不同疏水参数有机溶剂中木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的变化

【目的】探寻疏水参数（10gP）不同的有机溶剂对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的影响。【方法】制备固定化木瓜蛋白酶，在疏水参数不同（logP=-1．30，-1．10，-0．76，-0．33，-0．24，0．28，0．49，0．68，0．80，1．31，1，80，2．0，2．5，3．5和5．0）的15种有机溶剂及其不同体积分数（ψ-5％，10％，15％，20％，25％，30％，35％，40％，50％，60％和70％）的溶液中，测定木瓜蛋白酶及其固定化酶的活性，以不含相应有机溶剂的0．1mol／LpH7．2磷酸缓冲液或Tris-盐酸缓冲液为对照，分析不同有机溶剂及其体积分数对酶活性的影响。【结果】在低疏水参数（10gP≤-0．24）的有机溶剂中，有机溶剂二甲基亚砜、1，4-二氧六环和乙腈具有在低体积分数（妒≤10％）下，激活木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的特性，有机溶剂甲醇、乙醇虽然在低体积分数（p≤10％）下不能激活木瓜蛋白酶及其固定化酶活性，但其活性与对照（So—O）相当；低疏水参数有机溶剂在高体积分数（9≥30％）下抑制酶活。当有机溶剂的疏水参数为0．28～1．31时，其对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性有显著抑制作用。在有机溶剂疏水参数较高（logP≥1．80）条件下，低体积分数（9≤10％）时酶活性下降较慢，超过-定体积分数（P≥30％）后,酶活性开始升高。【结论】低logP（10gP≤0．24）有机溶剂在低体积分数（ψ≤10％）时可激活或稳定木瓜蛋白酶及其固定化酶活性，而在高体积分数（ψ≥30％）时对酶活有抑制作用；中logP（0．28≤logP≤1．31）有机溶剂对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性具有显著抑制作用；高logP（10gP≥1．80）有机溶剂在低体积分数（ψ≤10％）时抑制木瓜蛋白酶及其固定化酶活性，但在高体积分数（ψ≥30％）时酶活性升高。

二甲基亚砜对木瓜蛋白酶活性与构象的影响

利用紫外吸收光谱、荧光发射光谱研究了二甲基亚砜对木瓜蛋白酶活性与构象的影响.当二甲基亚砜溶液为低体积分数时,木瓜蛋白酶活性比对照(φ二甲基亚砜=0)有所上升;随着二甲基亚砜溶液体积分数升高,木瓜蛋白酶活性却不断降低,紫外吸收光谱的第1吸收峰明显地向长波长方向移动;且紫外光吸收峰值逐渐降低,到φ二甲基亚砜为50%时又有所升高.木瓜蛋白酶在不同体积分数二甲基亚砜溶液中荧光发射光谱发生变化.在φ二甲基亚砜为5%、10%、20%二甲基亚砜溶液中,与对照(φ二甲基亚砜=0)相比,酶对底物分子的亲和力降低;最大反应速度上升.结果表明:低体积分数的二甲基亚砜对木瓜蛋白酶的构象影响较小,酶活性上升;高体积分数的二甲基亚砜对木瓜蛋白酶的构象影响较大,酶活性下降.

用木瓜蛋白酶及固定化木瓜蛋白酶拆分DL-苯丙氨酸(英文)

为了将手性化合物D-苯丙氨酸和L-苯丙氨酸进行分离,利用木瓜蛋白酶及固定化木瓜蛋白酶催化的方法对其拆分.试验结果表明,用DL-苯丙氨酸合成N-乙酰-DL-苯丙氨酸,得率为88.7%.木瓜蛋白酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(IPSAC)、尼龙布固定化木瓜蛋白酶(IPN)催化合成N-乙酰-L-苯丙氨酰苯胺时,对催化合成过程影响最大的因素分别是溶液中的离子强度、溶液中的离子强度、反应温度;溶液中的离子强度与pH对合成的影响较大.本试验得出分别用木瓜蛋白酶、IPSAC、IPN催化合成N-乙酰-L-苯丙氨酰苯胺的3个最佳方案;用此3个方案合成时,产率分别为61.2%、54.7%、36.3%.N-乙酰-L-苯丙氨酰苯胺水解生成L-苯丙氨酸,产率59.2%,光学纯度为96.6%.N-乙酰-D-苯丙氨酸水解生成D-苯丙氨酸,产率61.7%,光学纯度为95.7%.

生物化学教学与考核方法的改进

生物化学是一门理论与实验并重的学科,其教与学都有很大的难度。如何将理论知识的灌输和实验技能的培养有机地相结合,最大程度地提高学生课堂学习的效率,是生物化学教学的一项重要课题。本文通过对传统生物化学课程的教学、实验、考核办法改进,有效地促进了学生对生物化学知识的灵活掌握。

STJT公司全员薪酬体系设计

本文是河北水利电力学院大学生创新创业训练计划项目成果,项目组四名成员到STJT公司从事生产实践活动,在指导老师的带领下完成对STJT公司全员薪酬体系的设计,为公司管理提供参考意见,受到公司管理层的一致好评。