原发性肝癌组织中GP73蛋白的表达

目的研究GP73在原发性肝癌组织的表达及其意义。方法采用免疫组化二步法检测26例原发性肝癌组织、23例癌旁组织、5例肝硬化肝组织和6例正常肝组织的GP73蛋白的表达。结果 GP73在肝癌组织和癌旁组织中表达阳性,阳性率明显高于肝硬化肝组织和正常肝组织(P<0.05);肝癌组织与癌旁组织的阳性率差异无统计学意义(P>0.05);肝硬化肝组织与正常肝组织的阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);肝细胞肝癌组织与胆管细胞型肝癌组织的阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GP73蛋白可作为一种有意义的肝癌组织病理标志物,为肝癌的诊断提供标志性的蛋白标记。

转录组测序分析高尔基体蛋白73参与调控肝癌的作用机制

目的基于转录组分析技术,探索高尔基体蛋白73(GP73)参与调控肝癌的作用机制。方法将肝癌细胞株Hep3B分为4组:GP73干扰组和对照组、GP73过表达组和对照组,采用转录组测序技术检测4组样本mRNA的表达。根据测序数据筛选差异表达基因,通过GO功能分析和KEGG富集分析差异表达基因。Western Blot实验验证信号通路相关蛋白的表达。符合正态分布的计量资料2组间比较采用t检验。结果通过分析Hep3B细胞干扰和过表达GP73后的差异表达基因,GO分析结果揭示了586个生物过程,GP73主要参与了细胞过程、单个组织的过程、生物调节等功能。KEGG分析表明GP73主要参与了PI3K-AKT、细胞因子/细胞因子受体相互作用、TNF、JAK-STAT等与肝癌密切相关的信号通路。Western Blot验证PI3K-AKT信号通路中的3个蛋白PI3K、p-AKT和AKT,干扰组和过表达组的蛋白PI3K、p-AKT和对照组比较均有显著差异(P值均<0.05)。结论通过转录组测序和生物信息分析筛选到GP73主要参与调控肝癌的信号通路,为阐明GP73对肝癌的作用机制提供了新的思路。

高尔基体糖蛋白73在原发性肝癌中的表达及意义

目的:探讨血清高尔基体糖蛋白73(GP73)在原发性肝癌患者中的临床应用价值。方法:收集肝癌实验组患者53例、肝病对照组患者88例、肝癌复发监测组患者8例、肝癌疗效观察组13例和健康对照组20例血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测法测定血清GP73的浓度,7600生化分析仪测定血清谷丙转氨酶(ALT)、直接胆红素(DBIL)、总胆汗酸(TBA)的水平。结果:肝癌实验组血清GP73水平高于肝病对照组及健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);血清GP73水平分别与ALT、DBIL、TBA水平高度相关,差异具有统计学意义(P<0.05);血清GP73水平与门脉癌栓的发生相关,差异具有统计学意义(P<0.05);肝癌疗效观察组有3例血清GP73浓度随着有效治疗下降;肝癌复发监测组8例GP73随着肿瘤复发而上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:血清GP73可作为反映原发性肝癌患者肝损伤的血清指标,对原发性肝癌的辅助诊断、疗效观察、预后判断、复发监测具有临床意义。

血清GP73联合AFP、CEA、CA199、GGT检测在PHC早期筛查的应用价值

目的探讨血清高尔基体糖蛋白73(GP73)联合甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)对早期筛查原发性肝癌的临床应用价值。方法收集肝癌实验组患者53例、其他恶性肿瘤对照组患者46例和健康人对照组20例血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测法测定血清GP73浓度;化学发光免疫分析仪测定血清AFP、CEA、CA199水平;7600生化分析仪测定血清GGT水平。结果肝癌实验组患者血清GP73水平显著高于其他恶性肿瘤对照组和健康对照组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,GP73诊断肝癌的灵敏度(86.8%)明显优于AFP(54.7%)(P<0.01),而特异性较AFP差(P<0.01)。在24例血清AFP呈低浓度的原发性肝癌患者中,血清GP73对肝癌的阳性检出率为75.0%,远高于AFP(P<0.01)。血清GP73联合AFP、CEA、CA199、GGT检测可显著提高肝癌诊断灵敏度,达98.1%。结论血清GP73和AFP、CEA、CA199、GGT联合检测可显著提高肝癌的检出率,对原发性肝癌的早期筛查和诊断具有临床意义。

GP73表达调控的肝癌细胞模型的筛选和构建

目的筛选合适的细胞株构建干扰和过表达GP73的肝癌细胞模型,为进一步深入研究GP73调控肝癌的机制提供合适的细胞模型。方法挑选8株肝癌细胞:Huh-7、Hep3B、MHCCLM3、MHCC97-L、MHCC97-H、SNU-449、SNU-398、SNU-182,采用qPCR和Western Blot验证GP73的表达,根据结果确定一株肝癌细胞进行干扰和过表达GP73的研究。Transwell实验观察过表达GP73对选取的细胞株迁移、侵袭能力的影响。结果选用Hep3B细胞株进行干扰和过表达GP73,qPCR和Western Blot结果表明干扰组和过表达组的GP73表达和对照组比较均有显著差异(P<0.05);Transwell实验显示,过表达GP73能够明显促进Hep3B细胞的迁移和侵袭(P<0.05)。结论干扰和过表达GP73的Hep3B细胞模型构建成功,为GP73调控肝癌的机制研究提供了可靠的研究模型,为后续研究提供了研究基础。