葛根素对溃疡性结肠炎小鼠的改善作用

目的 探讨葛根素(Puerarin)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的改善作用及机制。方法 2.5%DSS溶液被灌以小鼠进而建造UC模型,将40只小鼠随机分组,分为正常组、模型组、葛根素低剂量(20 mg/kg·d)、中剂量(30 mg/kg·d)和高剂量(40 mg/kg·d),连续给药8 d,对小鼠的体重变化、疾病指数(DAI)的变化、结肠长度等进行评价,苏木精-伊红染色法处理评价结肠组织损伤程度、酶联免疫吸附测定试剂盒定量检测小鼠结肠组织中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、髓过氧化物酶(MPO)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的水平。结果 葛根素可减缓小鼠体重下降的趋势,降低小鼠疾病活动指数,延缓结肠长度缩短及降低结肠组织损伤的程度。初步作用机制研究表明,葛根素各剂量组能不同程度地降低结肠组织中促炎因子(IL-1β、TNF-ɑ和IL-6)水平,降低MPO、NO、iNOS水平。结论 葛根素对DSS诱导的UC小鼠具有改善作用,其作用机制可能与抗炎、抗氧化有关。

蜂胶的药理作用及其治疗溃疡性结肠炎的研究进展

蜂胶是蜜蜂采集的植物树脂与其上颚腺、蜡腺等分泌物及少量花粉混合形成的胶状物质,化学成分复杂,具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗病毒、抗菌等药理作用,对多种疾病的治疗具有疗效。溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种非特异性炎症性肠病,发生在结肠、直肠及其黏膜下层,临床以腹痛、腹泻为主要症状,里急后重、黏液便与便秘交替出现,该病特点为起病缓、反复发作,且有终身复发倾向^([1])。

N-acetylserotonin对肝缺血再灌注小鼠氧化应激损伤的保护作用

目的探讨NAS对肝缺血再灌注所诱导的脂质过氧化损伤产生的保护作用。方法采用夹闭肝蒂法30min、再灌注6h制作肝缺血再灌注模型,冰冻切片,HE染色,光学显微镜下观察肝细胞形态结构的变化;比色法检测损伤后血清中谷丙转氨酶(ALT)水平及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量。结果夹闭肝蒂30min、再灌注6h后,肝小叶结构紊乱、肝血窦淤血,其间有白细胞浸润、肝细胞出现变性、坏死;血清中ALT水平升高,肝组织中SOD和GSH-Px的含量降低,MDA升高;NAS可减少缺血再灌注后血清ALT的释放,使肝组织中SOD和GSH-Px的含量升高,MDA的含量降低;NAS+Luz可逆转NAS的这一作用。结论 NAS对肝缺血再灌注小鼠的氧化应激损伤具有保护作用。

芒果苷对H_2O_2诱导的BRL细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨芒果苷对过氧化氢诱导的正常大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用。方法选取正常大鼠肝细胞株BRL,通过过氧化氢诱导法制备细胞氧化损伤模型,实验设对照组、H_2O_2组、芒果苷组。HE染色、台盼蓝染色观察细胞形态变化和存活率变化;比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达变化。结果对照组BRL细胞贴壁生长良好,排列紧密。H_2O_2诱导后细胞形态不规则,胞膜皱缩,贴壁能力下降;细胞存活率降低;抗氧化酶SOD、GSH-Px活性降低,MDA含量升高(P<0.05);Bax和Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。与H_2O_2组相比,芒果苷可显著改善H_2O_2引起的细胞形态变化,提高细胞存活率;提高SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05);抑制Bax和Caspase-3蛋白表达(P<0.05),上调Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。结论芒果苷对BRL细胞氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与其提高细胞清除氧自由基能力和抑制细胞凋亡有关。

《系统解剖学》PPT课件制作体会

系统解剖学是医学相关专业的基础课程,其内容抽象,专有名词多,结构复杂,依托PPT课件进行教学可以促进学生对知识的理解记忆,课件制作也成为教师的基本功之一。在PPT课件制作过程中要注重教学设计的重要性,同时也要做到页面简洁,图片文字清晰,内容间距离合适,字体、字号和颜色合理,恰当地运用视频、音频等,以达到界面清新、主次分明、动静结合、符合学习者视觉心理,有利于学习者观看、体会和思考的效果。

N-acetylserotonin对H_2O_2诱导大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨N-acetylserotonin(NAS)对H2O2诱导正常大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用。方法:选择正常大鼠肝细胞株BRL,采用H2O2诱导法制备BRL细胞氧化应激损伤模型,HE染色和台盼蓝染色观察细胞形态及细胞存活率的变化;比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化。结果:对照组BRL细胞贴壁生长良好,排列紧密,胞膜完整,细胞界限清晰。H2O2诱导后细胞膜皱缩,形态不规则,细胞界限模糊,贴壁能力下降,出现大片细胞缺失;细胞存活率下降;SOD活性降低,而MDA含量升高。NAS可明显改善H2O2引起的细胞形态变化,使细胞存活率升高,增加SOD活性并降低MDA含量。结论:NAS可通过增强抗氧化系统的激活、减轻抗氧化系统受抑制的程度,发挥对H2O2诱导的BRL细胞氧化损伤的保护作用。

红景天苷药理作用及其机制研究进展

红景天(Rhodiola),又名罗森根,蔷薇根景天,属于景天科多年生草本植物,极具营养价值,在我国东北、四川和西藏等地区广泛生长,是一种具有食用价值和药用价值的多功能植物,在我国具有几千年的应用历史。大量研究发现,该药材具有抗氧化、抗炎、抗癌、调节代谢和神经保护等功效,可用于神经退行性疾病、心血管疾病、糖尿病、癌症等许多疾病的治疗。

Wnt11及其受体Fzd5在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓内的表达变化

目的检测Wnt11及其受体Fzd5在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,探讨Wnt11及其受体Fzd5在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠龄95 d、108d、122 d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定、分离脊髓、冰冻切片,应用免疫荧光技术,检测脊髓中Wnt11及其受体Fzd5的表达变化;部分鼠取出脊髓、匀浆,应用RT-PCR技术检测不同时间点Wnt11及其受体Fzd5 mRNA的表达变化。结果免疫荧光结果显示,与同窝野生型鼠比较,95 d、108 d和122 d龄ALS转基因鼠脊髓中Wnt11阳性细胞明显增多。免疫荧光双标结果显示,Wnt11标记的阳性细胞与GFAP和β-tubulinⅢ共表达,ALS转基因鼠Wnt11/GFAP双阳性细胞增多。与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Wnt11 mRNA水平在95 d、108 d和122 d均升高。Wnt11受体Fzd5表达情况与Wnt11一致。结论 Wnt11和Fzd5在ALS转基因鼠脊髓中表达增多,表明Wnt11及其受体Fzd5表达升高与肌萎缩脊髓侧索硬化症密切相关。

N-乙酰-L-色氨酸具有对新生鼠脑缺血/缺氧损伤的保护作用

目的探讨N-乙酰-L-色氨酸(L-NAT)对新生鼠脑缺血/缺氧损伤的保护作用。方法出生第7天的沙土鼠90只,随机分为正常对照组、缺血/缺氧组和L-NAT组。制备脑缺血/缺氧损伤模型,L-NAT组在造模前30min腹腔注射L-NAT(5mg/kg)。用Fluoro-Jade B(FJB)染色法观察细胞的死亡情况;用免疫荧光染色、Westernblotting观察活化的Caspase-3和Caspase-9在各组的表达。结果 L-NAT可使缺血/缺氧损伤后FJB阳性细胞数量减少,并抑制缺血/缺氧后Caspase-3和Caspase-9的活化。结论 L-NAT对新生鼠脑缺血/缺氧损伤动物模型具有保护作用。

Wnt信号通路在HepG2细胞株及其克隆形成细胞中表达的异质性

目的:研究Wnt信号传导通路的关键因子β-catenin和COX-2在肝癌细胞株HepG2及其克隆形成细胞中的表达,探讨Wnt信号传导通路在不同增殖能力细胞中表达的异质性.方法:以HepG2细胞为研究对象,采用软琼脂克隆形成实验筛选克隆形成细胞,应用RT-PCR、免疫化学和Westernblot等技术,检测Wnt信号传导通路的关键因子β-catenin和COX-2在肝癌细胞株HepG2及其克隆形成细胞中的表达.结果:β-cateninmRNA和蛋白质在克隆形成细胞中的表达水平高于HepG2细胞(0.905vs0.549;1.021vs0.700;均P<0.05).β-catenin的阳性信号在HepG2细胞中主要分布于细胞质,克隆形成细胞中主要分布于细胞核.COX-2mRNA和蛋白质在HepG2细胞中的表达高于克隆形成细胞(0.857vs0.527;0.731vs0.434;均P<0.05).大多数HepG2细胞中表达COX-2蛋白,阳性反应沉淀物主要位于细胞质,少数克隆形成细胞中有COX-2蛋白弱表达.结论:Wnt信号传导途径的关键因子β-catenin和COX-2与肝癌分化程度相关.β-catenin和COX-2等Wnt信号传导通路的关键因子在肝癌细胞HepG2及其克隆形成细胞的分布模式支持克隆形成细胞具有肝癌干细胞的特征.

N-乙酰-L-色氨酸减轻H_2O_2诱导小鼠海马神经元细胞凋亡

目的探讨N-乙酰-L-色氨酸(L-NAT)对海马神经元(PHN)缺血低氧损伤的影响。方法用600μmol/L H2O2诱导PHN制备海马神经元细胞凋亡模型,采用免疫荧光染色检测caspase-3的表达,Rhodamine 123染色检测线粒体膜势能(ΔΨm)的改变,锥虫蓝染色检测细胞存活率,比色法检测caspase-3、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,Westernblot检测caspase-3及凋亡诱导因子(AIF)和细胞色素C(CytC)等线粒体促凋亡因子在胞质蛋白和线粒体蛋白中的表达。结果 L-NAT可减轻H2O2所引起的细胞形态的死亡、存活率的降低、LDH的释放、caspase-3的激活、线粒体膜势能的丧失及AIF和CytC等线粒体促凋亡因子的释放。结论 L-NAT能通过抑制caspase依赖性和非依赖性的细胞凋亡途径,减轻H2O2诱导的小鼠海马神经元的细胞损伤。

2,4-D暴露环境下幼鼠酪氨酸羟化酶表达变化研究

目的观察在2,4-D(2,4-二氯苯氧基乙酸)暴露环境下,幼鼠黑质及中脑腹侧被盖区酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化情况。方法 110日龄的母鼠及其幼崽,自生后第1天随机分成对照组、2,4-D低剂量组和高剂量组,每组均含有幼崽10只。将除草剂2,4-D低剂量组和高剂量组分别按照每天70、110 mg/kg剂量注射至母鼠腹腔,对照组母鼠每天注射生理盐水0.5 mL。幼崽哺乳至出生后第16天,分别取黑质及中脑腹侧被盖区行TH免疫染色。结果低剂量组黑质TH阳性表达分别降低了30.1%(P<0.05);高剂量组黑质及中脑腹侧被盖区TH阳性表达减少32%和28.3%,均显著低于对照组(P<0.05)。结论 2,4-D能够抑制幼鼠黑质及中脑腹侧被盖区TH的表达,进而影响脑内多巴胺的合成,严重损害神经系统发育。

大鼠胚胎肝干细胞标记物的筛选

目的筛选大鼠胚胎肝脏组织特异性表达的mRNA,寻找肝干细胞的特异性标记物。方法取成年大鼠肝脏2个、2周胚龄大鼠胚胎肝脏2个作为标本。提取标本的RNA,反转录合成cDNA,再体外转录合成cRNA,同时进行标记。将cRNA纯化后进行杂交、洗涤、染色,对芯片进行扫描。将基因芯片数据进行处理与分析,筛选出目的基因。免疫组化方法检测各相关蛋白在胚胎肝脏组织中的表达。结果筛选出787个在大鼠胚胎肝脏组织中高表达的差异表达基因,涉及8个类别。免疫组化检测发现,高迁移率族蛋白A1(HMGA1)在2周胚龄多数胚肝胎细胞中表达阳性,阳性信号多分布于细胞质。结论大鼠胚胎肝脏组织发育相关的差异表达基因筛选可采用基因芯片,HMGA1是大鼠胚胎肝干细胞特异性标记物。

HepG2及其克隆形成细胞端粒酶活性的异质性研究

目的研究端粒酶在肝癌细胞株HepG2及其克隆形成细胞中的表达,探讨不同增殖能力的肝癌细胞中端粒酶活性的异质性,为肝癌的诊断以及治疗提供新的思路。方法利用软琼脂克隆形成实验富集分离人肝癌HepG2细胞的克隆形成细胞;常规培养HepG2及其克隆形成细胞,利用免疫细胞化学、Western blotting和RT-PCR检测hTERT蛋白和mRNA在HepG2细胞及其克隆形成细胞中表达的异质性。结果①HE染色显示,克隆形成细胞的胞核较HepG2细胞大,核仁明显;细胞伸出较多的细长突起,并连接形成网状。②免疫细胞化学染色显示,hTERT在HepG2细胞的表达以细胞质为主,克隆形成细胞则以细胞核为主。③Western blotting和RT-PCR结果显示,克隆形成细胞中hTERT蛋白质和mRNA的表达均高于HepG2细胞。结论①hTERT在HepG2细胞及其克隆形成细胞中的表达存在异质性,且在克隆形成细胞中表达较高。②hTERT在HepG2细胞及其克隆形成细胞中的表达模式提示克隆形成细胞具有肝癌干细胞的特征。

Caspase-3在成年ALS转基因模型鼠脊髓中的表达变化

目的研究Caspase-3蛋白在肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓不同发病时期的表达变化,探讨ALS发病过程中细胞凋亡情况。方法利用免疫组织化学(SP二步法)方法检测Caspase-3在ALS转基因模型鼠脊髓的发病前期(95d)、发病中期(108d)、发病后期(122d)表达变化,并与同窝野生型鼠(WT)比较。结果 ALS转基因模型鼠脊髓中Caspase-3阳性细胞在发病前期(95d)变化不明显,与同窝野生型鼠比较,差异无显著性;发病中期(108d)Caspase-3阳性细胞明显增多,与同窝野生型鼠比较,差异具有统计学意义;发病后期(122d)Caspase-3阳性细胞显著增多,但较发病前期有所下降,与同窝野生型鼠比较,差异具有统计学意义。结论 Caspase-3阳性细胞在ALS发病不同时期发生变化,表明细胞凋亡在ALS的发生发展中发挥着重要作用。

HepG2及其克隆形成细胞的耐药特征和对奥沙利铂的药敏异质性研究

目的 探讨HepG2细胞及克隆形成细胞的耐药特征及其对奥沙利铂的药敏异质性.方法利用软琼脂克隆形成实验分离克隆形成细胞,检测奥沙利铂对HepG2及其克隆形成细胞的抑制率和P-gp的表达.结果HepG2细胞的生长较克隆形成细胞慢；奥沙利铂对HepG2细胞的抑制作用高于克隆形成细胞；P-gp蛋白在HepG2细胞的表达较克隆形成细胞低.结论①P-gp蛋白的表达以及HepG2细胞对奥沙利铂的反应存在异质性.②克隆形成细胞具有肿瘤干细胞的耐药特征.

以执业医师资格考试为导向的人体解剖学教学改革研究

执业医师资格考试既是学生的行业准入考试,也是检验医学院办学水平的标准。针对执业医师资格分阶段考试对医学教育提出的新挑战,实现执业医师资格考试和人体解剖学的有效衔接十分有必要。由于人体解剖学教学具有严肃性、严谨性,教学内容枯燥繁杂,导致学生学习积极性不高,专业技能有待提升。对此,在执业医师资格考试导向下,文章结合人体解剖学理论、实践教学,改革教学大纲,推行联合集体备课制,改进教学方式,优化考核方式,进而有效提升学生的综合素质。

姜黄素对高胆固醇血症模型大鼠脑微循环障碍的改善作用及其机制

目的:探讨姜黄素对高胆固醇饮食致高胆固醇血症模型大鼠脑微循环氧化应激和炎症状态的影响,阐明其作用机制。方法:30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和姜黄素组,每组10只。对照组大鼠每日给予普通饲料,其余2组大鼠每日给予高胆固醇饲料,连续喂饲28 d。造模同时灌胃给药,姜黄素组大鼠给予姜黄素200 mg·kg^-1·d^-1,对照组和模型组大鼠给予等量1%羧甲基纤维素钠溶液,每日1次。连续给药28 d后,取大鼠血清,采用酶法检测各项血脂水平。提取大鼠脑微血管,采用黄嘌呤氧化酶法检测大鼠脑微血管组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)水平,Western blotting法检测大鼠脑微血管内皮细胞中细胞间黏附因子1(ICAM-1)、血管间黏附因子1(VCAM-1)和E-选择素(E-selectin)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显降低(P<0.01),大鼠脑微血管组织中SOD活性明显降低(P<0.01)、MDA水平明显升高(P<0.05),大鼠脑微血管内皮细胞中ICAM-1、VCAM-1和E-selectin蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,姜黄素组大鼠血清中TC、TG和LDL-C水平明显降低(P<0.05),HDL-C水平明显升高(P<0.05),大鼠脑微血管组织中SOD活性明显升高(P<0.05)、MDA水平明显降低(P<0.05),大鼠脑微血管内皮细胞中ICAM-1、VCAM-1和E-selectin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:姜黄素可以通过改善高胆固醇血症模型大鼠的血脂状况,增加脑微血管抗氧化酶能力,减低氧化应激损伤,减少脑微循环内皮细胞中黏附因子表达,进而改善脑微循环障碍。

间充质干细胞治疗多发性硬化的研究进展

多发性硬化(MS)是由自身免疫介导的中枢神经系统白质脱髓鞘性疾病,其发病机制仍未被阐明,临床表现复杂,传统治疗手段尚属姑息性。间充质干细胞具有自我更新和多向分化的特点,其易于分离、扩增迅速,具有免疫调节和神经修复功能,在治疗MS中具有巨大潜力和应用价值。本文通过对近年来文献研究与分析,就间充质干细胞(MSCs)治疗多发性硬化的基础研究及临床应用进行了较全面的综述,为本领域研究提供有价值的参考。

NeuroD1在ALS转基因鼠脊髓的表达

目的研究b HLH信号通路中激活型转录因子NeuroD1在肌萎缩脊髓侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)转基因模型鼠脊髓中的表达变化,进一步探讨b HLH信号通路在ALS转基因鼠发病中的作用机制,为临床治疗提供理论依据。方法选取ALS转基因鼠和同窝出生的野生型鼠各18只,分别于95d、108d和122d取材,应用免疫荧光染色观测鼠脊髓中NeuroD1阳性细胞数,RT-PCR和Western blot分别检测鼠脊髓NeuroD1 mRNA及蛋白水平。结果免疫荧光实验结果显示,NeuroD1阳性细胞主要分布在脊髓灰质前角,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠NeuroD1阳性细胞明显减少(t=6.82,P<0.05;t=17.22,P<0.05;t=5.86,P<0.05)。与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠NeuroD1 mRNA(t=3.82,P<0.05;t=5.85,P<0.05;t=4.96,P<0.05)和蛋白表达在95d、108d和122d均降低(t=8.49,P<0.05;t=8.74,P<0.05;t=5.94,P<0.05)。结论在ALS转基因鼠发病脊髓中NeuroD1阳性细胞明显减少,NeuroD1 mRNA和蛋白表达降低,表明NeuroD1与ALS的发生密切相关。