大鼠肝部分切除术的应用解剖及实施

目的:对Wistar大鼠肝脏及脉管进行系统的解剖学观测,并建立肝部分切除术的实验模型.方法:对40只大鼠原位观测、肝叶切除和离体观测,明确大鼠肝脏位置、分叶、脉管系统以及比邻的特征;54只大鼠按照切除体积的不同,随机分为9组,应用无血切肝技术,实施大鼠原位肝部分切除术,观察术后肝叶和大鼠生存情况.结果:各肝叶形态、比例较为恒定,均有相对独立的Glisson系统和肝静脉回流系统,易于结扎肝蒂行肝叶切除.按照不同的肝叶组合,成功实施了切除比例为10%-90%肝部分切除术.结论:以肝叶4分法为基础的肝脏应用解剖和无血切肝技术的应用是实施大鼠不同切除比例的肝部分切除术的关键.

脑死亡对大鼠肝移植后早期移植肝损伤的影响

目的探讨脑死亡状态对大鼠供肝肝移植后早期肝脏损伤的影响。方法Wistar大鼠80只随机分为活体大鼠供肝肝移植组(L组)和脑死亡大鼠供肝肝移植组(B组)。L组仅建立活体大鼠供肝的二袖套法原位肝移植模型,B组供体大鼠建立脑死亡模型后切取供肝行二袖套法原位肝移植。监测脑死亡模型建立过程中大鼠血压和心率变化,观察肝移植术后受体6h、24h存活率,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、透明质酸(HA)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,电镜观察肝脏形态变化,TUNEL法测定肝组织细胞凋亡情况。结果B组供体大鼠脑死亡模型建立后血压和心率与L组比较,差异有统计学意义(P=0.001)。L组和B组6h和24h生存率差异无统计学意义(P>0.05)。与L组比较,B组ALT、AST、TNF-α和HA水平均升高(P<0.05),肝细胞形态学损伤重、凋亡率高(P<0.05)、Kupffer细胞显著活化。结论供体脑死亡可以加重脑死亡供肝移植后早期肝脏损伤,其机制可能和脑死亡供体血压、心率的改变以及Kupffer细胞的活化有关。

甘氨酸对移植肝损伤的防护作用

甘氨酸可以抑制免疫反应,本文着重介绍甘氨酸、Kupffer细胞与移植肝损伤的关系和作 用机制,对甘氨酸在肝移植中的应用予以综述。

乙酰半胱氨酸对脑死亡状态下巴马小型猪支气管肺泡灌洗液蛋白含量及肺超微结构的影响

目的观察脑死亡状态下巴马小型猪支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量的变化及肺组织超微结构改变以及乙酰半胱氨酸(NAC)干预处理对它们的影响。方法15只巴马小型猪随机分为脑死亡组(B组)、NAC处理组(N组)及对照组(C组),每组5只。C组持续麻醉维持24h,不建立脑死亡模型;B组应用缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型,呼吸、循环支持维持实验动物脑死亡状态24h;N组于建立脑死亡模型后静脉给予NAC24h。脑死亡后24h取肺脏组织,测定各组动物24h后BALF蛋白含量,观察肺组织常规及超微结构。结果C、B、N组BALF蛋白含量分别为(1.14±0.21)g/L,(6.34±1.22)g/L,(2.45±0.36)g/L,B组、N组BALF蛋白含量均高于C组,但N组BALF蛋白含量低于B组(P均<0.05)。B组动物肺组织光镜下见肺间质弥漫性水肿,肺泡间隔增宽,肺泡腔有渗出液,局灶性肺不张,肺泡萎陷,肺毛细血管充血,肺微血管中有嗜中性粒细胞聚集附壁,肺组织中有淋巴细胞浸润。电镜下可见肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体肿胀,线粒体嵴存在排列紊乱、消失,微绒毛缺失,板层小体数量减少、脱颗粒,结构有破坏,毛细血管内皮细胞表面有吞饮小泡。N组光镜及电镜下有轻微病理改变,C组未见明显的损伤性变化。结论脑死亡状态可导致BALF蛋白含量增加,肺组织出现损伤性改变,NAC干预处理可降低BALF蛋白含量,减轻肺组织损伤。

脑死亡状态下巴马小型猪肝脏功能和形态的变化

目的:观察脑死亡状态下肝脏功能和形态的变化。方法:巴马小型猪10只,随机等分为脑死亡组和对照组。脑死亡组应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型,通过呼吸、循环支持维持脑死亡状态24h;对照组维持麻醉24h,不建立脑死亡模型。分别测定脑死亡后3h、6h、12h、18h和24h各组动物血清中ALT、AST水平,并与对照组相应时点比较。观察各时点肝脏组织学变化及超微结构变化。结果:脑死亡组12h、18h、24h血清ALT、AST水平均高于对照组相应时点和脑死亡组前一时点(P均<0.05)。脑死亡组12h可见肝细胞轻度浊肿,胞浆疏松化,12h电镜发现肝细胞内出现轻微线粒体肿胀,24h可见线粒体肿胀,嵴消失,甚至线粒体部分膜溶解、内质网扩张呈池状等改变。对照组光镜及电镜下未见明显的损伤性变化。结论:脑死亡状态导致肝脏出现功能和形态的损伤性变化,随着脑死亡维持时间的延长而加重。

巴马小型猪脑死亡状态下血清炎症介质的改变及在肝脏损伤中的作用

目的:探讨巴马小型猪在脑死亡状态下血清炎症介质的变化及对肝脏损伤的作用。方法:巴马小型猪10只,随机分脑死亡组与对照组,每组5只。用颅内加压法建立脑死亡模型,对照组仅开颅麻醉维持,分别于3、6、12、18和24h取血清测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及IL-1β、IL-6和TNF-α水平。结果:(1)炎症介质变化:脑死亡组动物血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平均自脑死亡后3h开始升高,并随时间的延长而继续升高;脑死亡后3、6、12、18和24h脑死亡组明显高于对照组(P<0.05)。(2)肝脏酶学变化:血清ALT、AST水平自脑死亡后12h开始升高,并随时间的延长而继续升高;脑死亡后12、18和24h脑死亡组明显高于对照组(P<0.05)。结论:巴马小型猪脑死亡状态下血清炎症介质升高,并随时间的延长而继续升高。脑死亡状态下肝脏功能的损伤可能与这些炎症介质的水平升高有关。

脑死亡状态巴马小型猪肺水含量及肺超微结构变化

目的：观察脑死亡状态下巴马小型猪肺水含量及肺组织常规及超微结构改变。方法：实验于2003-08/2004-12在河南省实验动物中心及河南省病理学重点实验室完成。选用健康巴马小型猪11只,采用随机数字表法随机分为2组,对照组5只,脑死亡组6只。对照组持续麻醉维持24h,不建立脑死亡模型,24h后撤除麻醉,动物苏醒后处死;脑死亡组6只,应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型,判定脑死亡后通过呼吸、循环支持维持动物脑死亡状态24h,24h后撤除呼吸、循环支持,动物心肺死亡。维持脑死亡状态下巴马小型猪的生命体征达到脑死亡供体要求,即平均动脉压≥60mmHg（1mmHg=0.133kPa）,血氧饱和度≥95%,血氧分压≥100mmHg,体温≥35℃,中心静脉压≤10-12mmHg,血流动力学稳定。观察脑死亡组动物脑死亡24h后肺组织肺水含量、肺脏常规组织形态（光镜,苏木精-伊红染色）及超微结构变化（电镜）,并与对照组比较。结果：脑死亡组1只动物在脑死亡造模过程中因心肺死亡脱失。①两组动物肺水含量比较：脑死亡组肺水含量显著高于对照组[（0.83±0.00,0.76±0.02）g/g（P〈0.05）]。②两组动物肺脏常规组织形态及超微结构变化：脑死亡组动物肺组织光镜下见肺间质弥漫性水肿,肺泡间隔增宽,肺泡腔有渗出液,局灶性肺不张,肺毛细血管充血;电镜下可见肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体肿胀,线粒体嵴存在排列紊乱、消失,微绒毛缺失,板层小体数量减少、脱颗粒,结构有破坏。对照组光镜及电镜下未见明显的损伤性变化。结论：脑死亡状态可导致肺水含量增加,肺组织出现损伤性改变,可能对移植后肺组织功能造成一定影响。

结肠癌组织中乙酰肝素酶2蛋白的表达

目的:探讨乙酰肝素酶2(Hpa2)蛋白的表达与结肠癌浸润、转移的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测96例结肠癌组织中Hpa2蛋白的表达和微血管密度(MVD)。以其中85例癌旁组织和3例正常结肠组织作对照。结果:正常结肠组织中Hpa2蛋白不表达,癌组织中Hpa2蛋白阳性率为82.23%(79/96),高于癌旁组织中的12.94%(11/85)(P<0.05)。癌组织MVD(15.89±4.65)和癌旁组织的MVD(14.09±4.39)差异亦有统计学意义(P<0.05)。结肠癌组织中Hpa2蛋白的表达和MVD与患者的年龄、性别、肿瘤直径、发生部位无关(P>0.05),但与肿瘤的Duke′s分期、淋巴结转移、肝转移有关(P<0.05)。Hpa2蛋白阳性的癌组织MVD为(16.37±4.76),高于Hpa2蛋白表达阴性的癌组织(13.65±3.40)(P<0.05)。结论:Hpa2蛋白可以作为判断结肠癌浸润、转移的指标。

乙酰肝素酶2蛋白的表达与胰腺癌浸润、转移的关系及其意义

为探讨乙酰肝素酶2(Hpa2)蛋白与胰腺癌浸润、转移的关系及其临床病理意义,笔者应用免疫组织化学染色法检测2 6例胰腺癌组织中Hpa2蛋白的表达和微血管密度(MVD)。结果示Hpa2蛋白在正常胰腺组织中不表达,而在胰腺癌组织中的阳性率为6 9.2 3%(1 8/2 6),在癌旁组织中阳性率为3 3.3 3%(7/2 1),两者差异有显著性(P<0.0 5)。癌组织MVD为1 9.4 7±5.1 4,癌旁组织MVD为1 4.1 7±5.8 4,差异亦有显著性(P<0.0 5)。胰腺癌组织中Hpa2蛋白的表达和MVD分别与患者的年龄、性别、肿瘤直径无关(P>0.0 5),但与肿瘤的临床分期、包膜是否完整、是否有淋巴结转移有关(P<0.0 5)。Hpa2表达阳性组的MVD[(2 0.8 4±4.9 9)/HP]高于Hpa2表达阴性组MVD[(1 6.3 9±4.2 6)/HP](P<0.0 5)。提示Hpa2蛋白可能参与胰腺癌的发生和发展过程,对判断胰腺癌的浸润、转移有一定的参考价值。

程序性细胞死亡在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用研究进展

肝移植是治疗终末期肝病的有效手段,但在肝移植过程中不可避免会发生肝脏缺血-再灌注损伤(HIRI),可能导致早期移植物功能障碍或加剧排斥反应,其损伤防护机制有待深入研究。程序性细胞死亡是HIRI的重要发生机制,多种新型程序性细胞死亡形式参与了HIRI的病理过程,深入研究程序性细胞死亡有望进一步提高肝移植的治疗效果。本文就细胞凋亡、自噬及自噬依赖性死亡、铁死亡、坏死性凋亡、细胞焦亡、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)-1依赖性细胞死亡等常见的程序性细胞死亡方式在HIRI中的研究进展予以综述,以期为提高肝移植手术成功率、改善受者预后提供参考。

CENPF基因在肝细胞癌中的表达情况及其基因集富集分析

目的探讨着丝粒蛋白F(CENPF)基因在肝细胞癌中的表达情况及其与患者临床特征、预后的关系,通过基因集富集分析(GSEA)寻找CENPF基因在肝细胞癌中的相关调控通路。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中获取369例肝细胞癌组织样本和50例癌旁组织样本CENPF基因表达数据,以及其中240例病例的临床资料和术后随访资料。CENPF基因表达水平与肝细胞癌患者临床特征的相关性采用χ^(2)检验,CENPF基因表达水平对患者预后的影响采用Cox回归分析,通过GSEA寻找高表达CENPF基因的肝细胞癌样本所富集的基因集。结果肝细胞癌组织中CENPF基因表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。肝细胞癌组织中CENPF基因表达水平与病理学分级、血清甲胎蛋白(AFP)水平有关(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,TNM分期、血管侵犯和CENPF基因表达水平是肝细胞癌患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。GSEA显示,CENPF基因高表达的肝细胞癌样本富集了与DNA复制、剪接体、细胞周期、同源重组、泛素介导的蛋白水解、错配修复等相关的基因集。结论肝细胞癌组织中CENPF基因呈高表达,其表达水平与病理学分级、血清甲胎蛋白(AFP)水平有关,是患者预后不良的危险因素。CENPF基因可能是肝细胞癌患者诊断和治疗的潜在靶点。

HO-1的过表达对大鼠移植后肝脏损伤的影响

目的探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在大鼠同种异体移植肝脏的过表达对移植后早期血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肝脏结构功能的影响。方法90只Wistar大鼠随机分为生理盐水预处理组(S1组)、钴原卟啉预处理组(S2组)和锌原卟啉预处理组(S3组),每组30只。各组随机取出24只分为供受体,供体于预处理后24h行原位肝移植,余6只仅行预处理,分别于供体预处理后24h、门静脉复流后1h和3h各取6只取血及肝组织,分别检测血清ALT、AST、TNF-α水平、肝组织形态学变化及HO-1蛋白表达水平。结果①供肝预处理后24h,各组血清转氨酶及TNF-α水平无显著性差异(P>0.05),门静脉复流后各时间点,S2组血清转氨酶及TNF-α水平均低于S1组和S3组(P<0.05),S1组低于S3组(P<0.05);②供肝预处理后24h,S2组肝脏HO-1蛋白即有较高表达,S1组和S3组只有极少量表达;门静脉复流后各时间点,S2组均高于S1组和S3组(P<0.05),S1组高于S3组(P<0.05);③移植肝门静脉复流后3h,S2组肝脏损伤轻于S1组和S3组,S1组轻于S3组。结论HO-1在大鼠同种异体移植肝脏中的过表达可减少血清TNF-α释放,显著改善移植后的肝脏功能,减轻供肝的缺血再灌注损伤。

N-乙酰半胱氨酸对脑死亡状态巴马小型猪肾脏结构、功能与核转录因子κB表达的影响

目的:观察核转录因子κB活性抑制剂N-乙酰半胱氨酸对脑死亡状态下巴马小型猪肾脏结构、功能与核转录因子κBmRNA及其蛋白表达的影响,以期提高脑死亡供肾的肾移植效果。方法:实验于2003-08/2004-12在河南省实验动物中心及河南省病理学重点实验室完成。①实验分组及方法:将15只巴马小型猪按随机数字表法分为3组(n=5),即脑死亡组、N-乙酰半胱氨酸组及对照组。脑死亡组和N-乙酰半胱氨酸组均应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型,脑死亡组不行药物干预;N-乙酰半胱氨酸组分别于初次确认脑死亡后1h,12h给予N-乙酰半胱氨酸。对照组动物麻醉后仅行开颅与开关腹手术。②实验评估:分别于首次判定脑死亡后3,6,12,18和24h检测动物血清中尿素氮、肌酐、白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平。于脑死亡后3,6,12及24h开腹取相同部位肾组织,苏木精-伊红染色后观察肾组织结构变化,应用免疫组化染色观察核转录因子κB蛋白的表达水平,应用反转录-聚合酶链反应法检测核转录因子κBmRNA的动态变化。结果:15只猪均进入结果分析。①自首次判定脑死亡后12h开始,脑死亡组和N-乙酰半胱氨酸组尿素氮和肌酐水平逐渐升高(P<0.05),相同时间点比较N-乙酰半胱氨酸组显著低于脑死亡组(P<0.05)。②自首次判定脑死亡3h开始,脑死亡组及N-乙酰半胱氨酸组白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α逐渐升高(P<0.05),相同时间点比较N-乙酰半胱氨酸组显著低于脑死亡组(P<0.05)。③自脑死亡后3h开始,脑死亡组及N-乙酰半胱氨酸组肾组织NF-κBmRNA及其蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05),相同时间点比较N-乙酰半胱氨酸组显著低于脑死亡组(P<0.05)。④N-乙酰半胱氨酸组和脑死亡组动物脑死亡后12h可见肾脏结构变化,N-乙酰半胱氨酸组变化程度明显轻于脑死亡组。结论:N-乙酰半胱氨酸可能通过抑制核转录因子κBmRNA及其蛋白的表达,减少炎症介质的释放,从而保护脑死亡状态下肾脏的功能及结构,提高脑死亡供肾肾移植效果。

两袖套法大鼠同种异体减体积肝移植模型的建立

目的探讨建立稳定大鼠减体积原位肝移植模型的方法。方法利用两袖套法连接肝下下腔静脉及门静脉,单线连续吻合肝上下腔静脉。共完成120例大鼠减体积原位肝移植模型。结果顺利完成模型建立,移植术后大鼠均能自由活动,进食活跃。其2d和7d存活率分别为85.8%和83.3%。结论利用改进的两袖套法,可以建立稳定的大鼠同种异体减体积原位肝脏移植模型。

猪脑死亡模型建立及建立过程中血压、心率变化

目的采用改进的缓慢间断颅内加压法建立猪脑死亡模型,观察建立过程中血压、心率变化。方法长白猪12头,随机分为对照组(C组)和脑死亡组(B组),每组6头。C组维持麻醉24h,仅行开颅术并颅内放置Foley气囊导管,不建立脑死亡模型;B组应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型,通过呼吸、循环支持维持猪脑死亡状态24h。监测2组动物在实验过程中平均动脉压(mean artery pressure,MAP)、心率(heart rate,HR)变化。结果B组6头猪均成功建立脑死亡模型。经Foley气囊导管缓慢间断颅内加压后,B组动物血压、心率缓慢下降后骤然升高,呼吸频率减慢、呼吸幅度加深,平均峰值动脉压和平均峰值心率与颅内加压前MAP、HR比较,差异有统计学意义;脑死亡后6、12和24h,B组猪MAP和HR与C组比较,差异有统计学意义。结论应用改进的缓慢间断颅内加压法可成功制作猪脑死亡模型,经有效的呼吸和循环支持,能稳定地维持猪脑死亡状态24h,为进一步研究脑死亡状态下猪肝脏形态和功能变化提供了坚实基础。

多学科护理团队协作对头颈部肿瘤复发患者生命质量的影响

探讨多学科护理团队协作(MDT)的运行模式在头颈部肿瘤复发患者中的应用和效果。方法 选择60例头颈部肿瘤复发患者作为研究对象,经MDT护理干预作为观察组(N=30),常规性护理干预的30 例患者作为对照组(N=30),比较和评价2组患者的生命质量指标,包括伤口愈合时间、住院天数、头颈癌生存质量、Constant-Murley肩功能。 结果 观察组的伤口愈合时间和住院天数较对照组显著降低(P<0.05),生存质量及Constant-Murley肩功能评分较对照组显著升高(P<0.05)。结论 采用MDT护理模式,可改善头颈部肿瘤复发病人的生存质量。