氯化镉暴露对斑马鱼幼鱼神经行为毒性作用

为探索低剂量镉持续暴露对斑马鱼胚胎和幼鱼神经发育的影响,将受精后36h(36hpf)的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度氯化镉受试液中持续至受精后6d(6dpf)。在一般毒性观察的基础上,采用高通量视频跟踪技术检测了48孔板中幼鱼的自发运动能力和对外界刺激产生的惊恐反应及恢复能力。结果显示:在不引起外观形态明显改变的暴露剂量下幼鱼自发运动表现异常。其中,0.1～0.5μmol·L-1暴露组幼鱼自发运动增多、轨迹紊乱、刻板式转向运动增加、触壁活动减少;1.0μmol·L-1暴露组幼鱼出现运动抑制、静止和原地震颤等状态,幼鱼的自发运动距离与氯化镉浓度关系呈现剂量依赖性倒"U"型,这种行为毒性效应与乙醇急性暴露引起的运动效应相似。光照惊恐反射实验中,暴露组幼鱼对突发的光暗变化表现敏感或迟钝。在撤除光源后暗适应减慢或加快。以上结果说明,斑马鱼胚胎和幼鱼对氯化镉的神经发育毒性作用敏感,并且高通量的幼鱼神经行为学方法在外源性化学物的毒性评价中能够提高检测效率,具有良好的应用前景。

微小按蚊复合体rDNA-ITS2序列差异及遗传多态性研究

本研究对我国微小按蚊广西、云南、海南 6个地理株和越南Caonguen株rDNA ITS2PCR扩增片段和序列差异作分析 ,获得基因片段总长为 5 6 1bp～ 5 6 3bp ,发现地理株间ITS2序列差异程度不同 ,分析表明元江株为微小按蚊C型 ;其余 6个地理株为A型。应用限制性内切酶Sau96Ⅰ对微小按蚊复合体rDNA ITS2PCR扩增片段作酶切分型 ,结果同样显示两型差异 。

S-烯虫酯微胶囊悬浮剂防治淡色库蚊和白纹伊蚊幼虫现场效果研究

目的观察S-烯虫酯微胶囊悬浮剂对淡色库蚊和白纹伊蚊幼虫现场防治效果。方法于野外现场直接投放或在野外设置的人工现场施药,观察幼虫和蛹的总密度下降率、蛹死亡率、羽化抑制率等指标。结果以0.03或0.1g ai/m3施药,对淡色库蚊幼虫的密度抑制从36 h起效,4.5 d达到顶峰,药效持续7~10d,幼虫和蛹总密度下降率分别达到81.5%和100%。以0.1和0.5g ai/m3施药,白纹伊蚊幼虫的最终成蚊率分别降至24.49%和3.92%,蛹死亡率和羽化抑制率分别为74.42%、95.35%和72.23%、95.27%,其中0.5 g ai/m3组药效能持续10 d。结论 S-烯虫酯微胶囊悬浮剂能明显抑制淡色库蚊和白纹伊蚊幼虫发育为成蚊,持效期较长。

呋虫胺与顺式氯氰菊酯混配对抗性家蝇的控制效果观察

目的检测呋虫胺和顺式氯氰菊酯混配对家蝇的联合作用,研究该混配剂用于表面喷洒和空间喷雾时的有效成分浓度和药效,为科学用药、提高家蝇控制效果提供参考。方法采用接触法比较该混配制剂与各组成成分对敏感品系家蝇的药效;依据共毒系数(CTC)筛选混配剂中有效成分的浓度比值;依据国家标准GB/T 13917.1-2009有关内容,检测混配剂对家蝇的表面触杀和空间喷雾杀灭效果。结果与各组成成分相比,混配剂对家蝇击倒速度加快。呋虫胺和顺式氯氰菊酯的适宜浓度比为3∶1(共毒系数为197.18)。混配剂对抗性家蝇进行表面触杀时适宜的有效成分浓度为氯氰菊酯0.33 g/L、呋虫胺1.0 g/L,在全吸收面和不吸收面上24 h致死率分别为96.67%和100%;混配剂空间喷雾时有效成分浓度提高3倍,对抗性家蝇24 h致死率为100%,KT50均在10 min以内。结论呋虫胺与氯氰菊酯混配对抗性家蝇有良好的击倒和致死作用,能够一定程度缓解家蝇的抗性、提高控制效果。

德国小蠊对6种杀虫剂的抗性测定

目的测定德国小蠊对6种杀虫剂的抗药性,为选择用药提供依据。方法药膜接触法。结果现场德国小蠊对高效氯氰菊酯、残杀威、高效氯氟氰菊酯、EBT的抗性系数分别为3.31、3.26、4.27和5.82,DDVP和溴氰菊酯处理组3 d内未有中毒反应。结论德国小蠊防治前的抗性测定有助于合理选择杀虫剂,提高防治效果。

氯丙嗪在斑马鱼胚胎和早期幼鱼发育过程中的神经毒性作用

目的采用模式动物斑马鱼作为研究对象,观察氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)暴露对胚胎和幼鱼早期神经发育的影响。方法在一般毒性评价的基础上,通过整体胚胎细胞凋亡检测和脑组织病理学检查,了解CPZ对神经发育的器质性改变;采用神经行为学方法,包括幼鱼触动逃避反应、自发运动以及惊恐逃避反射等,研究氯丙嗪暴露所致的神经发育功能性障碍。结果斑马鱼胚胎受精后6 h(6 hpf)～72 hpf暴露于CPZ(≥5 mg/L)可引起胚胎和幼鱼死亡、致畸和幼鱼孵化延迟,并呈浓度和时间依赖性;采用吖啶橙染色检测36 hpf整体胚胎凋亡细胞,发现凋亡细胞主要集中在胚胎中脑、后脑、丘脑以及中后脑连接区、脊索和尾部等处;脑组织病理学检测发现,7dpf幼鱼颅腔增大、脑体积减小、脑细胞缩小且细胞间隙增宽。6～72 hpf CPZ(≥0.0625 mg/L)暴露后,幼鱼神经行为学研究发现,CPZ(≥0.125 mg/L)可引起3dpf幼鱼触觉运动能力下降;CPZ(≥0.5 mg/L)可浓度依赖性地抑制幼鱼自发运动,并出现僵直不动、震颤或快速刻板式转圈运动等行为改变;光惊恐实验中,暗环境下各暴露组幼鱼对突发强光刺激均表现为惊跳逃避,并且暗-光交替期运动加速度变化与对照组无显著差异;在撤除光源后,1mg/L和2 mg/L暴露组幼鱼暗适应时程缩短,而0.125 mg/L和0.25 mg/L暴露组暗适应时程延长,提示CPZ对外界刺激引发的幼鱼活跃游动有抑制和促进双重毒性作用。结论 CPZ暴露对斑马鱼胚胎和幼鱼具有明显的神经发育毒性作用。模式动物斑马鱼作为一种高通量筛选模型在外源性化合物神经发育毒性评价中具有较好的应用前景。

喷射剂室内药效测定雾化喷头的性能观察

目的选择性能稳定的雾化喷头用于喷射剂室内药效测定,探索提高试验质量的方法。方法观察比较WNA-1型专用雾化喷头和国标GB13917.1-92规定的JM-2型雾化喷头性能,包括流量、流程和粒度分布以及对杀虫喷射剂室内药效测定结果的影响。结果WNA-1型与JM-2型相比流量小、流程短但范围大,并且粒度分布均匀、雾化效率高,杀虫剂室内药效测定重复试验结果间变异度小。结论WNA-1型喷头性能较好,有利于提高喷射剂室内药效测定试验的稳定性。

多柔比星斑马鱼胚胎心脏发育毒性表现

目的通过观察多柔比星的斑马鱼胚胎心脏毒性表现,为其作为心脏毒性评价模型提供可靠的检测指标。方法选择发育正常的6hpf(hours post fertilization)斑马鱼胚胎暴露于多柔比星2.16～34.48μmol·L-148h。显微镜观察72hpf斑马鱼心血管系统的形态学改变。通过DVC摄像系统测定心率;测量静脉窦-动脉球(SV-BA)间距,HE染色观察斑马鱼心肌结构。结果多柔比星2.16μmol·L-1组斑马鱼心血管系统形态无改变,但心率下降,为(166±5)min-1;SV-BA间距增加,为(237±13)μm。多柔比星4.31μmol·L-1可引起斑马鱼出现心包水肿,心脏畸形,心率减低,为(166±5)min-1;SV-BA间距增加,为(268±13)μm。随着多柔比星浓度增加,斑马鱼出现体长缩短、体节发育异常、脊柱弯曲、卵黄囊水肿、出血、心脏缩小等多种表型改变。心脏组织切片显示,多柔比星8.62μmol·L-1可引起斑马鱼心包腔变大、心脏缩小、心肌层变薄和心肌细胞减少。结论多柔比星对斑马鱼胚胎心脏毒性作用的表现与对哺乳动物的毒性作用表现相同,有望成为评价药物心脏发育毒性的模型。

熏香类卫生杀虫制品的安全性探讨

本文概述了蝇香的和蟑香的作用特点及药效评价存在的问题,并对熏香类卫生杀虫制品的安全性问题提出了有关对策和建议。

牡丹江镜泊湖区蜱中伯氏疏螺旋体与嗜吞噬细胞无形体感染的研究

目的了解牡丹江镜泊湖区伯氏疏螺旋体和嗜吞噬细胞无形体的感染情况。方法运用聚合酶链方法(PCR)对牡丹江镜泊湖区采集的蜱标本,进行伯氏疏螺旋体5S^23S基因间隔区基因片段与嗜吞噬细胞无形体柠檬酸盐合成酶基因(glt A)片段的检测。结果 2013年5月,在牡丹江镜泊湖北湖区附近共采集嗜群血蜱和全沟硬蜱643只,其中嗜群血蜱573只,占89.11%;全沟硬蜱70只,占10.89%。嗜群血蜱和全沟硬蜱伯氏疏螺旋体感染率分别为0.17%和15.71%,嗜吞噬细胞无形体感染率分别为0和2.86%;全沟硬蜱中伯氏疏螺旋体和嗜吞噬细胞无形体的复合感染率为1.43%。结论牡丹江镜泊湖区采集的蜱中检测到伯氏疏螺旋体和嗜吞噬细胞无形体的感染,并在全沟硬蜱中检测到复合感染情况,但复合感染的感染率较低。

3种选育家蝇抗药性方法的比较

目的通过对家蝇进行抗药性选育,筛选能够快速提高抗药性水平的培育方法,为抗药性机制研究和抗药性治理提供技术支持。方法以敌敌畏为受试物,采用药膜法、点滴法和幼虫汰选法对实验室敏感品系家蝇进行抗药性选育,隔代测定半数致死剂量,计算抗性系数。结果采用药膜法培育家蝇抗药性6代后,抗性系数仅增长0.29倍;在此基础上改用点滴法继续选育5代,抗性系数为8.91;或改用幼虫汰选法选育5代,抗性系数为19.35,均明显高于单用药膜法继续选育5代的家蝇抗性系数(2.12)。结论幼虫汰选法能够快速高效提高家蝇抗药性水平,适宜作为抗药性家蝇的选育方法。

1-苯基-2-硫脲对斑马鱼胚胎发育与黑色素生成的影响

目的 1-苯基-2-硫脲(PTU)可抑制斑马鱼胚胎黑色素的产生,保持斑马鱼透明,便于形态观察和信号检测。本文研究了PTU对斑马鱼胚胎发育的影响和抑制斑马鱼胚胎黑色素生成,保持斑马鱼透明性的最佳浓度。方法用不同浓度PTU处理23 hpf(受精后,hours post fertilization,hpf)斑马鱼胚胎,作用57 h后观察80 hpf斑马鱼的形态学、生理学改变,计算死亡率和孵化率,测量心率和静脉窦-动脉球之间的距离。结果浓度为0.197mmol/L、0.296 mmol/L PTU可以有效抑制黑色素生成,保持斑马鱼整体透明,对斑马鱼心血管系统结构和生理功能无影响,且不影响斑马鱼正常孵化过程。随着PTU浓度的增加,斑马鱼死亡率增加,孵化率下降,出现心包水肿,心脏畸形等改变,心率下降,静脉窦-动脉球之间的距离增大。结论浓度不高于0.296 mmol/L的PTU溶液能有效抑制斑马鱼黑色素生成,对斑马鱼心血管毒性研究无影响。

顺式氯氰菊酯和甲嘧·高氯氟混配防治家蝇的效果研究

目的将100 g/L顺式氯氰菊酯悬浮剂和8.5%甲嘧·高氯氟卫生杀虫泡腾片按不同比例混配后研究对家蝇的防治效果,为提高单剂对家蝇杀灭效果提供实验依据。方法采用药纸接触法测定比较顺式氯氰菊酯与甲嘧·高氯氟及其不同比例混配剂对家蝇的毒力;采用共毒系数法确定混配剂的联合作用;采用药纸接触法测定家蝇抗性倍数;按照农药登记卫生杀虫剂室内药效试验方法,测定比较混配剂不同比例对家蝇的表面触杀和空间喷雾杀灭效果。结果混配剂对家蝇的击倒效果较单剂有明显提高。混配剂中顺式氯氰菊酯和甲嘧·高氯氟浓度比为1∶10和1∶15时,共毒系数分别为317.92和297.70。混配剂对抗性家蝇进行表面触杀时宜使用的有效成分浓度为顺式氯氰菊酯0.33 g/L、甲嘧·高氯氟5.0 g/L,空间喷雾时宜使用的有效成分浓度为顺式氯氰菊酯1.0 g/L、甲嘧·高氯氟15.0 g/L。结论顺式氯氰菊酯和甲嘧·高氯氟不同比例混配剂对家蝇有明显增效作用。混配剂对抗性家蝇有良好的击倒和致死作用,能够提高防治效果。

北戴河部队休疗区蚊蝇抗药性检测及防治策略研究

目的掌握蚊蝇对常用卫生杀虫剂的抗药性并评估抗性风险,为制定北戴河部队休疗区科学防治策略、提高防治效率提供参考。方法分别使用成蚊接触法和家蝇药膜法测定诊断剂量下淡色库蚊或家蝇野外种群对杀虫剂的抗药性;依据抗性结果调整防治用药,变单纯使用拟除虫菊酯为换用、混用其他类型杀虫剂,增加昆虫生长调节剂烯虫酯处理孳生地等;使用媒介生物密度监测国家标准方法调查蚊蝇密度,比较防治措施调整前后密度下降率为指标,评价防治效果。应用家蝇不敏感乙酰胆碱酯酶法(Ach E)和等位基因特异性PCR(AS-PCR)法分别确定当地淡色库蚊和家蝇野外种群中不敏感胆碱酯酶个体所占比例和kdr基因突变发生频率。结果淡色库蚊和家蝇种群对拟除虫菊酯普遍产生抗药性,对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂敏感。调整防治措施后,蚊蝇防治效果得到明显提升。两个监督单位蝇类密度下降率分别为86.4%和84.9%,蚊类密度下降率也达到84.0%和80.9%,防治效果均达到部队卫生害虫综合防控技术规范要求。当地淡色库蚊和家蝇种群对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抗性水平较低,Ach E不敏感个体不足10%;但对拟除虫菊酯抗性水平较高,kdr突变发生率(R%)分别为84%和91%,杂合子RS%达到44.8%和43.9%。结论对卫生害虫抗药性调查和风险评估,有助于合理选择防治用药,达到有效治理目的,实现可持续控制。

旱蚂蟥防治药物的研制

目的针对旱蚂蟥的危害研制一种有效、安全、使用简便的驱避药物。方法参照有关国家标准和旱蚂蟥的习性进行药效试验方法、加工工艺和产品质量控制等研究。结果以植物源杀虫剂为有效成分,通过助剂选择制成0.5%微乳剂,10倍稀释液对蚂蟥具有驱避、触杀效果,强迫接触出现中毒症状时间为15.8 s,一次喷洒药物持效大于6 h。制剂对大白鼠急性经皮LD50大于10 000 mg/kg,对兔皮肤无刺激性,属微毒,质量稳定、使用简便。结论该剂是一种有效、安全、使用简便的旱蚂蟥驱杀药物。