非诺贝特与三七粉联合用药对大鼠高脂血症的影响

目的探讨非诺贝特和三七粉联合用药对大鼠高脂血症的影响。方法采用高脂饲料喂养SD大鼠建立高脂血症大鼠模型。40只大鼠随机分为正常对照组、高脂血症模型组、非诺贝特组、三七组以及三七和非诺贝特联合用药组。实验结束后测大鼠血浆甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果非诺贝特与三七粉联合用药能显著降低大鼠血浆TG、TC、LDL-C的含量,升高血浆HDL-C的含量(P<0.05或P<0.01);并能显著降低血浆MDA含量,提高SOD、GSH-Px的活性(P<0.05或P<0.01)。结论非诺贝特与三七粉联合用药,对高脂饲料喂养大鼠的高脂血症具有显著的预防和治疗作用,机制可能与其增强抗氧化能力有关。

盐酸帕罗西汀肠溶缓释片的制备及体外释放研究

目的制备盐酸帕罗西汀肠溶缓释片,并对其体外释放度进行考察。方法采用HPMC K100LV和HPMC K4M作为骨架材料,以水乳糖为填充剂制备盐酸帕罗西汀缓释片芯,再使用Eudragit L30D-55包肠溶衣,制成盐酸帕罗西汀肠溶缓释片,并采用f_2相似因子法评价自制制剂和参比制剂在释放介质中的体外释放行为。结果体外释放度实验显示,自制制剂和参比制剂的f_2相似因子值大于50。结论制备的盐酸帕罗西汀肠溶缓释片的释药行为与参比制剂的体外释放行为相似。

多西他赛自微乳化释药系统的研究

目的:研制多西他赛自微乳化释药系统(DTX-SMEDDS)。方法:通过溶解度试验、处方配伍和伪三相图的绘制,以自微乳化时间、色泽和粒径的大小为指标,筛选油相、表面活性剂、助表面活性剂的最佳搭配和处方配比,制备获得DTXSMEDDS,并对DTX-SMEDDS的分散粒径、电位和体外溶出度等进行了测定。结果:DTX-SMEDDS自微乳化稀释后的粒径为96.9 nm,自微乳化时间<1 min,其在水中2 h累积溶出百分率为82.39%,是原料药(2.35%)的约35倍。结论:所制备的DTX-SMEDDS大大提高了多西他赛的溶解和溶出,为进一步研发多西他赛新制剂提供了理论和试验依据。

多西他赛自乳化固体分散体的制备及体外特性研究

目的制备多西他赛自乳化固体分散体(DTX-SESD),并考察其体外特性。方法以自乳化辅料和PEG6000为载体制备多西他赛固体分散体,进行溶解度、体外溶出度和稳定性实验,考察不同自乳化辅料、不同制备方法、不同介质对溶出度的影响。并采用差示扫描量热分析、X-射线粉末衍射分析以鉴别药物在载体中的存在状态。结果 DTX-SESD的溶解度和溶出度分别是原料药的约33.8倍和12.5(2 h)倍;自乳化辅料对药物溶出有显著影响;溶剂法和溶剂熔融法制备的自乳化固体分散体溶出度好于熔融法;溶出介质对溶出无显著影响;自乳化固体分散体中药物主要以分子状态存在。结论自乳化固体分散体能显著提高多西他赛的溶解度和溶出度。

HPLC测定银杏总黄酮自乳化微乳中银杏总黄酮的含量

目的:建立高效液相色谱法测定银杏总黄酮自乳化微乳中银杏总黄酮的含量。方法:采用菲罗门-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50,v/v)为流动相,流速为1.0 ml·min^(-1),检测波长为360 nm,柱温为30℃。结果:银杏总黄酮中槲皮素、山柰素和异鼠李素三种成分分离度较好,槲皮素在2.0~40.0μg·ml^(-1)质量浓度范围内,山柰素在3.0~60.0μg·ml^(-1)质量浓度范围内,异鼠李素在2.0~40.0μg·ml^(-1)质量浓度范围与峰面积呈良好的线性关系。槲皮素、山柰素和异鼠李素的平均回收率分别为98.4%,99.7%和100.5%,RSD分别为0.92%,0.62%和1.24%(n=9)。结论:该方法对银杏总黄酮自乳化微乳中三种成分分离效果较好,辅料无干扰,专属性强、稳定可靠,适用于银杏总黄酮自乳化微乳中银杏总黄酮的含量测定。

银杏总黄酮自乳化释药系统的制备及其性质研究

目的:制备银杏总黄酮自乳化释药系统,并对其体外特性进行评价。方法:通过溶解度试验、处方配伍和伪三元相图中形成微乳区域面积的大小来确定银杏总黄酮自乳化释药系统的处方组成,并考察了该释药系统经水稀释后形成微乳的外观、形态、粒径分布、Zeta电位以及体外药物溶出度。结果:所得银杏总黄酮的自乳化释药系统的处方组成:油酸聚乙二醇甘油酯(油相)、聚山梨酯-80(表面活性剂)、二乙二醇单乙基醚(XCF,助表面活性剂),最佳配比为10∶6∶4,载药量10.0 mg·g^(-1)。经水稀释后形成澄清、透明状溶液,透射电镜观察微乳呈大小均一,球状分布,平均粒径为(87.4±26.7)nm,Zeta电位为(-13.1±1.5)m V。溶出度结果表明,银杏总黄酮的自乳化释药系统在p H1.2的盐酸溶液中45 min内累积溶出度可达(96.1±4.8)%。结论:自乳化释药系统能够显著提高银杏总黄酮的体外溶出速度,有望成为银叶总黄酮的优良口服制剂。

利拉鲁肽对缺氧和高糖状态下人脐静脉内皮细胞释放NO的影响及机制研究

目的:观察利拉鲁肽对缺氧和高糖状态下人脐静脉内皮细胞释放一氧化氮NO)的影响,并探讨其可能机制。方法:采用体外分离和培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立缺氧和高糖模型,分别以利拉鲁肽、利拉鲁肽+exendin(9-39)孵育HUVECs,通过MTT法测定各实验组细胞增殖活力、比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、硝酸还原酶法检测NO含量,以半定量RT-PCR技术检测各组细胞内皮型一氧化氮合酶(e NOS)基因表达情况。结果:利拉鲁肽能促进缺氧和高糖状态下HUVECs细胞增殖活力,减少LDH的漏出量,促进NO的释放和e NOS基因的表达(P<0.05或P<0.01)。胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体阻断药exendin(9-39)可以部分抑制利拉鲁肽的上述作用(P<0.05)。结论:利拉鲁肽能够改善缺氧和高糖状态下人脐静脉内皮细胞的内皮功能,其机制可能与上调e NOS基因表达、促进NO分泌有关。

YSA肽修饰的声敏脂质体制备与表征

目的:制备由YSA肽修饰的载小干扰RNA(siRNA)声敏脂质体,并进行初步表征。方法:将YSA与磷脂-聚乙二醇2000-马来酰亚胺(DSPE-PEG2000-Mal)反应生成DSPE-PEG2000-YSA,薄膜分散-挤出法制备声敏脂质体(siRNA/YSA-LP),采用透射电子显微镜和粒径分析仪等进行表征。结果:制备的脂质体近球形,粒径均匀,平均粒径为(102. 31±5. 61) nm,Zeta电位为(4. 92±1. 15) mV,包封率为(78. 61±4. 39)%;在4℃条件下放置30 d,粒径和Zeta电位无明显变化,模拟血浆中48 h内能保持稳定,经超声触发下可以释药。结论:制备的YSA肽修饰的声敏脂质体理化特性良好,性质稳定,具有超声敏感的特性。

DA7R肽修饰的红细胞膜包裹纳米粒的制备与评价

目的制备由^(D)A7R肽修饰的红细胞膜包裹的PLGA纳米粒,并进行体外评价。方法合成DSPE-PEG 2000-^(D)A7R,制备PLGA纳米粒,制备由^(D)A7R肽修饰的红细胞膜包裹纳米粒(^(D)A7R-NP),用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)、粒径分析仪等进行表征。结果制备的^(D)A7R-NP平均粒径为(102.8±11.7)nm,包封率为79.14%±2.57%,体外4~8℃可稳定保存30 d,模拟血浆中48 h稳定。细胞实验表明^(D)A7R-NP跨越血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的能力显著提高。结论制备的由^(D)A7R肽修饰的红细胞膜包裹的PLGA纳米粒理化特性良好,且具有良好的脑靶向潜力。

T7/A7R肽修饰的替莫唑胺脂质体制备与表征

目的:制备由T7、A7R肽双重修饰的替莫唑胺脂质体,并进行初步的体外表征。方法:分别将T7、A7R与DSPE-PEG_(2000)-Mal反应生成DSPE-PEG_(2000)-T7和DSPE-PEG_(2000)-A7R,逆相蒸发法制备双肽修饰的脂质体(T7/A7R-LP),并进行相应的体外表征。结果:制备的脂质体近球形,粒径均匀,平均粒径(96.6±6.5)nm,zeta电位为-(5.15±1.03)mV,包封率(36.38±3.95)%;在4~8℃条件下放置30 d,粒径和zeta电位无显著变化,体外6 h释药完毕;细胞摄取试验表明T7/A7R-LP具有较好的脑部靶向递送能力。结论:制备的T7/A7R肽修饰的脂质体理化特性良好,性质较为稳定,具有一定的脑部药物递送前景。

星点设计-效应面法优化PLGA-PEG纳米粒的处方工艺

目的:采用星点设计-效应面法优化载体基质为PLGA-PEG的siRNA纳米粒的制备工艺。方法:采用复乳法制备载药纳米粒,以二氯甲烷体积、吐温-80的质量分数和复乳的超声时间为试验因素,纳米粒的平均粒径、包封率和突释量为考察指标,根据星点设计原理安排实验和处方工艺优化。结果:成功制备了纳米粒。最佳工艺为二氯甲烷体积13 ml,乳化剂吐温-80的质量分数为3.1%,复乳的超声时间为2.8 min;按优化处方工艺制备的纳米粒的平均粒径(101.5±6.3)nm,包封率(57.6±4.8)%,体外48 h累积释放度高于80%。结论:星点设计-效应面法适用于PLGA-PEG纳米粒的工艺优化,所建立的数学模型预测性良好。

利拉鲁肽对缺氧和高糖所致心肌细胞钙超载和细胞凋亡的影响

目的研究利拉鲁肽对缺氧和高糖所致心肌细胞钙超载和细胞凋亡的影响。方法采用原代培养的乳鼠心肌细胞,建立缺氧和高糖模型。实验分为:正常对照组、利拉鲁肽对照组、缺氧和高糖模型组、利拉鲁肽处理组、胰高血糖素样肽-1(glucagon like peptide-1,GLP-1)受体抑制剂组、高渗对照组6组。采用荧光分光光度法检测心肌细胞内钙离子变化,化学荧光法检测活性氧族(reactive oxygen species,ROS)水平、利用生化方法检测Ca^(2+)-ATP和Na^+-K^+-ATP酶活性、RT-PCR技术检测钙敏感的钙蛋白酶(μ-calpain)基因表达、流式细胞仪测定细胞凋亡率、ELISA法检测细胞caspase-3活性。结果与正常对照组相比,缺氧高糖模型组细胞内ROS水平、μ-calpain mRNA表达量、caspase-3活性均显著升高(P<0.01);Ca^(2+)-ATP和Na^+-K^+-ATP酶活性显著降低(P<0.01);游离钙离子浓度由(117.19±15.04)nmol/L增加至(508.53±26.11)nmol/L,细胞凋亡率由(3.95±0.12)%增加至(31.03±4.30)%(P<0.01)。利拉鲁肽处理组细胞较缺氧高糖模型组上述参数均明显改善,游离钙离子浓度和细胞凋亡率显著降低(P<0.01);GLP-1R抑制剂exendin(9-39)可拮抗利拉鲁肽的上述作用(P<0.05)。结论利拉鲁肽可明显抑制缺氧和高糖所致心肌细胞钙超载及μ-calpain基因的上调,降低caspase-3水平,减少心肌细胞凋亡,对心肌细胞具有保护作用。

星点设计-效应面法优化盐酸溴己新吸入粉雾剂的处方

目的:优化盐酸溴己新吸入粉雾剂的处方。方法:采用冷冻干燥-气流粉碎法制备盐酸溴己新吸入粉雾剂,通过星点设计考察甘露醇(X_1),亮氨酸(X_2)和泊洛沙姆188(X_3)在辅料中的用量对盐酸溴己新吸入粉雾剂的休止角(Y_1)、细微粒子剂量(Y_2)和空气动力学粒径(Y_3)的影响。根据最佳数学模型绘制效应面,通过重叠等高线图确定最优处方。结果:影响因素和考察指标之间存在定量关系,优化处方为甘露醇:亮氨酸:泊洛沙姆188在处方中的比例为2.4∶2.22∶0.05。较优处方的各指标实测值与预测值较接近。结论:采用星点设计-效应面法完成了盐酸溴己新吸入粉雾剂的多目标同步优化。

载siRNA的PLGA-b-PEG纳米粒制备及初步体外评价

目的 探讨载小干扰核糖核酸(siRNA)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物-b-聚乙二醇(PLGA-b-PEG)纳米粒的制备工艺,并对其进行表征及初步体外评价。方法 采用复乳法制备含药纳米粒。通过透射电子显微镜、原子力显微镜观察形态,Zeta电位/粒度分析仪测定Zeta电位及其粒径,计算包封率,考察稳定性、体外释药,并进行细胞增殖检测。结果 制备的纳米粒呈球形,粒径均匀,平均粒径为(101.5±6.3)nm,Zeta电位为-(31.7±4.5)mV,包封率为(57.6±4.8)%;在4℃条件下放置30 d,粒径和Zeta电位分别为(103.3±5.7)nm和-(32.5±5.2)mV;纳米粒体外可持续释药48 h以上,且超声可加速药物释放;siRNA纳米粒具有较强的肿瘤细胞活性抑制作用。结论 制备的纳米粒理化特性良好,性质稳定,具有一定的超声刺激释药特性。

沉默MPR1基因的壳聚糖/siRNA纳米粒的制备与初步表征

目的:构建一种能够沉默肿瘤多药耐药相关基因MPR1的小干扰RNA(siRNA)的基因转染载体。方法:采用天然来源的高分子材料壳聚糖(CS)作为沉默MPR1的siRNA递送载体材料,以三聚磷酸钠(TPP)作为交联剂,制备了CS与siRNA静电结合的交联纳米粒-CS/siRNA。同时制备不经TPP交联的CS与siRNA简单静电结合物CS-siRNA作为对照。分别对其进行理化性质表征、稳定性、体外释药、细胞毒性及细胞摄取研究。结果:与CS-siRNA相比,CS/siRNA具有更小的粒径、更高的药物包封率、更少的药物释放和更好的血清稳定性,对siRNA的缩合保护作用更好,且CS/siRNA的放置稳定性显著优于CS-siRNA。所制备的空白载体、CS/siRNA和CS-siRNA均无明显的细胞毒性。CS/siRNA的细胞摄取率和胞内分布均显著优于CS-siRNA。结论:本研究所制备的CS/siRNA有望提供一个有潜力的siRNA转染载体。

利拉鲁肽对缺氧和高糖诱导内皮细胞炎症反应的影响

【目的】从炎症角度观察缺氧和高糖对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)等炎症因子表达的影响,探讨利拉鲁肽的干预作用及其可能机制。【方法】采用体外分离和培养HUVECs建立缺氧和高糖模型,实验分为5组,正常对照组、缺氧高糖模型组、利拉鲁肽低、高剂量(25、50 nmol/L)干预组,以及吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)干预组。应用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6、ICAM-1、VCAM-1水平,RT-PCR法检测TNF-α基因表达,Western-blotting法检测NF-κB p65蛋白表达。【结果】缺氧和高糖可上调内皮细胞中炎症因子的表达(P<0.01);与缺氧高糖模型组相比,利拉鲁肽可抑制缺氧和高糖诱导下细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6、ICAM-1和VCAM-1水平(P<0.01),降低TNF-α基因和NF-κB p65蛋白表达(P<0.01);与缺氧高糖模型组相比,PDTC组TNF-α基因、NF-κB p65蛋白表达量减少(P<0.01)。【结论】利拉鲁肽可抑制缺氧和高糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎症反应,发挥一定的内皮保护作用。

复方双氯芬酸辣椒凝胶贴膏的质量控制及体外透皮

目的:建立复方双氯芬酸辣椒凝胶贴膏质量控制方法,并考察其体外透皮效果。方法:以HPLC法测定主药双氯芬酸二乙胺和辣椒素的含量,并测定凝胶膏剂含膏量、粘接性能、重量差异等指标;同时对其小鼠离体皮肤透皮特性进行了测试。结果:建立的HPLC法可同时测定双氯芬酸和辣椒素含量,双氯芬酸(以钠盐计)和辣椒素分别在25～800 mg.L-1和0.5～16.0mg.L-1内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.49%和98.37%。小鼠透皮实验中,与市售扶他林乳胶剂相比,本凝胶膏剂中双氯芬酸二乙胺释放较慢,但24 h累积透皮量与扶他林近似;与市售好及施贴片相比,本凝胶贴膏中辣椒素释放较快和较多。结论:建立的方法可用于复方双氯芬酸辣椒凝胶贴膏的质量控制,其体外透皮效果良好,为开发凝胶膏剂新产品提供了实验依据。

多西他赛固体过饱和自乳化释药系统的制备及体外特性

目的:制备多西他赛固体过饱和自乳化释药系统(DTX-S-sSEDDS),并对其体外特性进行评价。方法:比较了不同的多西他赛自乳化释药系统在理化性质和体外溶出度方面的差异。结果:采用2.5%羟丙基甲基纤维素(HPMC K100)为促过饱和物质,乳糖为固体载体,喷雾干燥法制备获得的多西他赛固体过饱和自乳化释药系统(DTX-S-sSEDDS1),与常规自乳化制剂(DTX-SEDDS2)相比,DTX-S-sSEDDS1处方中自乳化油辅料用量减少2/5,经水分散后的粒径(106.12nm)仍小于DTX-SEDDS2的粒径(119.84nm);水中2h累积溶出百分率(90.96%)显著大于DTX-SEDDS2(76.77%),是原料药(2.87%)的约32倍。结论:所制备的多西他赛固体过饱和自微乳化释药系统(DTX-S-sSEDDS)在减少自乳化辅料用量的同时,可大大提高药物DTX的溶解性和溶出度,为进一步研发安全性和稳定性好的多西他赛自乳化新制剂提供了理论和实验依据。

促过饱和物质对多西他赛自乳化系统体外释药特性的影响

目的研究促过饱和物质对多西他赛自乳化系统(DTX-SEDDS)释药特性的影响。方法测定DTX-SEDDS的体外溶出度,并考查不同的促过饱和物质,促过饱和物质的不同用量,不同的投药量以及不同的释放介质对DTX-SEDDS体外释药特性的影响。结果不同的促过饱和物质如羟丙基甲基纤维素(HPMC)、十二烷基磺酸钠(SDS)、聚维酮(PVPK30)、AvicelRC591中,HPMC的促溶和稳定作用最强;不同厂家同黏度的HPMC对药物溶出影响差异不显著,同浓度不同黏度的HPMC对药物溶出影响有显著性差异,低黏度的好于高黏度HPMC;HPMC的不同用量对DTX-SEDDS体外释药有一定影响;当低黏度HPMC的用量为1%～8%,累积溶出百分率无显著差异,当高黏度HPMC的用量≤0.5%或≥8%时药物溶出明显减少;不同介质对药物溶出影响无显著性差异。推荐自乳化处方中选择加入1%～8%的低黏度HPMC(型号:山东50,山东100或上海K100)效果较好。结论过饱和物质HPMC可以明显提高DTX-SEDDS的溶出和稳定性,同时可减少自乳化油的用量,可提高自乳化制剂的临床安全性。

固体分散体技术改善多西他赛的体外溶出特性

目的:研制多西他赛(DTX)固体分散体以提高其体外溶出度。方法:以聚乙二醇6000(PEG6000)、泊洛沙姆188(F68)为载体制备多西他赛固体分散体,差热分析、X-射线粉末衍射分析以鉴别药物在载体中的存在状态,并进行了稳定性、体外溶出度及影响因素考查。结果:DTX-PEG6000固体分散体中药物主要以分子状态存在。DTX-PEG6000的稳定性远好于DTX-F68。溶剂法的溶出度好于熔融法和溶剂熔融法;载体的用量和投药量的不同对药物溶出有一定影响;介质对溶出影响不大。结论:用溶剂法制备多西他赛固体分散体DTX-PEG6000(1∶6)能显著提高药物的溶出速度和程度。