2022年北京冬奥会张家口赛区潜在鼠疫自然疫源地调查研究

目的分析2022年北京冬奥会张家口赛区(崇礼区)和河北省鼠疫自然疫源地(康保县)2018—2021年鼠疫调查资料,对比两地宿主媒介构成和自然地理景观差异,为崇礼区潜在鼠疫自然疫源地的研究提供科学依据。方法2018—2021年在崇礼区和康保县采用5 m夹线法和样方法捕获鼠类,对捕获鼠类及其媒介蚤类进行分类、鉴定;开展鼠疫病原学检测;使用Excel 2010对调查数据进行整理汇总,应用SPSS 19.0软件对调查数据进行统计学分析。结果在崇礼区,采用5 m夹线法有效布夹42000夹次,捕鼠515只,捕获率为1.23%;样方法调查20个样点,未捕到鼠;获鼠体蚤218只,蚤指数为0.42;在鼠体内均未检出鼠疫菌。在康保县,采用5 m夹线法有效布夹14844夹次,捕鼠304只,捕获率为2.05%;样方法共调查1060 hm^(2),捕鼠231只,平均鼠密度为0.22只/hm^(2);获鼠体蚤821只,蚤指数为1.53;在鼠体内共检出鼠疫菌6株,其中分离自长爪沙鼠3株、黑线仓鼠2株、黑线毛足鼠1株。崇礼区黑线仓鼠平均鼠密度明显低于康保县(Z=-2.309,P<0.05)。结论崇礼区与康保县的鼠种和媒介蚤类构成有明显不同,自然地理景观也存在明显差异,崇礼区发生原发性动物间鼠疫流行的可能性不大。

中国鼠疫菌随机引物扩增多态性指纹图谱

目的 对中国不同鼠疫自然疫源地鼠疫菌染色体的分析和比较发现其近缘关系进而从分子水平进行分型。方法 用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术。结果 第 1条引物将中国的鼠疫菌分为 11个类型 ,每个类型都有一定的条带规律和地理分布范围。第 2条引物将我国的鼠疫菌分为 5个类型。结论 随机扩增多态性DNA(RAPD)

不同鼠疫检测技术在河北省鼠疫监测中的应用研究

目的通过用鼠疫血凝试验、胶体金标记免疫层析(金标)和ELISA 3种方法检测啮齿动物血清,用金标、ELISA、PCR与鼠疫反向血凝试验和细菌分离检测啮齿动物脏器,评价其在鼠疫监测中的应用效果。方法用鼠疫血凝试验、金标和ELISA 3种方法检测啮齿动物血清;用金标、ELISA、PCR、鼠疫反向血凝试验和细菌分离检测啮齿动物脏器。结果鼠疫血凝试验、金标和ELISA 3种方法对啮齿动物血清的阳性检出率分别为0.32%、0.32%和1.26%。金标、ELISA、PCR、鼠疫反向血凝试验和细菌分离对啮齿动物脏器的阳性检出率分别为3.15%、0.70%、4.90%、0.70%和0.70%。结论金标、ELISA、PCR值得推广应用,非常适合基层和快速诊断应用。

鼠疫冻干血球保存时间对效价的影响

目的测定鼠疫冻干血球的保存年限对其效价的影响。方法鼠疫间接血凝试验试管法和反向间接血凝试验试管法。结果对1996～2001年不同年份生产的冻干F1抗原、抗体血球的凝集效价进行比较,结果发现冻干血球的效价随着保存时间的延长而下降。F1抗原血球可以保存3年,其效价滴度仍可达1∶4万以上。F1抗体血球低温保存3年,效价滴度在1∶5120～1∶10000。结论鼠疫F1抗原和抗体冷冻血球细胞能分别保存2年和4年。

河北省鼠间鼠疫发生因素及流行趋势

河北省鼠间鼠疫发生因素及流行趋势史献明，宋东霞，段家伟一、河北鼠疫流行简史：河北省历史上曾多次发生过人间鼠疫流行，有记载的病例１９０６人，死亡１７０５人，波及１３个市、县的４２个村（街）。除１８８８～１８９８年围场县鼠疫流行，是由当地的野鼠鼠疫动物病...

张家口地震灾区鼠疫动物病调查

１９９８年１月１０日，张北、尚义两县交界处发生里氏６．２级地震。根据省卫生厅指示，于４月１５日至５月１５日，对灾情较重的单晶河、大河、海流图３乡进行了鼠疫动物病调查。１基本情况上述３乡位于张北高原，属半荒漠草甸草原，辖自然村１９８个，总人口５．５万余...

保定市蠡县皮毛市场鼠疫高危人群血清鼠疫F1抗体流行病学调查

目的了解保定市蠡县皮毛市场毛皮加工人群血清鼠疫F1抗体的分布情况。方法统计学抽样保定市蠡县皮毛加工162人份血清,采用间接血凝和鼠疫胶体金2种方法检测,并与非皮毛加工63人份血清做对照。结果162份皮毛加工人群的血清样本检验均为阴性,与对照的63份样本相一致。结论在保定市蠡县皮毛加工人群中尚未发现鼠疫隐性感染者。

鼠疫防控领域中最紧迫的10个研究方向

人们曾经认为,鼠疫是一门“昨天”的科学,鼠疫领域的基本问题已经解决,只要按照既定的方向不懈努力,人类就能够像消灭天花一样,在全世界的范围内消灭鼠疫。然而,这一努力持续了几十年,鼠疫不但仍然存在,而且在全世界的范围内再次愈演愈烈,这说明我们对鼠疫的认识仍然肤浅。

河北省鼠疫菌株生化特性的研究

目的通过测定2002～2003年河北省鼠疫自然疫源地分离的27株鼠疫菌,得到其生化特性的本底资料。方法采用液体汤管法和固体试管法(斜面或高层)实验测定27株鼠疫菌对糖醇的酵解能力和生化反应。结果(1)27株鼠疫菌对甘油、L阿胶糖等多种糖酵解,产酸不产气;不发酵麦芽糖、鼠李糖,72h内对密二糖不酵解,5d以后有8株菌的部分糖管呈迟缓发酵。(2)生化反应:27株鼠疫菌在还原KNO3、硝化反应、VP试验、尿素试验、靛基质试验呈阴性,不液化明胶,在无蛋白胨酸性琼脂培基上不生长,不能利用枸橼酸盐;甲基红反应阳性,均能轻微产生H2S。结论被试的27株鼠疫菌按中国鼠疫菌生态型分型标准属于B群鄂尔多斯高原型。主要生化特征稳定,与疫源地过去分离的鼠疫菌株生化特性基本一致。

河北省鼠疫自然疫源地长爪沙鼠体蚤多样性研究

目的通过对河北省鼠疫自然疫源地长爪沙鼠种群结构和生物多样性的研究,为河北省动物间鼠疫防控提供参考。方法整理2000—2017年河北省鼠疫自然疫源地长爪沙鼠体蚤监测数据进行统计分析。结果 2000—2017年共检长爪沙鼠3 739只,带蚤长爪沙鼠1 016只,检获各种蚤1 813匹,隶属3科8属15种,秃病蚤蒙冀亚种和方形黄鼠蚤蒙古亚种为优势种,分别占41.59%和36.68%。长爪沙鼠体蚤指数和染蚤率季节消长趋势整体十分相似,全年呈单峰型。长爪沙鼠体蚤多样性、均匀性较为稳定,波动幅度较小,生态优势度在2011年之前较为稳定,2011年以后波动较大。优势度2005年、2010—2011年、2014—2017年出现小高峰。结论长爪沙鼠体蚤指数和染蚤率季节消长趋势明显,长爪沙鼠体蚤均匀性较低、优势度较高时,更容易发生动物间鼠疫。

胶体金免疫层析法检测鼠疫F1抗体技术的应用及效果评价

目的研究鼠疫胶体金免疫层析法(GICA)快速检测鼠疫F1抗体技术在鼠疫血清学诊断、监测及流行病学调查中的应用及效果评价。方法应用GICA、双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA)和间接血球凝集试验(IHA)对比检测190份啮齿动物血清和11份鼠疫免疫血清中鼠疫F1抗体。结果190份动物血清IHA检测结果均为阴性:GICA检测出1份阳性血清,滴度1:10;DAgS-ELISA检测出3份阳性血清,滴度1:4(++) 2份和1:16(+)1份。3种方法检测11份鼠疫免疫血清均为9份阳性,但GICA敏感性低于IHA和DAgS-ELISA (GICA与IHA:t=3．257,P<0．05;GICA与ELISA:t=3．625,P<0．01;IHA与ELISA:t=1.437,P>0．05)。201份血清检测结果,GICA与IHA总符合率99．50％,与DAgS-ELISA总符合率99．00％,3种方法检测结果差异无统计学意义(x2=0．5,P>0．05)。结论GICA检测鼠疫F1抗体敏感特异、简便快速,与DAgS-ELISA同样为鼠疫血清学快速诊断和鼠疫监测中有应用价值的检测技术。

河北省鼠疫疫源地宿主动物种群结构研究

目的通过对河北省鼠疫疫源地内宿主动物种群结构和生物多样性变化研究,为动物间鼠疫防控提供参考。方法整理1990-2013年河北省鼠疫疫源地宿主动物调查监测数据,利用统计学方法分析。结果主要宿主动物调查共捕获鼠类10 241只,长爪沙鼠处于优势地位占65.3%,达乌尔黄鼠占25.5%。夜行鼠调查共捕鼠1 392只,其中黑线毛足鼠和黑线仓鼠为优势种群,分别占28.74%和50.43%。结论河北省鼠疫疫源地内长爪沙鼠和达乌尔黄鼠种群在年际间存在演替,夜行鼠优势种群以黑线仓鼠和黑线毛足鼠为主,转化为黑线仓鼠、黑线毛足鼠和小毛足鼠,鼠疫宿主动物种群结构及密度与动物间疫情发生明显相关。

多重PCR检测方法在鼠疫监测中的应用

目的 验证在鼠疫疫源地调查中应用多重PCR方法快速检测鼠疫菌的实用性。方法在14个省的17个鼠疫监测点采集标本2524份。选用针对鼠疫菌特异序列的引物,并加入内部对照模板．直接从鼠肝、脾等脏器标本中进行鼠疫核酸检测，与细菌分离培养结果相比较并进行统计学分析。结果 两种检测方法的符合率为92．67％。PCR方法阳性检出率为10．38％，较细菌培养阳性检出率（4．48％）高（Х^2=682．25，P〈0．01）。结论 多重PCR方法可应用于鼠疫监测中，比传统方法迅速、灵敏，但还有待于优化。

河北省鼠疫耶尔森菌毒力测定

目的 研究河北省鼠疫自然疫源地分离的鼠疫耶尔森菌（简称鼠疫菌）对小鼠和豚鼠的毒力。方法 选取2005年分离的鼠疫菌株（200501、200502、200507、200511、200512）、1972年分离的鼠疫菌株（7220）、1994年分离的鼠疫菌株（9401），腹股沟皮下注射法接种小鼠和豚鼠，动物死亡后常规解剖取肝、脾等脏器做细菌培养，计算每株鼠疫菌对小鼠和豚鼠的半数致死量（LD50）及LD50的95％可信区间，比较各菌毒力的强弱。结果 7220株和2005年分离的5株鼠疫菌毒力强，小鼠LD50介于21．72-113．59个菌；9401株毒力相对较弱，LD50为1809．88个菌。7株菌对豚鼠均有较强的毒力，LD50介于3．35×10^2-6．64×10^4个菌。结论 7株鼠疫菌属于鄂尔多斯高原型强毒鼠疫菌，对小鼠和豚鼠均有较强的毒力。

河北省鼠疫自然疫源地人群血清鼠疫F1抗体流行病学调查

目的调查河北省鼠疫自然疫源地人群F1抗体的三间分布情况和维持机制。方法在河北省历史人间鼠疫发生地和动物间鼠疫活动疫源地的2个镇3个行政村采集居民血样196份作为调查对象,采集非疫区的居民血样100份作为对照组。同时进行常规的鼠疫间接血凝试验和鼠疫F1抗体胶体金试验。结果通过对历史疫区和动物间鼠疫流行活动疫源地的196份居民血清检测,阳性4份,阳性率为2.04%。间接血凝试验阳性4份,金标试验阳性3份;非疫区居民血清2种试验全部为阴性。经统计学检验,疫区居民鼠疫F1抗体阳性率和非疫区F1抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=0.822,P<0.05)。2种试验方法的阳性率无统计学意义。结论目前,在河北省鼠疫自然疫源地内尚存在一定比例的鼠疫F1抗体阳性人群,具体原因需做进一步的调查分析。

鼠疫F1抗体胶体金检测试剂的研制和现场评价

目的为建立鼠疫诊断和监测所需的快速检测F1抗体水平的方法,研制并评价金标检测试剂。方法胶体金标记和实验室检测,14个省17个监测点现场监测中检测了动物和人的血清样本4789份。结果金标检测试剂特异性强,敏感性、稳定性好,现场检测结果与间接血凝方法无差异。结论鼠疫F1抗体胶体金检测试剂可以用于鼠疫病例诊断和动物监测。

河北省鼠疫自然疫源地内长爪沙鼠寄生蚤的研究

目的 了解河北省鼠疫自然疫源地内长爪沙鼠寄生蚤的种类、构成、季节消长。方法 收集活体长爪沙鼠及其窝巢 ,置熏鼠桶用乙醚或汽油将鼠蚤一并熏死 ,捡蚤 ;鼠洞用法兰绒探蚤棒每洞探 3次 ,收集探到的蚤。直接在显微镜下鉴定或制成玻片标本鉴定。结果 共发现寄生蚤 3科 10属 16种 ,秃病蚤蒙冀亚种为优势种 ,其次为方形黄鼠蚤蒙古亚种、二齿新蚤、光亮额蚤。体蚤、巢蚤染蚤率、蚤指数均以 3、4月份较高。染蚤率、蚤指数年度间有较大差异 ,但无明显规律。结论 查清了河北省鼠疫自然疫源地内长爪沙鼠寄生蚤的种类、构成、季节消长 ,为今后进一步研究河北省的鼠疫自然疫源地及动物间鼠疫流行因素 ,提供了科学依据。

河北省鼠疫自然疫源地内达乌尔黄鼠寄生蚤的研究

目的 了解河北省鼠疫自然疫源地内达乌尔黄鼠寄生蚤的种类、构成、季节消长。方法 收集活体达乌尔黄鼠及其窝巢 ,置熏鼠桶用乙醚或汽油将鼠、蚤一并熏死 ,捡蚤 ;鼠洞用法兰绒探蚤棒每洞探 3次 ,收集探到的蚤。直接在显微镜下鉴定或制成玻片标本鉴定。结果 共发现寄生蚤 3科 9属 14种 ,方形黄鼠蚤蒙古亚种为优势种 ,其次为光亮额蚤、二齿新蚤。染蚤率、蚤指数年度间有较大差异 ,无明显规律。体、巢、洞干的染蚤率、蚤指数在鼠间鼠疫流行的前一年均较高。巢蚤的染蚤率 7月份为最高 ,蚤指数以 5月份为最高 ;体蚤、洞干蚤的染蚤率、蚤指数均以 4、5月份为最高。结论 查清了河北省鼠疫自然疫源地内达乌尔黄鼠寄生蚤的种类、构成、季节消长 ,为今后进一步研究河北省的鼠疫自然疫源地及动物间鼠疫流行因素 ,提供了科学依据。

动物鼠疫季节性分布的集中度法和圆形分布法分析

目的通过集中度法和圆形分布法探讨内蒙古高原长爪沙鼠鼠疫疫源地动物鼠疫季节分布特征。方法运用集中度法和圆形分布法对动物鼠疫发生的季节性变化规律进行分析。结果内蒙古高原长爪沙鼠鼠疫疫源地2019年全年剖验各种动物18547只,检验媒介昆虫4604组,间接血球凝集试验(IHA)法检验各种动物血清3936份,共计判定阳性材料123份。其中1月、2月、4月及6月未检出阳性材料,其他各个月份均有阳性材料,集中在11月(36份)、9月(31份)和8月(27份)。集中度(M=0.807)为0.7~0.9,说明长爪沙鼠鼠疫自然疫源地动物鼠疫有明显的季节性;圆形分布法存在角均数α=96.73°,r=0.6705,Z=55.3006,P<0.001。结论集中度法和圆形分布法均能较真实地反映动物鼠疫发生的季节性分布。

河北省鼠疫菌CRISPR基因分型及流行病学分析

目的对河北省鼠疫菌株进行规律聚集间隔短回文重复序列CRISPR)基因分型。方法利用聚合酶链式反应(PCR),采用3对CRISPR引物,对河北省分离的128株鼠疫菌进行扩增,测定扩增产物核酸序列并进行分析,确定河北省菌株CRISPR基因型。结果128株鼠疫菌在3个CRISPR位点上有8种间隔序列,包括al、a2、a3、b1、b2、c1、c2、c3,分为2个基因型。118株鼠疫菌株为Cb2型,另外10株鼠疫菌均为新基因型(命名为Cc△1型)。结论通过CRISPR分析显示河北省鼠疫菌株遗传进化比较稳定,建立了CRISPR基因库,为鼠疫菌种群遗传进化和鼠疫防控的研究提供参考。