钙离子对重组创伤弧菌溶细胞素诱导THP-1细胞损伤的影响机制

目的研究重组创伤弧菌溶细胞素（rVvhA）诱导人单核细胞白血病细胞（THP-1）的凋亡机制及其Ca2＋的变化。方法采用CCK-8法、激光共聚焦显微镜结合Fluo3／AM法、流式细胞术结合AnnexinV-PI标记等检测rVvhA对THP-1细胞的影响，并观察胞内Ca2＋浓度变化。结果rVvhA可诱导THP-1细胞发生凋亡并引起细胞内ca2＋浓度升高，细胞内钙离子螯合剂BAPTA—AM处理组胞内钙离子升高幅度远高于细胞外钙离子螯合剂EGTA处理组。结论rVvhA具有诱导THP-1细胞凋亡的生物学活性，并能引起细胞内ca2＋浓度升高，升高的Ca2＋主要源于胞外钙离子内流。

以伯氏疏螺旋体为载体菌研究梅毒螺旋体的基因功能

目的：利用体外可培养的伯氏疏螺旋体作为载体菌，将梅毒螺旋体的基因转入相应的伯氏疏螺旋体菌株进行功能性表达，进而对梅毒螺旋体的基因功能进行研究。方法构建一个携带梅毒螺旋体基因tp0111的大肠埃希菌-伯氏疏螺旋体穿梭质粒，利用电转化法，将质粒转入相应的伯氏疏螺旋体菌株中，通过观察伯氏疏螺旋体的表型和相关基因表达变化，来研究梅毒螺旋体的基因功能。结果成功将梅毒螺旋体基因tp0111转入伯氏疏螺旋体rpoN突变株内，一定程度上回补了伯氏疏螺旋体突变株的表型缺陷。结论首次证明tp0111是梅毒螺旋体的rpoN基因，同时验证了伯氏疏螺旋体可以作为载体来研究梅毒螺旋体的致病因子及其基因调控系统。