松萝酸抑制人膀胱癌细胞增殖作用机制研究

为了探究松萝酸对人膀胱癌的影响,体外培养人膀胱癌细胞T24、RT4,用不同浓度(12.5、25、50、100、200μmol/L)的松萝酸分别处理T24、RT4细胞24 h和48 h,采用MTT法检测T24、RT4细胞的增殖情况。研究结果发现松萝酸处理后细胞内的活性氧(ROS)水平增加且通过线粒体途径、死亡受体途径来诱导T24细胞发生凋亡:(1)松萝酸对T24、RT4细胞增殖均有抑制作用,且均呈现时间和剂量依赖性,其中,松萝酸对T24细胞增殖的抑制率更高;(2)通过Hoechst 33342染色与Annexin V-FITC/PI双染发现,随着松萝酸浓度的升高,凋亡的T24细胞逐渐增多;(3)T24细胞经松萝酸处理后,细胞内ROS水平升高,cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-8、cleaved-Caspase-9和Bax蛋白的表达量增加,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和Bcl-2蛋白的表达量降低,且Bax蛋白表达量与Bcl-2蛋白表达量的比值增加。

黄嘌呤氧化酶靶向小分子抑制剂的虚拟筛选

为了挖掘生物活性高、靶点明确的新型抗痛风药物先导化合物,以黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)为靶标虚拟筛选小分子抑制剂.从PDB数据库下载XOD蛋白晶体结构,经Schrodinger 2018中的“Protein prepara-tion wizard”模块预处理,基于XOD活性口袋与小分子配体作用方式特征构建了3个药效团,对FDA数据库和Chemdiv数据库进行分子对接筛选.结果发现:以非布索坦与XOD对接分数-35.790 kJ/mol为阈值,筛选得到低于该分数的化合物共206个.通过类药五原则以及ADMET分析,发现有8个化合物具有较好的成药性.将此8个化合物进行结合自由能计算,其中氟芬那酸、罗索沙星、化合物6(CAS:400076-03-1,苯并吡唑类化合物)和化合物7(CAS:866050-17-1,酞嗪类化合物)与阳性对照组非布索坦的作用方式相似,能与黄嘌呤氧化酶形成稳定性较强的复合物,可作为潜在的黄嘌呤氧化酶抑制剂.

基于分子模拟方法探究杜仲叶中安神活性成分及其作用机制

本研究通过分子模拟方法探究杜仲叶中安神活性成分。在TCMSP数据库中检索杜仲叶的化学成分,以“insomnia”和“anxiety”为关键词在GeneCards数据库中检索安神作用相关靶点。将检索得到的化学成分和靶点蛋白通过Schr?dinger软件进行分子对接,根据对接分数进行筛选,对筛选得到的配体-蛋白复合物进行结合自由能计算。与阳性对照组相比化合物儿茶素、桃叶珊瑚苷和槲皮素与靶点蛋白SLC6A4、SCNA、DRD2和HTR2A能够形成稳定的复合物体系。化合物儿茶素、桃叶珊瑚苷和槲皮素可能为杜仲叶中安神作用的活性成分。

基于网络药理学与分子对接探究麻黄-桂枝药对治疗类风湿性关节炎机制

通过TCMSP数据库检索麻黄、桂枝中的活性成分以及对应的靶点蛋白,在GeneCards数据库中以“rheumatoid arthritis”为关键词检索类风湿性关节炎(RA)的相关靶点,将收集的2类靶点相互映射取交集后通过STRING平台构建PPI网络,利用Cytoscape软件进行可视化分析;借助David 6.8数据库,对交集靶点进行GO与KEGG富集分析;最后利用Schrodinger软件对核心靶点与关键活性成分进行分子对接验证。2类靶点映射得到交集靶点共134个,PPI分析得到核心靶点为AKT1、IL6、TP53、RELA和CCND1。GO与KEGG富集分析得到关键信号通路为TNF信号通路、Toll样受体信号通路和PI3K-Akt信号通路。分子对接结果显示槲皮素、木犀草素、二氢槲皮素与AKT1、IL6、TP53有较好的结合效果。研究推测麻黄-桂枝药对中的活性成分可能通过抑制炎性介质表达、抑制关节滑膜中树突细胞以及巨噬细胞过量增殖等途径来阻止RA病理发展进程。

热疗对化疗的增敏作用研究进展

肿瘤热疗安全有效、不良反应低且与其他治疗方法有协同作用。热疗主要通过直接对肿瘤细胞产生杀伤作用和发挥增敏效应来提高放化疗作用效果,热疗对化疗的增敏作用尤为引人注目。本文回顾了近年来热疗在恶性肿瘤治疗领域中的研究,现对热疗基础及其对人组织细胞淋巴瘤、乳腺癌、胃肠道癌、皮肤癌化疗增敏机制做一梳理,为今后肿瘤的治疗方式提供参考。

槲皮素抗大鼠速发型过敏反应

目的研究槲皮素对免疫球蛋白E(Ig E)介导的速发型过敏反应大鼠Ig E和白三烯(LT)水平、嗜酸性粒细胞(EOS)数量及肺组织炎症面积的影响。方法大鼠随机分为模型组,孟鲁司特钠组,槲皮素高(40 mg/kg)、低(10 mg/kg)剂量组。除空白组(未处理大鼠)给予生理盐水外,其他各组大鼠腹腔注射含氢氧化铝和卵白蛋白(OVA)的生理盐水,14 d后,尾静脉注射卵白蛋白(15 mg/kg)以诱发速发型过敏反应(3 d,1次/d)。大鼠血清中LT和Ig E水平采用ELISA法确定,肺泡灌洗液(BALF)和全血中EOS的数量通过细胞计数法统计,肺组织炎症面积采用病理学检查进行评价。结果槲皮素高、低剂量组大鼠血清中LT和Ig E含有量、BALF和全血中EOS的数量及肺组织炎症面积均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论槲皮素可能通过抑制炎性介质释放、降低炎性反应而发挥抗速发型过敏反应的作用。

荨麻属植物对骨形成影响的研究

目的观察4种荨麻属植物的8种不同提取物对骨形成的影响。方法以成骨样细胞MC3T3-E1为靶细胞,以表皮生长因子为阳性对照,4种荨麻属植物的8种不同提取物分为50,100,200μg/ml 3个浓度组,采用CCK-8(cell count-ing kit-8)活细胞计数法测定4种荨麻属植物的8种不同提取物对成骨样细胞MC3T3-E1的增殖作用,同时测定碱性磷酸酶的活性。结果三角叶荨麻根的醇提物,宽叶荨麻全草的醇提物和醇提物水层过D101大孔树脂40%洗脱部分在50到200μg/ml的浓度下能显著促进成骨样细胞MC3T3-E1增殖。同时这3种提取物一定程度上也增强了碱性磷酸酶的活性,但无显著性差异。结论三角叶荨麻和宽叶荨麻提取物在体外对成骨样细胞MC3T3-E1的作用提示其在体内可能促进骨形成过程。

葫芦茶根中总多酚提取富集工艺研究

目的优选葫芦茶根中总多酚提取富集工艺。方法以总多酚含量为考察指标,采用单因素实验和正交实验结合的方法优选葫芦茶根中总多酚的提取工艺,并优选D101型大孔树脂富集葫芦茶根中总多酚的最优条件。结果优化条件结合工业生产实际,确定其最佳提取工艺条件为30℃,50%丙酮,8倍量溶剂提取3次,4.5h/次,此条件下总多酚收率大于6%。以D101型大孔树脂对总多酚进行富集,最佳工艺条件为2BV/h流速,收集6BV30%乙醇洗脱液,总多酚含量为77.2%,收率为32.3%。结论该法能有效提取富集葫芦茶根中总多酚。

金花茶种子对人单核细胞白血病细胞株U937细胞增殖的影响

目的观察金花茶种子乙醇提取物及乙醇提取物的乙酸乙酯部分、正丁醇部分、水溶部分3个极性部位对人单核细胞白血病细胞株U937细胞增殖的影响。方法用RPMI1640培养基体外培养人单核细胞白血病细胞株U937细胞,采用噻唑蓝比色法(MTT),检测金花茶种子乙醇提取物及不同极性部位对细胞增殖的抑制作用。结果金花茶种子乙醇提取物、正丁醇部分和水溶部分对U937细胞增殖均有抑制作用,其IC50分别为89.74、65.19、63.74μg/ml,且抑制作用与样品浓度呈量效关系。结论金花茶种子乙醇提取物的正丁醇部分和水溶部分为其抗癌活性的有效部位。

白芥子中脂肪酸成分的分析

[目的]确定白芥子中脂肪酸成分及含量。[方法]采用气相色谱-质谱联用法分析白芥子中脂肪酸的组成及含量。[结果]检测出7个化合物,6种脂肪酸和1种烷烃。[结论]确定了白芥子中脂肪酸的组成及相对百分含量。

山茶种子对乏营养状态下胰腺癌细胞耐受性消除作用的研究

目的探讨山茶种子对乏营养状态下胰腺癌细胞耐受性的消除作用。方法使用山茶种子的不同提取物,分别作用于有营养状态下的胰腺癌细胞和乏营养状态下的胰腺癌细胞。用cell counting kit-8(CCK-8)活细胞计数法检测样品对胰腺癌细胞存活率的影响。结果山茶种子醇提物醋酸乙酯层能优先在乏营养状态下有效消除胰腺癌细胞的耐受性,在50μg/ml的浓度下,胰腺癌细胞的存活率仅为1.4%。结论山茶种子醇提物醋酸乙酯层能优先在乏营养状态下杀死胰腺癌细胞,提示其在胰腺癌治疗上可能有一定的应用前景。

Visual Basic在半数致死量测定数据处理中的应用

[目的 ]开发半数致死量 (L D50 )测定数据处理应用程序。[方法 ]应用 Visual Basic6 .0编程技术编制 L D50 测定数据处理应用程序 ,与现有常规程序进行实例对比验证。 [结果 ]运用该程序进行数据处理快速、简便 ,其计算结果与常规程序运算基本一致。 [结论 ]利用 Visual

组胺H1受体拮抗剂高通量筛选模型的建立及应用

组胺H1受体拮抗剂被用于治疗某些过敏性疾病,如鼻炎、荨麻疹和过敏性皮炎。本文采用无标记细胞整合药理学技术建立了组胺H1受体拮抗剂高通量筛选模型。应用基于共振波导光栅的动态质量重置分析方法检测了已知的激动剂和拮抗剂作用于A431细胞上内源性H1受体后所产生的特征信号,获取特征信号谱,建立组胺H1受体拮抗剂筛选模型。进而应用此模型筛选了32个天然产物对组胺H1受体的拮抗活性。结果表明,无标记DMR分析适合于H1受体拮抗剂的高通量筛选;在筛选的32个化合物中,从亚贡中分离得到的内酯类化合物为活性较强的拮抗剂。上述结果表明,无标记DMR分析可能成为组胺H1受体拮抗剂发现的新方法。

广东省碳普惠制核证减排机制的应用及协同效应分析

碳普惠作为广东率先开展的公众低碳减排的创新机制,将为碳达峰、碳中和目标的达成发挥助力。为此,本文首先对碳普惠进行背景介绍,同时概述广东省碳普惠制核证减排机制发展现状,最后提出广东省碳普惠制核证减排机制的协同效应。

β-环糊精对阳离子染料的移染作用研究

研究了β-环糊精在阳离子染料染色中的移染作用,并从移染动力学方面探讨了β-环糊精对阳离子染料的移染速率常数,进而从染料分子与β-环糊精空腔尺寸匹配及包合作用出发,分析了β-环糊精对阳离子染料的移染机理。

基于虚拟筛选方法从天然产物中发现TNF-α抑制剂

肿瘤坏死因子α(TNF-α)是治疗类风湿性疾病、克罗恩肠炎、银屑病等自身免疫性疾病的重要靶点。TNF-α与TNF-1受体(TNFR1)相互作用参与了这些疾病的病理过程。本次实验基于TNF-α活性位点结构特征构建药效团,利用该药效团对天然产物数据库进行筛选,通过Lipinski’s规则和Veber规则判断化合物类药性,应用SwissADME评价化合物成药性。筛选结果显示化合物1(ZINC02479145)与化合物7(ZINC67902410)具有良好的成药性,同阳性对照药物苄吡呤作用方式类似,可与TNF-α形成稳定性较强的复合物。配体受体互作分析初步揭示了TNF-α抑制剂的构效关系,对设计特异性高、效力强的TNF-α抑制剂有一定的指导意义。

BACE-1靶向小分子抑制剂虚拟筛选

β-secretase分泌酶(BACE-1)是一种天冬氨酸蛋白酶,BACE-1是控制脑内淀粉样前体蛋白水解产生β-淀粉样蛋白的关键酶,其抑制剂将是控制阿尔茨海默病的一个有效途径。本研究首先根据Lipinski类药性评价规则对天然产物数据库、中药数据库以及FDA药品数据库中的化合物进行类药性筛选,然后采用分子对接的方法从类药性良好的化合物中筛选与BACE-1对接分数较高的化合物。通过ADME预测,筛选得到的7个化合物具有较好的成药性。研究分子对接下的互作模式以及通过自由结合能验证复合物体系的稳定性,最终得到4个潜在的BACE-1靶向小分子抑制剂。本研究为BACE-1抑制剂的开发提供了设计思路,筛选得到的化合物有望成为阿尔茨海默病的有效治疗药物。

减少使用聚乳酸(PLA)塑料购物袋碳减排量核算方法探析

我国近年来针对塑料污染治理的政策持续不断,但可降解塑料制品仍存在减量化的必要。为此,本文首先依据相关政策来探讨减少使用可降解塑料的必要性及意义,其次从聚乳酸(PLA)塑料购物袋的生产过程入手,计算其能源消耗及工艺过程带来的CO2排放量,最后提出相关的解决措施。

基于炮效关系研究白芥子镇咳药效物质基础

目的基于炮制方法与药效之间的关系研究白芥子镇咳的药效物质基础。方法采用HPLC比较炒制前后白芥子中化学成分的变化。以体积比为0.25的浓氨水做引咳实验,以实验动物的咳嗽潜伏期、2min内咳嗽次数为评价指标,比较炒制前后白芥子的镇咳作用。分离纯化炒制后含量明显增加的对羟基苯乙腈成分并考察其镇咳作用。结果白芥子炒制后,镇咳作用明显增强,其对羟基苯乙腈含量明显增高。对羟基苯乙腈具有明确镇咳作用,与空白对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),且中、高剂量对羟基苯乙腈的镇咳作用优于炒白芥子。结论炒制后白芥子镇咳作用增强,炒制法可以增加白芥子中对羟基苯乙腈的含量,对羟基苯乙腈镇咳作用明显,是白芥子镇咳的药效物质。

金花茶组植物抗IgE介导Ⅰ型过敏反应的活性筛选

目的以致敏大鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、白三烯(LT)、全血和肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒细胞(EOS)及肺组织炎症面积为活性指标,筛选金花茶组植物抗IgE介导Ⅰ型过敏反应的活性物质。方法用卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]的混合液致敏和诱发小鼠,制成Ⅰ型过敏反应动物模型。将实验动物随机分组,即正常组、模型组、孟鲁司特钠(menglusitena)组,及各样品的低、高剂量组。采用ELISA法测定致敏大鼠血清IgE和LT含量。采用细胞计数法,检测大鼠全血和BALF中EOS数量。通过病理学检查,观察肺组织炎症反应程度。结果发现金花茶叶的水提物(1)和醇提物(2),金花茶果皮的醇提物(3)和乙酸乙酯萃取物(4)、凹脉金花茶叶的醇提物(5)和水提物(6)及凹脉金花茶种子的醇提物(7)中1、4、7号明显降低大鼠血清IgE和LT的含量,作用强度为7>4>1;1、4、7号明显减少全血和BALF中的EOS数量,作用强度为4>7=1;1、4、7号减小肺组织炎症面积,其作用强弱程度基本相同。结论1、4、7号金花茶组植物提取物具有抗IgE介导的Ⅰ型过敏反应作用。