的 研究选择性Na+ /H+ 交换抑制剂HOE6 4 2 (Cariporide)预处理对未成熟心肌缺血 /再灌注损伤的保护作用及机制。方法 2 0只健康新西兰幼兔 (3～ 4周龄 ) ,利用Langendorff左室做功模型灌注其离体心脏 ,建立全心缺血 /再灌注模型。KH液自主动脉逆行灌注心脏 ,向球囊缓慢注入生理盐水 ,调整至左室舒张末压 (LVEDP)为 10mmHg ,做功 2 0min ,随机分为两组 ,组Ⅰ :对照组 ,继续灌注 15min ;组Ⅱ :HOE6 4 2预处理组 ,用加入HOE6 4 2的KH液 (浓度为 5 μmol/L)继续灌注 15min。然后两组心脏均以St.Thomas停搏液诱导停跳 ,常温(37℃ )缺血 4 5min(保湿保温 ) ,再灌注 6 0min。记录冠脉流量 (CAF) ,多导生理记录仪记录左心功能指标 ,原子吸收分光光度计测定心肌细胞内钙 (Ca)含量 ,自动生化分析仪测量冠脉流出液中磷酸肌酸激酶 (CK)、磷酸肌酸激酶同工酶 (CK -MB)、乳酸脱氢酶 (LDH)漏出量含量 ,计算心肌含水量 ,透射电镜观察心肌超微结构改变。结果 CAF、左室发展压 (LVDP)、左室压力微分 (±dp/dtmax)恢复率 ,心肌组织内Ca及心肌含水量 ,心肌超微结构变化 ,HOE6 4 2预处理组明显优于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 HOE6 4 2预处理通过减少细胞内钙超载 ,模拟缺血预处理的心肌保护效果 ,对未成熟心肌缺血 /?

罗比卡因对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的观察罗比卡因对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨其心肌负性肌力作用的机制。方法以急性酶解法获得豚鼠单个心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录L型钙电流(ICa-L)。结果罗比卡因浓度依赖性阻滞豚鼠心室肌细胞ICa-L,其半最大抑制浓度(IC50)为(212±38)μmol/L,Hill常数为1.15±0.18。罗比卡因100μmol/L使钙电流峰值从(-4.6±1.7)pA/pF减小至(-2.9±0.9)pA/pF(P<0.01),抑制率为(37±3)%;使电流密度-电压曲线上移,但不改变激活电压、最大激活电压和曲线的形状;激活曲线也没有明显改变;使稳态失活曲线向左移,半失活电压由给药前(-11.0±1.0)mV降为给药后(-15.0±0.6)mV(P<0.05);使ICa-L稳态失活后再恢复的时间常数(τ)明显延长,由给药前(260±17)ms增加至给药后(346±32)ms(P<0.05)。结论罗比卡因作用于L型钙通道的失活态,从而抑制了心室肌细胞ICa-L,是其产生负性肌力作用的原因之一。

褪黑素对鼠心肌缺血再灌注后血流动力学的影响

目的 探讨不同浓度褪黑素预处理对成年大鼠心肌缺血 -再灌注 (I/R)后血流动力学的影响。方法 32只成年S -D大鼠 (35 0 4 0 0g)随机分为 4组 ,每组 8只 ,利用Langendorff模型灌注其离体心脏 ,待心脏功能稳定后 ,对照组平衡 30min后缺血再灌注 ,预处理组则用不同浓度的褪黑素灌注 30min后缺血再灌注。各组均为常温(37℃ )缺血 2 5min ,复灌 6 0min。观察各组血流动力学改变。结果 褪黑素预处理组左心功能恢复明显高于对照组。结论 褪黑素预处理促进成年大鼠心肌缺血 -再灌注 (I/R)后血流动力学恢复。

大鼠离体肺再灌注模型的建立和改进

目的本实验利用微创方法建立大鼠离体肺灌注模型。方法将一只受体大鼠股动脉、颈静脉插管,引流出静脉血灌注低温保存后的供体肺,氧合后的血液回输入受体大鼠体内。每只受体大鼠建立控制性交叉循环后,灌注一只供体肺1 h,取股静脉流出血样测定pH、PO2、PCO2和Hb的变化情况。结果各组间pH、PO2、PCO2和Hb经统计学分析无明显差异(P>0.05)。结论控制性交叉循环下受体大鼠血流动力学稳定,能够较长时间地提供符合生理状态的静脉化全血。可用于供体肺保存及缺血再灌注损伤的研究。

乌司他丁对供体肺的保护作用

目的:观察乌司他丁对长时间低温保存的供体肺的保护作用。方法:实验于2004-10/2005-03在北京阜外心血管病医院完成。①选取健康15周龄SD大鼠36只,随机分为空白对照组、乌司他丁0.5万u/kg组、乌司他丁1.0万u/kg组,12只/组,每组均取6只作为肺移植的供体鼠和受体鼠。②空白对照组大鼠供肺经低钾右旋糖苷液灌洗后,4℃冷冻保存18h后静脉血再灌注1h;乌司他丁0.5,1.0万u/kg组大鼠供肺经低钾右旋糖苷液灌洗后,再灌注静脉血中分别加入乌司他丁0.5,1.0万u/kg,余同空白对照组。③各组供体鼠腹腔麻醉后摘取供肺,4℃经肺动脉插管灌注低钾右旋糖苷液30mL,灌注高度25cmH2O。④各组受体鼠于再灌注20min前,麻醉后游离左总颈静脉,插入颈静脉插管与相应的循环管道连接。游离左侧颈总动脉,插入颈动脉插管与预充好的循环管道连接。游离左股动脉,插入入股动脉插管并连接动脉测压管测压。⑤于供体肺循环灌注1,15,30,45,60min测定供肺静脉流出血氧分压、平均肺动脉压、气道峰压;灌注结束后测定肺组织湿干比、丙二醛含量、髓过氧化物酶活性、白细胞介素8的含量。结果:实验选取大鼠36只,作为受体的18只(每组各6只)进入结果分析。①供体肺再灌注过程中各时段氧合血氧分压、平均肺动脉压、气道峰压的变化:与空白对照组比较,乌司他丁0.5,1.0万u/kg组供体肺灌注30,45,60min时氧分压均明显升高(P<0.01),平均肺动脉压和气道峰压均明显降低(P<0.01或0.05);与乌司他丁0.5万u/kg组比较,乌司他丁1.0万u/kg组供体肺灌注45,60min时氧分压均明显升高(P<0.05),平均肺动脉压和气道峰压均明显降低(P<0.01或0.05)。②再灌注后肺组织湿干比、丙二醛含量、髓过氧化物酶活性、白细胞介素8含量的变化:与空白对照组比较,乌司他丁0.5,1.0万u/kg组供体肺再灌注后湿干比、丙二醛含量、髓过氧化物酶活性、白细胞介素8含量均明显降低(P<0.01);与乌司他丁0.5万u/kg组比较,乌司他丁1.0万u/kg组供体肺再灌注后以上各指标亦均有所降低(P<0.01或0.05)。结论:于灌洗液中及再灌注时应用乌司他丁,可以减轻供肺的缺血再灌注损伤,改善供肺功能,其保护作用与给药剂量具有明显的量效关系,1.0万u/kg保护效果较佳。