免疫衰老及其免疫学预警指标

增龄导致胸腺萎缩,成为免疫衰老的直接原因。免疫衰老是免疫系统全方位多系统的并由基因严格控制的循序渐进的自然过程,在这一过程中,免疫系统发生了许多明显的变化,细胞免疫、体液免疫以及天然免疫均有不同程度的改变。免疫学预警指标(immunologicalriskphenotypes,IRP),不仅可以评价机体的免疫状态,而且可以提前预知疾病的发生,为免疫干预提供客观数据。

蛋白芯片技术对8种自身抗体的检测及其评价

目的 研究蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性及特异性,探讨其对自身免疫性疾病的鉴别诊断价值,并对其方法学进行评估。方法 用胶体金标法、间接免疫荧光法及蛋白芯片法检测抗 ds- DNA;用免疫印迹法、蛋白芯片法检测抗Sm 、抗u1RNP 、抗SSA、抗SSB 、抗Rib- P、抗 Jo -1及抗 Scl- 70 7 种自身抗体,对检测结果进行统计学分析。结果 抗dsDNA抗体检测,蛋白芯片法优于胶体金标法 (P<0.01);皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)组 Jo -1 抗体(P<0.01)、混合性结缔组织病(MCTD)组u1RNP抗体(P<0.01)、硬皮病(PSS)组 Scl- 70 抗体(P<0.05),蛋白芯片法与免疫印迹法检测结果存在显著性差异;在 DM/PM组、PSS组、MCTD组,蛋白芯片法与免疫印迹法对自身免疫性疾病的鉴别诊断有显著性差别(P<0.05)。4种方法的总体敏感性依次为蛋白芯片法、免疫印迹法、间接免疫荧光法、胶体金标法。结论 蛋白芯片法检测项目多、简便快速、敏感性好、特异性强、分析客观,值得推广使用。

病毒性肝炎患者血清总胆汁酸检测的临床意义

用胆汁酸酶法检测172例肝炎患者血清总胆汁酸TBA，并同时测ALT，结果提示血清TBA测定可作为肝脏慢性损伤的指标之一．

系统性红斑狼疮患者外周血共刺激分子CD28/B7家族mRNA的表达及意义

目的研究共刺激分子CD28/B7家族(CD28、CTLA-4、CD80、CD86)mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达,探讨其在SLE发病机制中的作用。方法选择44例SLE患者作为病例组、101例健康体检人群作为健康对照组,提取外周血单个核细胞,采用Taqman探针实时荧光定量PCR方法检测CD28、CTLA-4、CD80、CD86 mRNA的表达。结果与健康对照组相比,病例组CD28、CD80、CD86表达均明显下降(P<0.01),CTLA-4表达均有所下调,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CD28/B7家族共刺激分子的表达降低可能导致SLE患者免疫功能降低。

几种常见肝损害患者血清总胆汁酸检测的临床意义

几种常见肝损害患者血清总胆汁酸检测的临床意义苏州医学院附属一院检验科史进方苏州医学院附属一院传染科赵卫峰总胆汁酸（ｔｏｔａｌｂｉｌｅａｃｉｄ，ＴＢＡ）是胆固醇在肝内分解及肠肝循环中的一组代谢产物。胆汁酸由肝脏分泌到胆汁中并随胆汁排入肠腔，促进脂肪的消...

血清超敏C反应蛋白和前白蛋白在老年COPD患者中的变化

目的探讨血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、前清蛋白(PA)水平在老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者、老年慢性阻塞性肺疾病急性发作期(AECOPD)患者中的变化及与预后的关系。方法分别检测健康老年组(年龄≥60岁)、老年COPD稳定期组、老年AECOPD死亡组、老年AECOPD存活组患者血清hs-CRP、PA水平的变化,将检测结果进行组间对照研究。结果老年AECOPD组、老年COPD稳定期组hs-CRP均明显高于老年健康组(P<0.05);老年AECOPD组hs-CRP明显高于老年COPD稳定期组(P<0.05);老年AECOPD死亡组hs-CRP明显高于老年AECOPD存活组(P<0.05)。而PA水平与hs-CRP呈负相关,在各组间比较也均具有统计学差异。结论 hs-CRP及PA可能参与老年COPD的发病过程,并在AECOPD发生、发展中起重要作用,hs-CRP、PA可作为评估AECOPD病情及预后的指标。

血小板聚集功能的新检测方法和仪器的性能评价及临床应用

本研究旨在评价对血小板聚集功能检测的新方法及仪器的性能,并建立其参考区间,探讨其临床应用价值。按照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的仪器性能验证标准和美国《临床实验室改进修正法案-88》(Clinical Laboratory Improvement Amendment 88,CLIA’88法案)制定的评价标准,对PL-11血小板分析仪进行了分析性能评估。用PL-11血小板分析仪测试健康志愿者柠檬酸钠静脉抗凝血的聚集功能,并对测定结果进行统计分析,建立PL-11血小板分析仪本实验室的参考区间。同时收集本院神经内科急性脑梗死(ACI)患者服用氯吡格雷7 d前后血小板最大聚集率(MAR)的变化来探讨PL-11血小板分析仪的临床诊断意义。结果表明,各参数皆符合CLIA'88法案的要求。测得PLR-06、PLR-07、PLR-09、PLR-10血小板诱聚剂诱导的247名健康正常人血小板MAR分别为58.8±10.1(﹪)、61.2±11.8(﹪)、51±10.2(﹪)、53.1±9.2(﹪)。ACI患者MAR在服用氯吡格雷后明显降低。结论:PL-11血小板分析仪检测结果准确可靠,是一种较理想的适用于血栓病早期预警和诊断的新型血小板聚集功能检测仪,值得推广应用。

替比夫定治疗慢性乙型肝炎患者乙肝标志物动态联检及其意义

目的实验观察替比夫定治疗慢性乙型肝炎(以下简称乙肝)的疗效。方法将83例慢性乙肝患者分成HBeAg阴性组(40例)和HBeAg阳性组(43例),均首次给予替比夫定抗病毒治疗48周,于治疗0、4、12、24、48周时联检HBV DNA、ALT水平、乙肝两对半,分析上述时间点两组患者HBV DNA转阴率、ALT复常率、e抗原转阴率及血清转换率(又称血清乙肝标志物转换率)。结果 HBeAg阴性组治疗4、12、24、48周时HBV DNA转阴率分别为25.00%、47.50%、77.50%和87.50%;ALT的复常率分别为5.00%、55.00%、80.00%和97.50%;HBeAg阳性组治疗4、12、24、48周时的HBV DNA转阴率分别为2.33%、16.28%、48.84%和67.44%;ALT的复常率分别为2.33%、51.16%、79.07%和93.02%;e抗原转阴率分别为0、16.28%、32.56%和48.84%;血清学转换率分别为0、11.63%、18.60%和34.88%。结论替比夫定可明显抑制HBV DNA的复制,促使ALT回复正常,近期疗效好,对e抗原阴性的初治患者HBV DNA的阴转率更高。

可溶性B7-H4在食管癌患者血清中的表达分析

目的分析评价血清中可溶性B7-H4(soluble B7-H4,sB7-H4)在食管癌患者血清中的表达及其诊断价值。方法采用ELLISA法检测分析46例食管癌患者和35例健康对照者血清中sB7-H4含量,利用受试者工作特性曲线(ROC),根据曲线下面积(AUC)分析sB7-H4作为食管癌诊断标记分子的诊断价值。同时检测上述标本中CEA的含量,将两者的诊断效率进行比较。结果与健康对照相者比,食管癌患者血清中sB7-H4显著升高(P<0.001),其在食管癌诊断中的灵敏度(93%)和准确性(87%)均高于CEA。结论sB7-H4是一个有临床应用前景的食管癌诊断血清标记分子。

脑梗死患者BDNF水平变化及临床意义

目的评估血清脑源性神经营养因子(BDNF)在脑梗死患者中的水平变化及临床意义。方法收集96例脑梗死患者及40例健康体检者(健康对照组)的外周血标本,采用ELISA法检测血清BDNF水平,并检测其红细胞分布宽度(RDW)、血清同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、纤维蛋白原(Fbg)及D-二聚体(D-D)。结果脑梗死患者血清BDNF水平明显低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);脑梗死患者Hcy、hs-CRP、RDW、Fbg及D-D均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。BDNF、Hcy、hs-CRP、RDW、Fbg及D-D诊断脑梗死的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积分别为0.828、0.699、0.799、0.644、0.649、0.702。结论血清BDNF水平在脑梗死患者的诊断中有一定的临床意义,其诊断效能高于Hcy、hsCRP、RDW、Fbg及D-D,血清BDNF水平降低可能是脑梗死发病的危险因子之一。

microRNA在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床应用研究

目的探讨microRNA(miRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法用实时荧光定量PCR技术检测40例NSCLC患者癌组织与癌旁组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-223、miR-145、miR-126的表达变化。结果 NSCLC患者癌组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222较癌旁组织呈高表达(P<0.05),而miR-223、miR-145、miR-126呈低表达(P<0.05)。随着病情进展,miR-21、miR-222表达升高,miR-126表达下降。结论 miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-145、miR-126、miR-223在NSCLC癌组织中表达存在差异,且miR-21、miR-222和miR-126与NSCLC病情的恶化发展相关,有助于预后判断。

应用微阵列酶联免疫法检测胃癌患者肿瘤标志物

目的探讨微阵列酶联免疫法(Array-ELISA)检测肿瘤标志物对胃癌的诊断及术后疗效观察上的应用价值。方法采用Array-ELISA同时对28例胃癌术前患者、37例胃癌术后患者(其中10例复发,27例未复发)及60例正常体检者的血清进行6种肿瘤标志物检测。结果胃癌组CA199、CA125、CEA均明显高于正常对照组(P<0.05);胃癌术前组CEA水平明显高于胃癌术后组(P<0.05)。胃癌术后复发组CA199、CEA水平显著高于未复发组(P<0.05)。AFP、PSA、CA153在3组间差异无统计学意义(P>0.05)。CA199、CA125、CEA 3项联合检测,其敏感性为58.5%,特异性为90.0%,准确度为73.6%,与单项指标相比较,敏感性、准确度差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CA199、CA125、CEA 3项指标联合检测可提高胃癌检测的敏感性、准确度;CA199、CEA水平对胃癌术后复发的监测具有一定的参考价值。Array-ELISA检测多种肿瘤标志物可应用于胃癌的诊断及术后疗效观察。

医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Spa和SCCmec分型研究

目的对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据。方法采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MRSA,进行药敏试验和同源性分析,并检测毒力基因杀白细胞毒素(pvl)基因和毒性休克综合征(tsst)基因。结果药敏结果显示,80株HA-MRSA对青霉素、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南均耐药,对环丙沙星耐药率为90.0%,对克林霉素耐药率为58.8%,对复方磺胺类耐药率为13.8%,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感。SCCmec分型结果显示,80株MRSA中SCCmecⅡ型占73.75%、SCCmecⅢ型(13.75%)、SCCmecⅤ型(12.5%)。Spa分型,28株为t2460型(35%)、9株为t002型(11%)、6株为t030型(8%)、7株为t632型(9%)、5株为t037型(6%),其他Spa型相对分散。pvl基因阳性率为7.5%(6株),tsst基因为阴性。结论 HA-MRSA SCCmec分型以Ⅱ为主,Spa分型以t2460型为主,有较高的同源性;HA-MRSA对多种药物具有较高的耐药性并且存在多重耐药。

内参基因β-actin质粒标准品的构建

为构建检测内参基因β-actin mRNA表达水平差异的标准品,以成人外周血细胞的总RNA为模板、Random 6 mers为引物反转录合成cDNA,用该cDNA为模板PCR扩增人β-actin基因相应的cDNA片段,构建PMD-18-β-actin重组质粒,鉴定测序后,用荧光定量PCR制作标准曲线。结果外周血提取的总RNA完整性良好,构建的β-actin质粒经PCR扩增后得到一186bp的清晰条带,测序结果与目的片段完全一致,且质粒的原始浓度为2.39×1013 copies/mL,倍比稀释至2.0×104copies/mL均能得到良好的标准曲线(R2=1),提示构建β-actin基因荧光定量PCR标准质粒成功。

肺癌与癌旁组织中miR-20a的定量检测及其意义

目的探讨人肺癌与癌旁组织miR-20a定量检测的临床意义。方法 real-timePCR检测31例肺癌及其对应癌旁组织中miR-20a的表达量,分析其与肺癌组织学类型、临床分期、分化程度等临床病理特征的关系。结果肺癌组织miR-20a表达量(2-△△Ct)为3.630(1.042～7.727),与对应癌旁组织相比,有显著性差异(P<0.05)。miR-20a与肺癌临床分期、分化程度、病理类型、肿块大小和淋巴结转移均无相关性(P>0.05)。结论 miR-20a在肺癌组织高表达,可能与肺癌的发生有关。

HBV慢性感染患者外周血CD8^+ T细胞程序性死亡受体-1和黏蛋白结构域-3的表达及意义

目的探讨乙型肝炎病毒慢性感染患者外周血CD8+T细胞程序性死亡受体-1(PD-1)、黏蛋白结构域-3(Tim-3)的表达及意义。方法采用流式细胞术和定量PCR等技术测定42例慢性乙型肝炎(慢性乙型肝炎组)、30例乙型肝炎后肝硬化(肝硬化组)、30例肝癌(肝癌组)患者及30例健康对照(健康对照组)外周血CD8+T细胞表面的PD-1、Tim-3的表达量,并结合乙型肝炎病毒DNA载量、乙型肝炎e抗原和谷丙转氨酶等指标作综合分析。结果 CD8+T细胞PD-1、Tim-3的表达量在各组间表达量差异有统计学意义(P<0.05)。PD-1、Tim-3慢性乙型肝炎组高于其他3组(P<0.05,P<0.01);CD8+T细胞PD-1表达量与谷丙转氨酶含量(r=0.516,P<0.01)、乙型肝炎病毒DNA载量(r=0.582,P<0.01)均呈正相关;CD8+T细胞Tim-3的表达量与乙型肝炎病毒DNA载量也呈正相关(r=0.556,P<0.01);CD8+T细胞PD-1与Tim-3的表达量也呈正相关(r=0.506,P<0.01)。结论乙型肝炎病毒感染患者外周血CD8+T细胞PD-1、Tim-3的高表达与其免疫功能紊乱和慢性化病变发生发展密切相关,为临床抗病毒治疗及疗效观察提供新思路。

老年人T细胞膜型CD28及血清中可溶性CD28的表达及其意义

分析老年人(年龄在60岁以上)外周血T细胞膜型CD28(mCD28)及血清中可溶性CD28(sCD28)的表达水平,探讨该分子在老年人免疫功能改变中的意义。分别收集肝素抗凝及不抗凝的老年人外周血,抗凝血经分离获取单个核细胞,间接免疫荧光及流式细胞仪分析,老年人T细胞mCD28的阳性表达率为男性(41.56%±11.23%)及女性(42.97%±12.02%)。与年轻人[男性(61.51%±17.45%)及女性(62.38%±16.22%)]相比,差别具有显著性(P<0.01)。酶联免疫吸附法(ELISA)检测,老年人血清中sCD28的含量为男性(1.08±0.45)及女性(0.98±0.47)ng/ml,与青年人[男性(0.55±0.16)及女性(0.52±0.13)ng/ml]相比,差别具有显著性(P<0.01)。老年人T细胞mCD28的表达水平下降,而血清中sCD28的含量升高。