姜黄素拮抗LPS活化巨噬细胞对胰岛β细胞的损伤

目的检测姜黄素对LPS诱导小鼠巨噬细胞极化的影响,并检测不同极化状态下细胞培养上清对小鼠胰岛β细胞的损伤作用;研究姜黄素通过拮抗LPS诱导巨噬细胞M1极化保护胰岛β细胞的效应与机制。方法体外培养小鼠小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞,通过LPS(2μg/ml)诱导建立M1极化模型,采用姜黄素(7.5 1μmol/l)单独或与LPS共同处理细胞。通过流式细胞术检测巨噬细胞CD40、CD86和CD206表达,并通过ELISA技术检测细胞培养上清液中TNF-α含量。采用不同诱导条件下巨噬细胞培养物上清液处理小鼠胰岛β细胞,检测其细胞凋亡与细胞增殖,分析胰岛β细胞损伤的程度。结果姜黄素可拮抗LPS诱导小鼠巨噬细胞向M1极化,降低细胞培养上清中TNF-α的含量,保护M1极化细胞培养液上清中TNF-α等炎症性细胞因子对胰岛β细胞的损伤。

小鼠巨噬细胞极化过程中细胞内活性氧的变化

目的研究巨噬细胞经典模式极化(M1极化)和替代模式极化(M2极化)过程中,细胞内活性氧(ROS)的变化。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞,分别用干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)诱导细胞向M1极化和M2极化。采用直接免疫荧光标记和流式细胞术分析CD86、CD16/32和CD206表达,流式细胞术检测细胞内ROS。结果 IFN-γ诱导RAW264.7细胞M1极化,对照组细胞CD86、CD16/32和CD32阳性细胞百分率分别为(56.4±4.1)%、(96.2±2.0)%和(19.4±4.3)%,而50μg/L IFN-γ诱导12 h后,3种分子的百分率分别为(67.4±5.2)%、(95.9±3.5)%和(9.7±2.0)%;IL-4诱导RAW264.7细胞M2极化,25μg/L IL-4诱导12 h后,3种分子的百分率分别为(39.1±4.4)%、(95.9±3.3)%和(23.8±4.6)%。对照组、IFN-γ(50μg/L)和IL-4(25μg/L)诱导组细胞ROS相对含量分别为(34.5±4.0)%、(66.2±5.8)%和(44.9±5.5)%。结论极化是巨噬细胞活化和功能转变的过程,伴随其M1和M2极化,细胞内ROS均增加。

流式细胞术分析阿霉素抑制白血病细胞的效应

目的观察不同浓度阿霉素对小鼠T淋巴细胞白血病YAC-1细胞增殖及凋亡的影响,探讨给药后阿霉素在白血病细胞中相对含量变化。方法培养YAC-1细胞,加入分别加入不同浓度(0.3125、0.625、1.25、2.5 h和5μmol/L)的阿霉素,继续培养24 h,显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡和阿霉素红色荧光,红色荧光强度可指示细胞内药物含量。不同浓度阿霉素处理细胞72 h,台盼蓝染色法计数细胞并计算细胞增殖抑制率。结果高浓度阿霉素(2.5和5μmol/L)导致细胞肿胀、胞浆内空泡增加;阿霉素以浓度依赖的方式抑制YAC-1细胞增殖;凋亡及坏死百分率以及细胞内阿霉素含量呈现剂量依赖性增加。结论 YAC-1细胞对阿霉素敏感,采用流式细胞术可实现对细胞内药物含量和抗肿瘤效应的定量分析。

两种不正确的态度

我国即将加入WTO,和其他产业一样,我国的报业也将面临激烈竞争的局面.如何应对我国加入WTO以后的报业竞争,在这个问题上,有两种不正确的态度.一种认为"狼来了",慌了手脚,似乎我国报业末日即将来临;另一种是无动于衷,不以为然,不思进取,稳坐钓鱼台.这两种态度都不可取.正确的态度应该是,高度重视,认真应对,努力开拓.

四君子汤及单味药水溶性多糖免疫佐剂活性研究

目的探讨四君子汤及4种单味药水溶性多糖对小鼠巨噬细胞增殖、表型及吞噬功能影响。方法水提醇沉法提取四君子汤水溶性粗多糖,采用滤膜离心法将多糖按分子量(高、中、低)分为3段(分子量分别为>100 k Da、30~100 k Da和<30 k Da);相同方法制备组成四君子汤4味单药(人参、白术、茯苓和炙甘草)多糖;用不同多糖(100 mg/L)处理小鼠巨噬细胞(RAW264.7)24 h,流式细胞术分析细胞周期和活性氧(ROS)含量;检测巨噬细胞对荧光微球的吞噬能力;通过流式细胞术检测细胞膜CD40、CD86和CD284(TLR4)表达,分析不同多糖对细胞分化的影响。结果中、低分子量四君子汤多糖及单味药人参和炙甘草多糖活化巨吞噬细胞的效应较强,可促进细胞增殖,增加细胞S期和G2M期细胞百分率;四君子汤、人参和炙甘草中等分子量多糖组小鼠巨噬细胞CD40阳性细胞百分率[分别为、(86.30±3.72)%、(87.19±2.76)%、(85.48±4.63)%]明显高于对照组(76.99±3.28)%;CD86阳性细胞百分率[分别为(65.60±2.35)%、(65.72±2.35)%、(65.72±2.70)%]高于对照组(60.64±2.25)%,而CD284表达量[分别为(7.46±0.46)、(6.82±0.16)、(7.54±0.28)]高于对照组(6.24±0.74)。结论四君子汤、人参和炙甘草中等分子量多糖可上调小鼠巨噬细胞CD40、CD86和CD284表达,促进巨噬细胞极化;中、低分子量多糖具有活化巨噬细胞效应。