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利用靶拟态合成和Gateway技术构建水稻miR164c沉默突变体
被引量:
1
1
作者
吴多
周艳
+3 位作者
宋傲群
刘浏
史筱靓
姜孝成
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2016年第1期24-29,共6页
以水稻基因组DNA为模板,PCR扩增得到与miR399互补的Os MIM399后,改造成与miR164c互补的靶拟态序列Os MIM164c,经测序分析后连入p GWC载体,获得入门载体p GWC-Os MIM164c;利用Gateway技术,将入门载体p GWC-Os MIM164c经LR反应连接到植物...
以水稻基因组DNA为模板,PCR扩增得到与miR399互补的Os MIM399后,改造成与miR164c互补的靶拟态序列Os MIM164c,经测序分析后连入p GWC载体,获得入门载体p GWC-Os MIM164c;利用Gateway技术,将入门载体p GWC-Os MIM164c经LR反应连接到植物表达载体GCS中,获得GCS-Os MIM164c表达载体,经农杆菌介导将该表达载体导入水稻品种Kasalath的愈伤组织中,组织培养后获得再生植株并进行目的基因的PCR鉴定,Real Time PCR方法检测阳性突变体植株中miR164c的表达量.研究结果表明,miR164c在突变体植株中的表达量显著低于野生型,说明miR164c沉默突变体构建成功.
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关键词
靶拟态
GATEWAY技术
miR164c
沉默突变体
水稻
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职称材料
题名
利用靶拟态合成和Gateway技术构建水稻miR164c沉默突变体
被引量:
1
1
作者
吴多
周艳
宋傲群
刘浏
史筱靓
姜孝成
机构
湖南师范大学生命科学学院
出处
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2016年第1期24-29,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(31071487
31270348)
+1 种基金
湖南省生态学重点学科建设项目(0713)
湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目(2014-76)
文摘
以水稻基因组DNA为模板,PCR扩增得到与miR399互补的Os MIM399后,改造成与miR164c互补的靶拟态序列Os MIM164c,经测序分析后连入p GWC载体,获得入门载体p GWC-Os MIM164c;利用Gateway技术,将入门载体p GWC-Os MIM164c经LR反应连接到植物表达载体GCS中,获得GCS-Os MIM164c表达载体,经农杆菌介导将该表达载体导入水稻品种Kasalath的愈伤组织中,组织培养后获得再生植株并进行目的基因的PCR鉴定,Real Time PCR方法检测阳性突变体植株中miR164c的表达量.研究结果表明,miR164c在突变体植株中的表达量显著低于野生型,说明miR164c沉默突变体构建成功.
关键词
靶拟态
GATEWAY技术
miR164c
沉默突变体
水稻
Keywords
target mimicry
gateway technology
miR164c
silence mutant
rice
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用靶拟态合成和Gateway技术构建水稻miR164c沉默突变体
吴多
周艳
宋傲群
刘浏
史筱靓
姜孝成
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2016
1
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参考文献
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