犬重度呼吸道蒸汽烧伤48h内肾脏的组织学和超微结构观察

本文对犬重度呼吸道蒸汽烧伤48h内肾脏标本进行了组织学和超微结构观察,结果表明:复合组和单呼组病变基本相似。肾血管球细胞可表现两方面的变化:一是细胞肥大和/或增生,前者表现为细胞肿大,胞质增多,富含细胞器;二是细胞退变,主要为细胞内水肿。细胞内水肿,复合组较单呼组为多见。肾小管显示不同程度的变性、坏死及管型形成。小管坏死多累及近曲小管。文中对近曲小管坏死的发生因素进行了简要讨论。

家兔严重烧伤后肾脏病变的动态变化及其与肾功能的联系

本文对家兔凝固汽油烧伤30d内肾组织进行了组织学和超微结构观察,并作血浆尿素氮、肌酐和血清钾等指标检测。结果表明:肾小球毛细血管袢先有充血,后显缺血,血管球细胞显示不同程度的肥大和/或增生。肾小管病变有空泡变、坏死及管型形成。血浆尿素氮、肌酐及血清钾伤后24h显著升高,后渐恢复至对照组水平。

狗呼吸道蒸汽烧伤及合并体表烧伤后的肾脏病理变化

单纯呼吸道蒸汽烧伤和呼吸道蒸汽烧伤复合体表烧伤肾脏病变的性质基本一致,表现为部分肾小球系膜区增宽,毛细血管袢有不同程度的缺血。超微结构显示血管球细胞呈现肥大、增生和肿胀两方面的变化。肾小管呈现空泡变、坏死及管型形成。空泡变和坏死主要累及近曲小管,管型则多见于远曲个管和髓质小管。但它们在发生频数和程度上复合组与单呼组有所差异。文中对病变的发生机理进行了简要讨论。血生化检查结果提示,本实验材料肾功能有一定程度的损害。从形态学角度来看,这种损害考虑系由肾小管坏死和肾小球缺血综合作用所致,前者可能起着更为重要的作用。

中毒剂量锌对大鼠小肠粘膜超微结构的影响

目的：阐明中毒剂量锌对肠粘膜免疫屏障结构的影响及其机理。方法：通过建立常锌（ＺＮ）、中毒剂量锌（ＺＰ）大鼠模型，应用病理形态学手段（电镜）对大鼠肠道粘膜的超微结构进行研究。结果：第４周末和第７周末血浆、红细胞膜和肠组织的锌含量ＺＰ组明显高于ＺＮ组（Ｐ＜０．０５）。第四周末和第七周末ＺＰ组光镜下肠粘膜未见异常改变；但是电镜下见肠道粘膜超微结构的严重损害。结论：中毒剂量锌可以引起肠道粘膜超微结构的严重损害；屏障功能削弱，大鼠小肠粘膜的免疫防御能力降低。

10个品系小鼠的AFLP分析

目的 实验用小鼠的遗传质量分析和品系鉴定。方法 应用AFLP技术对 10个品系小鼠进行分析。结果 共应用 2 5条单酶切引物、2 5对双酶切引物进行检测 ,其中 17条单酶切AFLP引物、2 0对双酶切AFLP引物检测到 10个品系小鼠的多态性变化。单酶切AFLP共扩出 2 5 1条带 ,片段大小在 10 0～ 2 0 0 0bp ,共得到 89个多态位点 ,占总扩增带的3 5 5 %。双酶切AFLP在 5 0～ 60 0bp扩增出清晰条带 ,统计 15 0 7条带 ,共得到 3 78个多态位点 ,占总扩增带的 2 5 1%。对多态性片段进行统计 ,计算出不同品系间的相似指数和遗传距离指数。结果表明昆明鼠 (KM )与TA2、BALB c、BALB c nu关系较近 ;所有品系间关系最近的两品系为BALB c和BALB c nu ;关系较远的是DBA 2与T73 9、615、C5 7BL 6J ,与小鼠品系来源及培育史相符。结论 通过筛选获得特异性AFLP标记 ,可用以区分遗传背景或外观形态很相似的品系。

缺氧对世居高原藏族人脐静脉内皮细胞ET和NO水平的影响

目的 :观察世居高原藏族人静脉血ET和NO含量和缺氧对培养脐静脉内皮细胞ET和NO水平的影响 ,以期从胎儿生长发育的角度探讨人类高原适应的机制。方法 :分别以放射免疫分析法和Greiss法测定世居高原藏族、移居高原汉族和平原汉族人静脉血ET和NO含量。体外培养世居高原藏族和移居高原汉族新生儿UVECs,分为 4组 :①世居高原藏族人UVECs常氧组 (TC) ;②世居高原藏族人UVECs缺氧组 (TH) ;③移居高原汉族人U VECs常氧组 (HC) ;④移居高原汉族人UVECs缺氧组 (HH) ,收集培养上清液测定ET和NO含量。结果 :世居高原藏族人静脉血NO水平显著高于移居高原汉族人 ,而ET水平显著低于移居高原汉族人。体外低氧 (0 .5 %O2 )条件培养 12h和 2 4h时 ,TH组ET浓度显著低于HH组 ,而HH组与TH组和HC组与TC组相应时间点之间的NO浓度差异无显著性意义。结论 :缺氧时世居高原藏族人UVECsET分泌增高的程度较低 ,可能有助于保持相对低的血管张力 ,有利于胎儿血液供应。

低氧习服大鼠骨骼肌毛细血管密度和血流供应的变化特点

目的 :观察大鼠在低氧习服过程中 ,骨骼肌毛细血管密度和血流供应的变化规律。方法 :大鼠在模拟海拔5 0 0 0m低氧 5、15和 30d后 ,用肌球蛋白ATP酶 (mATPase)组织化学方法显示骨骼肌Ⅰ、Ⅱ型纤维和毛细血管并进行图像分析 ;用放射性微球法测定骨骼肌血流量。结果 :低氧 5d组大鼠骨骼肌纤维即出现明显萎缩 ,15d和 30d组大鼠毛细血管密度显著增高 ,但单位面积内毛细血管数 /肌纤维数 (C/F )的比值无明显变化。在所观测的时间内 ,各组大鼠骨骼肌血流量未见明显变化。结论 :大鼠在低氧习服过程中 ,毛细血管并未发生真正的增生 ,而由于骨骼肌纤维出现萎缩 。

大鼠肝脏枯否细胞分离、培养与鉴定

目的 研究大鼠肝Kupffer细胞 (KC)分离、培养和鉴定。方法 用Ⅳ型胶原酶离体灌注、差速离心分离大鼠KC ,再经贴壁培养 ,并应用免疫组织化学、吞噬功能实验、电镜等方法进行鉴定。结果 此法能成功地获得较高纯度的KC ,KC的获得率为每只大鼠 ( 7～ 10 )× 10 6 ,贴壁后细胞呈典型的星形或多角形 ,免疫组织化学染色显示lysozyme阳性 ,胞浆内见吞噬的latexbeads颗粒 ,电镜观察显示细胞表面伪足及微绒毛发达 ,胞浆内含有大量的溶酶体及吞噬的latexbeads颗粒。结论 该方法简单易行 ,细胞纯度较高 。

近交系小鼠微卫星DNA多态性的研究

随机选择位于小鼠不同染色体上的微卫星引物42对 ,用PCR技术对C3H、C57、BALB/c、DBA、TA2、T739、B615、BACB/c -nu -nu和SCID等9种实验室常用近交系小鼠微卫星DNA多态性进行了研究。结果显示有信息的40对引物中 ,9种近交系小鼠在各基因座上均出现一条清晰条带 ,28个基因座表现为多态性。其中D3Mit22、D7Nds1、D11Mit12、D12Nds2、D15Mit17、D16Mit3、D16Mit4基因座表现为显著多态性。T739、B615和TA2的遗传背景相近 ,其相似系数分别为90 %和85 % ;其次为TA2、SCID和B615 ,其相似系数分别为80 %和82.5 %。结果表明所检测的小鼠符合近交要求 ,筛选出的引物能典型地反映9个近交系小鼠的品系特异性和遗传背景 ,可用于常规检测小鼠品系来源和遗传背景等。

星形细胞肿瘤p53蛋白和PCNA免疫组化及其临床病理意义

应用免疫组化和图象分析技术对人脑星形细胞肿瘤中抑癌基因ｐ５３蛋白（４７例）和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）（９７例）的定位、分布及反应强度与分级和预后的关系进行了研究。结果显示；３种ｐ５３蛋白抗体的阳性率为２３．４％～６６．７％，其中ＣＭ－１抗体阳性率高于ｐＡｂ１８０１和ｐＡｂ２４０；ｐ５３表达水平在Ⅱ～Ⅳ级高于１级，并与ＰＣＮＡ标记指数之间相关。ＰＣＮＡ反应强度既与分级相关，又与预后相关，对于分析星形细胞瘤增殖活性和恶性程度有重要意义。

缺氧大鼠心肌毛细血管密度与VEGF变化的研究

目的 观察大鼠在缺氧习服过程中心肌组织毛细血管密度和血管内皮细胞生长因子 (VEGF)及其受体的变化规律。方法 大鼠在 50 0 0m模拟高原缺氧 5、1 5和 30d后 ,用碱性磷酸酶 (ALP)组织化学方法显示心肌组织毛细血管并进行图像分析 ;用原位杂交和免疫组织化学技术观察心肌组织中VEGFmRNA、VEGF、FLK和Flt 1蛋白表达情况。结果 缺氧 1 5d时 ,右室心肌单位面积内毛细血管数与肌纤维数的比值 (C/M)显著增高。左室心肌随着缺氧时间的延长 ,毛细血管密度和C/M比值逐渐增高 ,缺氧30d时毛细血管密度和C/M比值较常压对照组显著增加。原位杂交和免疫组织化学结果显示 ,VEGFmRNA主要存在于心肌细胞中 ,而VEGF蛋白主要分布于心肌细胞的胞浆、胞膜及心肌细胞间隙中。机体缺氧时心肌组织中VEGF的表达普遍增强 ,5d时达高峰。FLK和Flt 1主要分布于微血管内皮细胞 ,各组中FLK和Flt 1表达无显著差异。结论 大鼠在缺氧习服过程中 ,左、右室心肌毛细血管出现增生 ,其机制可能与VEGF的表达上调有关。

去甲二氢愈创木酸对恶性胶质瘤细胞增殖和分化的影响

目的：观察去甲二氢愈创木酸（ＮＤＧＡ）对人恶性胶质瘤细胞系ＳＨＧ－４４细胞增殖和分化的影响。方法：细胞培养、免疫组化、光镜和电镜观察及流式细胞仪检测。结果：①在２００μｍｏｌ／Ｌ浓度范围内，ＮＤＧＡ对ＳＨＧ－４４细胞有增殖抑制和诱导分化作用，且这种作用与浓度呈正相关；②在ＮＤＧＡ处理９６ｈ内，ＮＤＧＡ对ＳＨＧ－４４细胞的增殖抑制作用以处理后２４ｈ最明显；③ＮＤＧＡ处理后，ＳＨＧ－４４细胞增殖受阻于Ｇ１→Ｓ期。结论：ＮＤＧＡ对ＳＨＧ－４４细胞有明显的增殖抑制和诱导分化作用，且这种作用有周期特异性。

NDGA对内皮细胞增殖抑制的作用研究

目的 :探讨去甲二氢愈创木酸 (NDGA)对内皮细胞增殖活性的影响及特点。方法 :采用形态学观察、细胞计数、流式细胞仪分析、免疫组织化学等技术方法观测不同浓度NDGA作用下人脐静脉内皮细胞ECV 3 0 4细胞增殖活性的变化。结果 :①不同浓度 ( 5 0～ 2 0 0 μmol/L)的NDGA处理ECV 3 0 4细胞 2 4～ 72h后或一定浓度 ( 10 0 μmol/L)的NDGA处理ECV 3 0 4细胞不同时间 ( 1～ 8d)后 ,均出现NDGA抑制细胞增殖的作用 ,且这种作用与NDGA的浓度和作用时间有关。②NDGA处理细胞后出现细胞增殖活性降低 ,主要表现为有丝分裂计数和细胞增殖指数降低 ,细胞的生长抑制率增加 ,细胞生长减慢 ,免疫组化显示PCNA、BrdU标记指数下降等。结论 :NDGA对内皮细胞增殖有明显抑制作用 ,此抑制作用可能是其影响血管生成的主要原因之一。

大鼠心、脑、骨骼肌毛细血管染色方法比较

目的 对大鼠心、脑、骨骼肌毛细血管染色方法进行比较。方法 采用Mg2 + ATPase、碱性磷酸酶、肌球蛋白 ATPase等酶组化法及墨汁灌注法和Ⅷ 因子相关抗原免疫组化法对毛细血管进行染色。结果 心脏和脑组织毛细血管用碱性磷酸酶染色 ,而骨骼肌组织毛细血管用肌球蛋白 ATPase染色效果最好 ;Ⅷ 因子相关抗原免疫组化法用于脑组织毛细血管显示次之 ;Mg2 + ATPase法在心脏、脑、骨骼肌定位效果较差 ;墨汁灌注法只要方法掌握得当 ,各部位毛细血管显示均较好。结论 对毛细血管染色 ,不同器官和组织应采用不同的方法。在心脏和脑用碱性磷酸酶组化法显示较好 ,而在骨骼肌用肌球蛋白 ATPase酶组化法较好。

银染单链构象多态性分析──一种快速检测基因点突变的新方法

银染单链构象多态性分析──一种快速检测基因点突变的新方法Ｓｉｌｖｅｒｓｔａｉｎｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ──Ａｒａｐｉｄａｎｄｓｉｍｐｌｅｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｃｔｇｅｎｅｐｏｉｎｔｍｕｔａｔｉｏｎｓ王...

去甲二氢愈创木酸对VEGF及其受体KDR基因表达影响的研究

目的 探讨去甲二氢愈创木酸 (NDGA)对血管生成因子 (VEGF)及其相应受体KDR基因表达状况的影响及其意义。方法 采用免疫组化、原位杂交及图像分析等技术方法观测NDGA作用下人恶性胶质瘤细胞系SHG 44细胞VEGF基因、人脐静脉内皮细胞系ECV 30 4细胞VEGF的相应受体KDR基因表达的变化。结果 ① 1 0 0 μmol/L的NDGA处理胶质瘤细胞 1～ 3d ,引起VEGF蛋白及mRNA表达水平的降低 ;② 1 0 0 μmol/L的NDGA处理内皮细胞 1～ 3d ,受体KDR的蛋白表达也呈下降趋势 ,且KDR基因表达的降低较胶质瘤细胞VEGF的降低更为明显。结论 NDGA对胶质瘤细胞VEGF的表达有抑制作用 ,NDGA也抑制了内皮细胞KDR的表达 。

DEN诱发大鼠肝癌变的病理形态与细胞增殖活性的定量研究

目的 探讨大鼠肝癌变的形态演变和细胞增殖活性的关系。方法 通过DEN诱发启动模型和肝癌模型 ,采用图像分析技术 ,对病变细胞的形态进行测量 ,以PCNA和BrdU免疫组化结果反映细胞增殖活性。结果 形态测量证实卵圆细胞是一大小仅为正常肝细胞的 1 /8、核浆比却大 6倍、形态不规则的增生小细胞 ;增生灶 /结节嗜碱性肝细胞形态参数与肝癌细胞相似 ;PCNA和BrdU阳性细胞主要位于癌前增生灶及肝癌组织中 ;并且病变形态与细胞增殖活性有较好的一致性。

诺帝抑制糖尿病大鼠视网膜VEGF和iNOS的表达及意义

目的 检测诺帝对实验性糖尿病大鼠视网膜血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor ,VEGF)和诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase ,iNOS)表达的影响,探讨诺帝抑制糖尿病视网膜病变的可能机制。方法 采用链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病模型,将动物随机分为糖尿病组(5只×2 )、诺帝治疗组(5只×2 ) ,另取10只正常大鼠作为正常对照组,其中,诺帝治疗组在出现糖尿病表现后按2 7mg kg腹腔注射诺帝溶液(隔日1次) ,糖尿病组和正常对照组只在同期注射等量生理盐水。注射后1、3个月取视网膜制备切片,采用免疫组织化学方法半定量检测视网膜中VEGF和iNOS阳性反应及其分布。结果 正常对照组大鼠视网膜VEGF和iNOS呈极微弱的表达。1个月时,糖尿病组VEGF和iNOS阳性反应增强,其阳性反应面积较正常对照组显著增加(P <0 .0 1) ;诺帝治疗组大鼠视网膜VEGF和iNOS阳性表达面积较糖尿病组明显减少(P <0 .0 1)。在3个月时,糖尿病组VEGF和iNOS阳性表达较1个月明显增加;诺帝治疗组较糖尿病组VEGF和iNOS表达明显减少,阳性表达面积在两组间有非常显著的差异(P <0 .0 1)。结论 诺帝明显抑制实验性糖尿病大鼠视网膜VEGF和iNOS阳性反应,提示诺帝可能通过降低糖尿病大鼠视网膜VEGF和iNOS的产生,从而缓解大鼠糖尿病视网膜病变。

烧伤复合内毒素血症早期纤维连接蛋白在肾脏分布的变化及其意义

目的：探讨烧伤复合内毒素血症早期纤维连接蛋白（Ｆｎ）在肾组织的分布和血清浓度的变化规律及其意义。方法：以大鼠２０％Ⅲ度体表烧伤复合小剂量内毒素（１ｍｇ／ｋｇ体重）腹腔注射为模型，应用免疫组织化学方法、血清学测定及图像分析技术。结果：体表烧伤复合内毒素注射组（烧注组）肾组织Ｆｎ积分光密度在０．５ｈ即开始下降且达最低点，以后逐渐恢复。烧注组各时相点显著高于单纯体表烧伤组（单烧组），但低于单纯内毒素注射组（单注组）；烧注组血中Ｆｎ浓度在０．５ｈ即开始升高，随后上下小波动，但各处理组之间未见显著差异。结论：①烧伤后小剂量内毒素能明显刺激肾组织Ｆｎ的合成和释放；②组织Ｆｎ的降解和释放是血中Ｆｎ升高的主要原因；③组织Ｆｎ的降解和释放既能使血中Ｆｎ升高，又能通过Ｆｎ降解产物引起组织损伤。