间歇运动和粒细胞集落刺激因子促进心梗大鼠干细胞动员与内源性心肌细胞增殖的激光共聚焦/流式细胞术观察分析

目的:探讨跑台间歇运动结合粒细胞集落刺激因子对心肌梗死大鼠干细胞动员的效果和在内源性心肌细胞增殖中的作用及其对心功能的影响。方法:90只成体雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、心梗组(MI)、心梗+间歇运动组(ME)、心梗+粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组(MG)和心梗+G-CSF+间歇运动组(MGE)。结扎大鼠左冠状动脉前降支制备心肌梗死模型。ME和MGE组大鼠在心肌梗死手术结束1周后进行3周跑台间歇运动。MG和MGE组大鼠术后1h皮下注射人源重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF),10μg/kg/d×5d,其他各组大鼠给予同剂量生理盐水。免疫荧光法检测并计算梗死边缘区心肌细胞增殖百分率;流式细胞术检测外周血单个核细胞中c-kit^+和CD29^+细胞百分率;Western Blot方法检测心肌组织中c-kit和CD29蛋白表达水平。TTC染色检测心肌梗死面积百分率;彩色多普勒超声和血流动力学方法检测心功能。结果:与Sham组相比,MI组PCNA^+心肌细胞百分率、外周血单个核细胞中c-kit^+和CD29^+细胞百分率、心肌组织中c-kit和CD29蛋白表达和心肌梗死面积显著增加,心功能显著降低;与MI组比较,ME、MG和MGE组大鼠梗死边缘区心肌组织中PCNA^+心肌细胞百分率、外周血单个核细胞中c-kit^+和CD29^+细胞百分率、心肌组织中c-kit和CD29蛋白表达均显著增加,梗死面积显著减小,心功能显著增强,且MGE组变化最为显著。结论:间歇运动或粒细胞集落刺激因子可显著促进干细胞动员归巢,诱导心肌细胞增殖,缩小梗死面积,提升心功能,且二者联合效果优于单一因素作用。

有氧运动与干细胞动员的心肌细胞增殖研究进展

适宜运动是防治心脏疾病的有效方式,其作用机制尚未完全阐明,安全有效的运动处方需要系统研究。运动可使正常心肌细胞发生生理性肥大与增殖以及多种细胞因子的分泌和干细胞的有效动员,促进心肌细胞增殖分化。成体心肌细胞增殖的来源包括存活的心肌细胞、心肌干/祖细胞以及外周的骨髓间充质干细胞等。干细胞的动员、趋化归巢并分化为心肌细胞是心肌损伤修复的细胞基础。本文从心肌细胞增殖潜力、心肌梗死(MI)的干细胞治疗和运动促进MI心肌细胞增殖等三个方面综述运动促进干细胞动员,诱导内源性心肌细胞再生对MI心肌修复和心功能改善的可能机制、存在问题及相关研究进展。

线粒体形态和功能与细胞骨架间关系的研究进展

线粒体为细胞的各种生命活动提供能量,也是细胞凋亡的重要参与者.线粒体功能多样与其运动性较强以及形态具有可塑性相适应,往往被运输到细胞的特定位置.线粒体的运输主要是通过与能影响其形态和功能的各种细胞骨架蛋白相互作用而实现.越来越多的证据显示:线粒体以细胞骨架蛋白为轨道而得以运动,与此同时细胞骨架通过各种非特异性的途径调节了线粒体的形态和功能.综述了细胞骨架与线粒体形态和功能关系的研究进展,并对发展前景进行了预测.

声化学诱导艾氏腹水瘤细胞凋亡机制初探

本研究采用频率1.43MHz,声强3W/cm2的高频聚焦超声处理艾氏腹水肿瘤细胞,研究超声激活血卟啉诱导艾氏腹水肿瘤细胞凋亡的途径及其与癌细胞内的氧自由基之间的关系。通过细胞免疫组织化学方法检测与癌细胞凋亡相关的Bax,细胞色素c和caspase-3蛋白的动态表达,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活性变化,硫代巴比妥酸法检测膜脂质过氧化物的含量。结果发现超声加血卟啉处理1h,癌细胞胞浆中的三种促凋亡蛋白表达增多,3h时表现为高表达;处理1h的癌细胞,超氧化物歧化酶活性下降,膜脂质过氧化物增多。研究结果表明超声激活血卟啉诱导艾氏腹水肿瘤细胞凋亡可能通过线粒体途径,且与癌细胞受损后产生的氧自由基有关。

有氧运动和G-CSF干预对心梗大鼠心肌细胞再生的影响及其机制探讨

目的:探讨有氧运动和G-CSF干预对心梗(MI)大鼠心肌细胞再生和心功能提升的影响及其可能机制。方法:雄性SD大鼠,体重180～220g,建立MI模型。术后1周将存活大鼠随机分为假手术组(Sham组)、心梗组(MI组)、心梗+运动组(ME组)、心梗+动员剂组(MG组)和心梗+动员剂+运动组(MGE组),每组15只。ME和MGE组进行8周跑台有氧运动。8周后测定心功能,进行组织学染色,检测细胞增殖和干细胞趋化相关因子的表达。结果:与Sham组比较,MI组心肌出现替代性纤维化,心功能显著下降,心肌中PCNA、Ki-67和VLA-4表达增多(P<0.01),GATA 4mRNA和蛋白表达下降(P<0.01,P<0.05);与MI组比较,ME、MG和MGE组梗死区心肌纤维化程度减轻,心功能显著提升,梗死面积显著缩小(P<0.05),心肌中PCNA、Ki-67、c-kit、CD29、CXCR4和VLA-4蛋白的表达显著增加;且二者联合干预使LVEDP下降和梗死面积缩小更为显著(P<0.05),细胞增殖和干细胞趋化相关因子表达增加优于单一因素。结论:有氧运动和/或G-CSF干预均可缩小梗死面积,有效提升大鼠心功能;发现有氧运动和G-CSF干预可有效促进MI后心肌细胞增殖及成体干细胞动员、归巢和分化,且二者联合干预效果更为显著。

棕色田鼠心电图的测定和分析

实验采用标准双极肢导联 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ )和加压单极肢导联 (aVR、aVL、aVF) ,对轻度麻醉的 30只成体棕色田鼠进行了心电图测定 ,并对心电图各波进行了初步分析 .结果表明 ,棕色田鼠的心律为窦性心律 ;QRS波平均心电轴为 82° ,它与T波不能完全分开 ,呈QRS -T波群 ,无S

应用超声心动图检测心肌梗死大鼠恢复期心脏结构与功能改变

目的探讨超声心动图检测心肌梗死大鼠恢复期心脏结构与功能的可行性、准确性及敏感性。方法 47只正常清洁级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为心肌梗死组23只和假心肌梗死组24只,均常规麻醉开胸,心肌梗死组于左心耳2 mm处丝线结扎左冠状动脉前降支;假心肌梗死组仅穿线不结扎冠状动脉。造模8周后进行超声心动图检查,获得大鼠心脏形态学及功能学指标,然后处死大鼠对心脏行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,并与超声心动图检测结果进行关联性分析。结果心肌梗死组23只大鼠中,经超声心动图检出心肌梗死14只,经TTC染色提示大鼠存在心肌梗死者16只,故超声心动图检测心肌梗死大鼠的敏感性为87.5%(14/16),特异性为100%(7/7);超声心动图检测结果与心脏TTC染色具有良好地关联性(Carmer’s V=0.91且P<0.05)。结论超声心动图可用于准确评估心肌梗死大鼠恢复期心脏结构与功能的变化。

梅花鹿的生态生物学研究进展

梅花鹿(Cervus nippon)隶属偶蹄目鹿科,是濒危级珍稀保护动物,主要分布在黑龙江、吉林、江西、浙江、安徽、四川和甘肃省等地。总结了梅花鹿的分类与分布、种群密度和结构、生境选择、行为、繁殖、食性以及生存现状,提出了相应保护对策。

胸腺肽诱导Hela细胞死亡的研究

为了研究胸腺肽Tα1对肿瘤细胞的生长抑制效应,试验检测了Tα1在体外对宫颈癌Hela细胞生长增殖的影响。不同浓度Tα1处理Hela细胞24 h或48 h,用显微镜观察Hela细胞生长的形态学变化,MTT法检测细胞死亡率。采用实时定量PCR以及Western Blot检测自噬相关因子lc3基因及其蛋白的表达,进一步了解细胞死亡的行为。结果表明,用不同浓度的Tα1处理Hela细胞,在10~30μg/mL浓度范围内,随着Tα1含量的增高,Hela细胞的死亡率明显增加,同时LC3的表达量也显著升高,且与药物剂量呈正相关。这些结果说明Tα1在一定剂量范围内,能够在体外通过自噬的方式诱导Hela细胞死亡。

靶向SynDIG1的shRNA慢病毒载体的构建及功能鉴定

为了构建靶向突触分化诱导基因1(SynDIG1)的shRNA慢病毒表达载体,设计出SynDIG1的siRNA的靶点序列,并合成含干扰序列的双链DNA发卡结构shRNA,合成的Oligo经过退火分别与双酶切处理后的pLKO.1-GFP载体连接。将构建的重组质粒pLKO.1-GFP-SynDIG1 shRNA转化到DH5α感受态细菌中,过夜培养后挑选阳性克隆子,扩增后提取DNA进行质粒测序,得到两个序列正确的重组质粒。用这些重组质粒转染HEK293T细胞以及大鼠海马神经元细胞,蛋白免疫印迹及细胞免疫荧光检测SynDIG1 shRNA对外源性和内源性SynDIG1表达的敲减作用。进一步用重组质粒转染HEK293T细胞产生慢病毒颗粒,用病毒颗粒感染DIV2和DIV14的神经细胞,免疫印迹检测SynDIG1的表达。结果表明这两个重组质粒均能够有效地抑制外源性和内源性SynDIG1的表达,对HEK293T中瞬时表达的SynDIG1敲减率达到75%,其慢病毒颗粒感染对早期神经细胞中内源性SynDIG1的表达抑制也很明显。用pLKO.1-GFP成功构建了能够有效抑制外源性和内源性SynDIG1表达的重组质粒,为探讨RNA干扰技术抑制神经细胞SynDIG1基因表达的相关研究奠定基础,为研究SynDIG1基因在神经传导和突触发育及其可塑性调节中的作用提供了有力工具。