溶脲脲原体与人精子共同抗原的研究

Shepard首先从非淋球菌性尿道炎患者分离到类似肺炎支原体样的微生物,因培养所形成的菌落微小被称为T株和T支原体。近年来按其能溶解尿素的特性被命名为解脲脲原体或溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum)。随着研究的深入,越来越多的证据表明该支原体对成人泌尿生殖道及对新生儿和胎儿具致病作用,并认为与某些不孕症有关。现将溶脲脲原体的一般特性、分离鉴定和致病作用做一简述。

正常妇女和下生殖道炎症及不孕症时泌尿生殖道中的溶脲脲原体

本文报道165例妇女宫颈阴道分泌物和部分不育男性精液的溶脲脲原体的分离结果。正常妇女组检出率为33％(11/33)、宫颈炎和阴道炎组为67％(39/59)、不孕症组80％(35/44)、富颈癌组24％(5/21)。不孕夫妇中,13例男性精液检查有9例溶脲脲原体阳性。经比较有炎症组和不孕症组的溶脲脲原体检出率高于正常组2倍多,差异显著(P<0.01和<0.005)。鉴于溶脲脲原体作为人泌尿生殖道中的常住菌,其微生态意义与下生殖道炎症和某些不孕症的关系值得进一步深入研究。

盆腔炎感染的相关因素

盆腔炎是育龄期妇女的常见病和多发病,常见的病原体有细菌、念珠菌、解脲脲原体、沙眼衣原体等。结合临床检测及文献报道,发现年轻女性盆腔炎解脲脲原体感染率较高,是盆腔炎的高发人群。解脲脲原体感染患者合并其他病原微生物感染的情况相当严重。对患者进行全面系统的病原生物检测,对于预防和有效治疗盆腔炎感染十分重要。

生殖道感染与不育

不育影响了许多已婚夫妇的正常生活。由微生物引起的生殖道感染常是不育的重要因素。结核等全身性疾病引起不育的比例不大。多数泌尿生殖道感染引起不育属性传播性疾病。如淋菌、沙眼衣原体和支原体等的生殖道感染是不育的重要原因。主要讨论这些微生物的生殖道感染及致不育的机理。

大蒜提取物与大蒜素抗深部真菌的实验研究

应用微量稀释法,以大蒜提取物在体外对60株深部真菌测定了50％最小抑制浓度(MIC_(30))、90％最小抑制浓度(MIC,0)、50％最小杀真菌浓度(MFC_(50))和90％最小杀真菌浓度(MFC_(?))。体外对白色念珠菌的时间-杀菌动力学表明大蒜提取物主要影响真菌生长的迟缓期。经比较合成的大蒜素抗深都真菌的作用更强于大蒜提取物,但是全血细胞韶迅速降低两者的抗真菌活性。

革兰染色的现况和进展

本文对经典的革兰染色、革兰染色的自动染色仪、自动染色鉴别直读仪和革兰染色智能化与环保节水作一综述和展望。革兰染色（Gramstain）是1884年由丹麦医师ChristainGram创立，染色将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌两大类，在细菌学的形态鉴定、分类和用药选择等方面发挥了重要的作用。

PCR测定沙门氏菌、霍乱弧菌和副溶血弧菌的研究

从沙门氏菌鞭毛索(agIA)基因序列、副溶血弧菌耐热溶血素(TDH)基因序列和霍乱弧菌肠毒索(CT)基因序列中分别选择并合成一对引物,其PCR扩增产物为264Bp、293bp和292hp。对这三种菌的标准株、临床株及无关菌株的PCR测定及酶切鉴定,均显示良好的特异性。经过对150份海产品进行上述三种致病菌携带率的检测,结果表明PCR方法比常规微生物方法检测阳性率提高了2～10倍,具有快速、简便、特异和灵敏等优点。

一种新的选择鉴别幽门弯曲菌(CP)培养基

新改良的CP选择鉴别培养基系在国内常用的选择性CP培养基的基础上加入2、3、5氯化三苯四氮唑(TTC),对CP的分离不但有选择作用,而且有鉴别作用。CP在新培养基上菌落呈现金黄色伴有金属光泽。该培养基对分离和鉴定CP方便易行,有利于临床实践推广应用。

溶脲脲原体12个血清型标准株与6个地方分离株主要蛋白组份的分析

经SDS—PAGE和薄层扫描分析,18株溶脲脲原体有从分子量19—175KD 20多条蛋白区带。主要蛋白组份分布在32—140KD范围之间。其中32、52和94KD蛋白组份各株间差别较大,而其余主要蛋白组份各株间较类似。按蛋白组份的不同可将溶脲脲原体分为A、B两群。^群包括2、5、7、9、10、11、12血清型标准株和U_C、U_D、U_E、U_F地方分离株。B群包括1、3、6、13、14和U_A、U_B株。仅用SDS—PAGE方法分析溶脲脲原体蛋白组份不能区别菌株间的血清型。

人型支原体的分离培养和生长特性的研究

目的研究人型支原体(Mh)的生长曲线、菌落形态演变等生物学特性及临床分离方法。方法取临床妇科阴道标本58例,同时接种液体培养基与固体培养基。在固体培养基上挑单菌落放入液体培养基进行纯化。选一株纯化的Mh接种于液体培养基,每隔4 h看颜色变化测pH值,并取10μL液体滴种在固体培养基上,计数菌落得出生长曲线。对不同生长时间的菌落拍照。从生长曲线得知对数生长期,并可在此期间进行保种。结果妇科阴道标本临床分离的Mh阳性率为8.62%;明确了在固体培养基上Mh菌落的生长演变过程;得到了Mh特有的生长曲线,并由此推出Mh在液体中最大生长数量及其时间、繁殖一代所需的时间和对数生长期及液体生化反应的pH值颜色改变规律。结论Mh的分离诊断,应该以固体培养基为基础,显微镜下看到典型的Mh特征性“油煎蛋”菌落为准。在液体培养基中Mh的传代以及保种在40 h左右,即1/2对数生长期最好。

解脲脲原体菌落形态异质性的初步研究

目的:探讨解脲脲原体菌落形态学特征以及形态异质性和疾病的关系。方法:259例女性泌尿生殖道标本分别接种于固体培养基和液体培养基,观测菌落,同时检测细菌性阴道病。结果:解脲脲原体固体培养基和液体培养基分离率无差异。解脲脲原体菌落可分为4种形态,典型海胆型,油煎蛋型,空泡型,微小型。解脲脲原体感染与细菌性阴道炎有相关性,不同菌落形态的解脲脲原体致病性有差异。固体培养基可观测到大小不同的人型支原体。结论:解脲脲原体菌落形态有异质性,且与细菌性阴道炎致病性有关。

双抗体夹心ELISA检测肺炎支原体抗原方法的建立

目的 建立检测肺炎支原体(MP)抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),并探讨其临床应用的可行性。方法 采用不同株MP单抗,用双抗体夹心ELISA检测MP抗原,优化该方法检测MP抗原的最佳实验条件。对MP标准株及147份临床标本进行测定,观察双抗体夹心ELISA的敏感性和特异性及该方法与聚合酶链反应(PCR)检测的符合率。结果 包被单抗量为20μg/ml,酶标记单抗1∶200稀释时,阳性对照与阴性对照吸光度之比(P/N值)最大,检测MP抗原敏感度达2μg/ml,和其他支原体没有交叉反应; 147份临床标本PCR检测阳性率13. 6% (20 /147),双抗体夹心ELISA检测阳性率12. 2% ( 18 /147 ),两者符合率达95. 9%。结论 建立的双抗体夹心ELISA检测MP抗原具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点。

五环三萜类柴胡皂苷单体抗耐MRSA活性研究

目的对柴胡进行有效成分分离,并对其抗菌作用明确的成分进行结构测定,确定其分子结构,得到结构明确的五环三萜类活性单体Bp3(saikosaponines,Bp3)。进一步深入研究该单体的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)作用及其与头孢唑林的协同作用。方法参照美国临床实验室标准化委员会(national committee for clinical laboratory standard,NCCLS)标准,测定Bp3对20株MRSA的MIC及其与头孢唑林的协同作用。结果Bp3对MRSA的抑菌作用优于头孢唑林且联合用药时显著减少了每一药物的最低抑菌浓度值(minimal inhibitory concentration,MIC),在20株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌均表现为协同或相加作用方式。结论结构明确的五环三萜类单体Bp3对MRSA有一定的抑制作用,且与头孢唑林有协同或相加作用。

解脲支原体感染与男性不育

用高度纯化的人解脲支原体免疫家兔,获得兔抗人解脲支原体抗血清,以此抗血清(一抗)及羊抗兔 IgG 荧光抗体(二抗),分别处理20例正常生育男性和20例精液解脲支原体培养阳性的不明原因不育男性的精子,并在荧光显微镜下观察。结果显示:在不育男性部分精子的头部和(或)尾部有特异性的较强荧光结合,表明有解脲支原体吸附,并有大量畸形精子,多数为卷尾畸形。此外,用比浊法检测了正常生育男性与上述不育男性精液中快速运动相精子的百分含量(FRM)及平均速度(VRM)。不育男性组比生育组的 FRM 及 VRM 都显著降低(分别为 P<0.01和 P<0.001)。本研究首次用特异性方法证实解脲支原体吸附于不育男性精子表面,提示解脲支原体感染可能通过影响精子的形态、精子的运动和精卵识别过程而导致男性不育。

性病门诊病人支原体检测及耐药分析

目的:了解我院性病门诊病人的支原体感染情况并分析对7种抗生素的耐药情况。方法:对910例门诊病人进行解脲支原体(Uu)和人型支原体(Mh)培养,并对阳性标本进行大观霉素、司帕沙星、米诺环素、阿奇霉素、交沙霉素、环丙沙星和多西环素药敏试验。结果:910例病人中支原体总阳性率为47.9%(436/910)。其中Uu感染41.8%(380/910),明显高于Mh感染(1.2%,11/910)和Uu+Mh混合感染(4.9%,45/910)。Uu对7种药物敏感性最高的为大观霉素(79.4%,302/380),其次是米诺环素(78.2%,297/380),耐药性最高的是交沙霉素(41.3%,157/380),其次是阿奇霉素(38.7%,147/380)。结论:我院性病门诊病人中支原体感染率为47.9%,以Uu为主。支原体对交沙霉素和阿奇霉素有较高的耐药性,特别是Uu+Mh的混合感染,对抗生素的耐药性较多。临床上做支原体培养和药敏试验对指导临床合理用药很重要。

围生期生殖道支原体感染与胎儿窘迫关系的前瞻性研究

目的 探讨围生期生殖道支原体感染与胎儿窘迫的关系。方法 随机入选 739名孕妇 ,采用支原体培养法检测围产期阴道解脲支原体和人型支原体 ,根据检测结果分为支原体阳性组和支原体阴性组 ,随访观察两组胎儿窘迫发生率。结果 支原体阳性组 2 47例 ,支原体阴性组 492例 ,前者胎儿窘迫发生率 5 .3 % (13/2 47) ,后者 2 .0 % (10 /4 92 ) ,前者显著高于后者 (P <0 .0 5 ) ;队列研究显示孕期支原体感染显著增加胎儿窘迫危险性 (RR2 .5 9,95 %CI1.15～ 5 .82 ,P<0 .0 5 )。

围生期生殖道支原体感染与胎膜早破关系的研究

目的 探讨围生期生殖道支原体感染与胎膜早破的关系。方法 随机入选的 12 40例孕妇 ,采用支原体培养法检测围生期阴道解脲支原体 (Uu)和人型支原体 (Mh) ,并根据检测结果分为支原体阳性组和支原体阴性组 ,随访观察两组胎膜早破发生率。结果 研究显示支原体阳性组 5 5 0例 ,胎膜早破发生率 4.4% (2 4/5 5 0 ) ,阴性组 6 90例 ,胎膜早破发生率 3.2 % (2 2 / 6 90 ) ,两组胎膜早破发生率差异无显著性 ;进一步分组研究发现Mh(+)Uu(+)亚组胎膜早破发生率高于Uu(- )Mh(- )、Uu(+)Mh(- )及Mh(+)Uu(- )组。

解脲脲原体阴道炎动物模型建立及强力霉素治疗疗效观察

目的建立由解脲脲原体感染引起的小鼠阴道炎模型并了解强力霉素对感染小鼠的疗效。方法昆明小鼠60只。随机分5组。采用注射外源性雌激素,阴道接种解脲脲原体标准菌株的方法建立小鼠阴道炎模型。模型建立成功后,治疗组进行一疗程强力霉素治疗(2mg/kg)。结果小鼠全部感染成功。感染后小鼠有非淋菌性尿道炎类似的临床表现。解脲脲原体感染可逆行波及其他器官。用药后治疗组和感染对照组感染率有差异(P<0.05)。治疗组小鼠仍有部分未消除解脲脲原体感染。结论建立了解脲脲原体感染小鼠致生殖道炎症的模型;单一疗程的强力霉素治疗不能完全清除解脲脲原体。

孕妇支原体感染与低出生体重儿的红霉素干预实验

目的 :探索孕妇生殖道支原体感染与低出生体重儿的病因学关系。方法 :经产前检查支原体阳性孕妇 488例 ,按实验分组方法随机分成红霉素干预组和非干预组 ,比较两组间孕妇支原体感染阴转率、母婴传播率和低出生体重儿的发生率。结果 :红霉素干预组解脲脲原体 (Ureaplasma urealyticum ,Uu)的阴转率和母婴传播率低于非干预组 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,而人型支原体 (Mycoplasm a hominis,Mh)的阴转率及母婴传播率在组间无显著性差异 (P>0 .0 5 )。干预组中低出生体重儿的发生率显著低于非干预组 (P<0 .0 5 )。结论 :红霉素干预措施能有效地降低孕妇解脲脲原体感染 ,阻断其母婴传播 。

幽门螺杆菌抗生素耐药率分析

目的分析本院3年中幽门螺杆茵(helicobacter pylori,Hp)抗生素耐药率,为临床根除Hp时抗生素的选择提供参考。方法选取2000年9月-2002年4月在我院行胃镜检查后活检组织作Hp培养的患者共728例,对306例活检组织Hp培养阳性者行5种抗生素(甲硝唑、阿莫西林、头孢三嗪、大观霉和呋喃唑酮)的敏感试验。结果6种抗生素的耐药率逐年上升(P<0.05)。甲硝唑的耐药率显著高于其他4种抗生素(32％,P<0.01),其余4种抗生素耐药率相比差异无显著性(P>0.05)。性别与不同年龄组的耐药率比较均无明显差异(P>0.05)。结论 随着根治Hp时抗生素的应用,Hp的抗生素耐药率逐年上升;甲硝唑的耐药率最高;性别和年龄与抗生素耐药之间没有相关性。