一例小尾寒羊魏氏梭菌的分离鉴定

本实验从一例被魏氏梭菌感染的小尾寒羊体内分离纯化得到的致病菌,经生化试验、动物致病性试验、微生物学诊断及分子生物学试验,来证明该致病菌为C型产气荚膜梭菌。并通过药敏试验筛选出对梭菌有良好治疗效果的药物。本试验的结果为今后小尾寒羊感染产气荚膜梭菌的预防及诊断提供了一定的科学依据。

一株牛源黄腐短杆菌的分离鉴定

从犊牛腐烂的牛蹄上分离病原菌,通过菌株培养、BD phoenix^(TM) 100生化鉴定、致病性试验、遗传进化树分析等方法,对该菌进行鉴定.结果表明,所分离菌株16S rRNA基因序列与GenBank已经上传的黄腐短杆菌同源性达99%,并最终确定该病原菌为黄腐短杆菌(Brevibacterium luteolum),编号为LG-01.药敏试验结果显示,该病原菌对对氟苯尼考、庆大霉素、氧氟沙星等9种抗生素敏感,对卡那霉素、丁胺卡那、红霉素产生了耐药性.

犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及系统进化树分析

为犊牛腹泻病的预防提供理论依据,试验无菌采取犊牛腹泻病牛粪便,进行细菌的纯培养及动物试验筛选致病菌株,利用16S rRNA基因测序,建立病原菌系统进化树,结合致病菌O抗原检测和BD PhoenixTM 100全自动微生物鉴定及药敏系统对病原菌进行分析鉴定,最终确定该致病菌的种类并进行治疗与后期防控。结果显示,根据致病茵的O抗原单因子血清检测、 16S rRNA基因测序,构建的系统进化树以及BD PhoenixTM 100全自动微生物鉴定及药敏系统鉴定,确定该致病菌株为大肠杆菌O132型并命名为DG;药敏结果显示,该大肠杆菌对阿米卡星、亚胺培南、美洛培能、哌拉西林4种药物敏感,对庆大霉素、头孢唑肟和头孢他啶等13种药物耐药;进化树分析显示该菌与人腹泻的肠膜分离(CP024978.1)、患者粪便分离(CP024992.1)大肠杆菌的亲源性达100%。结果表明,该例犊牛腹泻是由大肠杆菌O132型导致。

一株牛源致病性蜡样芽孢杆菌的分离鉴定与部分生物学特性分析

目的分离鉴定牛源致病性蜡样芽孢杆菌,并分析其部分生物学特性。方法利用PCR方法检测猝死西门塔尔病牛各组织脏器中常见病毒感染情况,同时做涂片镜检,分离感染的细菌,通过形态学观察、生化检测、药敏试验、16SrRNA基因序列分析、毒力基因扩增、动物致病性实验等对分离菌进行鉴定及部分生物学特性分析。结果从猝死牛肝脏中分离到1株革兰阳性蜡样芽孢杆菌,将其命名为TL-19,该菌株含有entFM、nheB、hblD、nblA、nheC、nheA、hblC和cytk等毒力基因,且对小鼠具有较强的致病性,感染鼠24h后全部死亡。结论成功分离到1株牛源蜡样芽孢杆菌TL-19。该菌含有多种毒力基因,通辽市西门塔尔牛猝死与该TL-19感染有关。

1例犊牛腹泻大肠埃希菌的分离鉴定及毒力基因检测

目的对1例犊牛腹泻大肠埃希菌进行分离鉴定及毒力基因检测。方法无菌采集发病牛肝脏、脾脏、肾脏及十二指肠等脏器,制备肝脾组织切片,HE染色后观察组织病理学变化,并对分离菌株进行动物试验、生化试验、药敏试验、16S rRNA的PCR鉴定、系统进化树分析、毒力基因检测及O抗原鉴定。结果心脏、肝脏病理学组织切片有明显坏死及淋巴细胞浸润;16S rRNA基因序列与大肠埃希菌达99%以上,并将该序列命名为S(牛病料分离);检测到iroN、ompT、hlyF、Iss-F1、iutA、phoA、luxS、pfs、fimC、Stx2、tsh、iucD、cvac、Iss-F2、ompA、hlyE 16种毒力基因,生化鉴定该菌株为大肠埃希菌的置信度为99%;血清型为O79,并对小白鼠有很强的致病性。该菌株对庆大霉素、新霉素、卡那霉素、氧氟沙星高度敏感,对红霉素、丁胺卡那敏感,对诺氟沙星、青霉素不敏感;该菌基因序列(S)进化树分析显示,与人粪便分离大肠埃希菌(KJ803896.1)的亲源性达99%。结论该例犊牛腹泻由大肠埃希菌O79型导致,携带16种毒力基因。

羊源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及毒力基因检测

为了调查内蒙古通辽市某羊场发病羊死亡的原因,对疑似致病菌进行分离、鉴定及部分生物学特性研究。对病死羊进行剖检,无菌条件下采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏等组织脏器进行细菌分离培养;对分离菌进行小鼠致病性试验、细菌生化检测、16S rDNA基因扩增及同源性比对分析和药物纸片扩散法敏感性试验。结果显示,分离菌株符合肺炎克雷伯菌生化特性;16S rDNA序列与GenBank中已登录的肺炎克雷伯杆菌序列同源性为99.59%;小鼠致病性试验结果表明分离株有较强的致死性;分离株携带多种毒力基因致病性较强。药敏试验结果表明分离株对诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、多西环素等药物高度敏感,对复方新诺明、卡那霉素等中度敏感,对庆大霉素、头孢哌酮、头孢氨苄等耐药。结果表明,分离株为肺炎克雷伯菌,是该羊场发病羊死亡的致病菌。

牛源B型产气荚膜梭菌的分离鉴定与毒力基因检测

为探究内蒙古通辽市某牛场牛猝死的原因,本研究采集病死牛肠道内容物,分别进行革兰染色镜检、全自动微生物分析系统检测、16S rRNA基因扩增、毒力基因检测及系统进化树分析、动物致病性试验、半数致死量试验。结果显示,分离菌形态、生化特性符合产气荚膜梭菌的特性;16S rRNA基因序列与GenBank中已登录的产气荚膜梭菌的同源性为99%,系统进化树分析该分离菌与B型产气荚膜梭菌的亲缘性最近;3种毒力基因在该致病菌中均被检测到;分离菌对小鼠有致死性;该菌对小鼠半数致死的浓度为2.27×107CFU/mL;药敏结果显示,分离菌株对多黏菌素、庆大霉素等药物敏感,对卡那霉素等药物中度敏感,对头孢他啶、阿莫西林等药物耐药。该致病菌经鉴定,确定为B型产气荚膜梭菌,毒力基因分别为α、β2和ε毒素。

一株牛源短小芽孢杆菌的分离鉴定及抑菌活性的检测

为了分离、鉴定来源于犊牛创口的分离菌,并对其抑菌作用进行检测和评估,试验采用细菌分离培养、染色镜检、动物试验、药敏试验、生化鉴定等方法对所分离的菌株进行综合性鉴定,同时对分离菌株进行16S rRNA测序,并建立系统进化树,分析分离菌株亲缘关系。通过琼脂扩散法,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌为指示菌种,检测所分离菌株对它们的抑菌作用。结果表明:分离培养得到1株革兰氏阳性杆菌并有芽孢,命名为LG-1。LG-1致病性较弱;仅对头孢噻肟耐药,对其余药物敏感或中度敏感;LG-1 16S rRNA基因PCR扩增产物序列与GenBank已经上传的短小芽孢杆菌相似性达100%;对大肠杆菌、沙门氏杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑制作用,且上清液的抑菌作用相对较好。说明犊牛创口感染的菌株LG-1为短小芽孢杆菌,其有望成为抑制大肠杆菌、沙门氏杆菌、金黄色葡萄球菌的抗菌物质。

直播软件在兽医微生物学辅助教学中的应用

直播软件是近些年来被大家广泛关注及应用的网络社交软件,该软件目前发展迅速,是大家工作、学习及生活娱乐的常用软件之一。本文简述网络直播平台的优势及特点,并根据兽医微生物学目前在教学中存在的几点问题,结合构建网络直播平台。网络直播平台的教学模式在提高学生学习热情、提高学习成绩、促进师生情感交流及提高教学质量都有很大的帮助。

羊布鲁氏菌病4种血清学检测方法的临床应用比较

目的荧光偏振试验(FPA)、间接ELISA方法 (IELISA)、试管凝集试验(SAT)、虎红平板凝集试验(RBT)4种临床检测方法检测内蒙古地区羊布鲁氏菌病。方法 FPA方法、IELISA方法、SAT法及RBT法同时检测在内蒙古各地区随机采集的2 727份羊血清样本。结果 FPA、IELISA、SAT及RBT法对2 727份羊血清的阳性检出率分别为7.59%、7.45%、6.31%和6.20%。集约化养殖场的阳性检出率为4.80%,散户养殖场的9.41%,内蒙古地区依旧存在布鲁氏菌病的威胁。结论 FPA法检测羊布鲁氏菌病适合于临床诊断,在田间也能快速准确的诊断布鲁氏菌病。