CD47重组质粒及其过表达重组大鼠骨髓间充质干细胞的构建及鉴定

目的:构建CD47重组质粒并将其转染至大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs),建立稳定过表达CD47的BMMSCs,为研究干细胞治疗中逃避免疫监视的有关机制提供实验模型。方法:构建过表达CD47基因的质粒载体,转染至分离培养的大鼠BMMSCs,RT-PCR、Western blot分别检测干细胞CD47 mRNA、蛋白水平的表达,并完成功能检测。结果:成功构建了pYr-ads-4-ratCD47质粒,经酶切、测序结果表明pYr-ads-4-ratCD47重组质粒构建成功;RT-PCR、Western blot显示实验组转染至大鼠BMMSCs后CD47的mRNA和蛋白水平表达明显增高(P<0.05);功能检测提示过表达CD47分子的BMMSCs成功逃避巨噬细胞吞噬。结论:经质粒介导可成功将大鼠CD47目的基因片段转染至大鼠BMMSCs,并能够在体外有效的过表达。

急性心肌梗死后促进骨髓间充质干细胞有效归巢研究

目的就促进骨髓间充质干细胞归巢的各种方法如细胞因子、中成药及双向抗体的研究现状做一综述,为经远心途径增效骨髓间充质干细胞归巢的研究提供理论依据。方法以'myocardial infarction,stem cel s,home'为英文检索词;以'心肌梗死,干细胞,归巢'为中文检索词,检索万方、Pubmed数据库和维普数据库2002年1月辕2013年1月相关文献。纳入与心肌梗死、经远心途径、骨髓间充质干细胞及细胞因子、中成药、双向抗体调节骨髓间充质干细胞归巢的相关文献。结果经远心途径调节骨髓间充质干细胞归巢提供了有效可行的治疗方式,通过细胞因子、中成药及双向抗体等联合间充质干细胞移植,经静脉、皮下、体腔、体外预处理等途径以相对安全、简便的方式提高见充值干细胞归巢率。结论可以避免经冠脉或心肌穿刺带来的风险。但该疗法的还有很多问题尚待解决,尚待深入研究。

microRNA-145通过靶向抑制CREB调节内皮细胞增殖和血管新生

目的构建微小RNA 145(microRNA-145,miR-145)过表达及干扰腺病毒载体,并探究miR-145对内皮细胞增殖和血管新生的影响及机制。方法利用T4连接酶分别将miR-145过表达和干扰目的序列插入到pHBAd-EF1-MCS-GFP和pHBAd-U6-CMV-GFP载体,构建出重组miR-145过表达和干扰腺病毒质粒。将重组miR-145过表达和干扰腺病毒质粒分别与骨架质粒pHBAd-BHG共转染人胚肾HEK293细胞进行重组腺病毒的包装与扩增,TCID_(50)法检测病毒感染滴度。miRNA qRT-PCR检测感染腺病毒的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中miR-145的表达水平,MTT及Western blot检测PCNA蛋白表达量以检测细胞增殖情况。小管形成实验检测血管生成能力的变化。采用miRanda、miRwalk等生物信息学方法预测miR-145的靶基因及与环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding protein,CREB)3'UTR的结合位点。Western blot检测CREB及其调控的VEGF的表达情况,双荧光素酶实验验证miR-145与目的基因CREB 3'UTR相互作用。结果基因测序提示miR-145过表达及干扰质粒序列与目标序列一致,qRT-PCR结果亦提示病毒构建成功。细胞增殖和小管形成实验结果显示,与转染空载体组相比,过表达miR-145使570 nm处光密度值明显降低(P<0.05),亦显著抑制了HUVECs PCNA蛋白表达和小管样结构的形成(P<0.01),而干扰miR-145表达则使光密度值增高(P<0.01),亦促进HUVECs PCNA蛋白表达和小管样结构的形成(P<0.05)。同时,过表达miR-145可显著抑制CREB和VEGF蛋白表达(P<0.05),而干扰miR-145表达则明显促进CREB和VEGF蛋白上调(P<0.05)。双荧光素酶实验亦证实了miR-145与CREB 3'UTR的直接结合作用。结论 miR-145调节内皮细胞增殖和血管新生,其机制与miR-145直接靶向抑制CREB/VEGF信号有关。

基于VirtualLab Fusion的迈克尔逊干涉仪仿真教学与拓展

众多教学者使用各种仿真实验方式对迈克尔逊干涉仪进行了教学辅助,如ZEMAX和Matlab软件。Matlab软件并非专门的光学仿真软件,缺乏直观性,ZEMAX主要仿真手段是几何光线的追迹,忽略了衍射和矢量等波动光学效应。本文采用了专门的物理光学仿真软件进行了迈克尔逊干涉仪仿真研究,分析了条纹特性,并进行了涡旋光干涉研究。验证了VirtualLab Fusion对于物理光学教学辅助的有效性。

变“任务驱动”为“问题驱动”

任务驱动教学法是当前信息技术课堂教学中较为广泛被采用的一种教学法,教学设计围绕任务而展开,课堂教学也围绕任务来进行,然而,在长期的信息技术教学中,任务突显了其固有的一些不足,笔者尝试将"任务"变为"问题",收到了一定成效。

米多君、屈昔多巴及溴吡斯的明对体位性低血压患者的影响

目的分析数据库中相关临床数据,明确治疗体位性低血压药物疗效。方法检索万方数据库、中国知网数据库、PubMed、Embase数据库和https://clinicaltrials.gov/网站中关于口服药物治疗低血压的实验研究,使用R软件中的gemtc,rjags程序包,最后检索日期为2020年10月10日,绘制网状关系图呈现不同干预措施间直接比较的情况并分析相关数据。结果共检索到4012篇关于屈昔多巴、米多君和溴比斯的明的文章,筛选后共8个临床研究符合入选标准,共837名患者;共纳入8个临床研究,包括6个研究组,涉及3种升血压药物;屈昔多巴组、米多君10 mg组与安慰剂比较,均可升高患者立位血压,米多君10mg组与米多君2.5 mg组、米多君5 mg组、屈昔多巴组比较,可升高立位收缩压,差异有统计学意义(P<0.05);米多君10mg组卧位高血压风险高于对照组,差异有统计学意义(OR:26.00,1.80~1500.00,P<0.05),屈昔多巴与对照组发生卧位高血压的风险比较,差异无统计学意义(OR:1.30,0.25~6.70,P>0.05)。结论米多君10 mg组升高体位性低血压效果最佳,但导致的卧位风险也增加。

中学生学习技术探究

"中小学生学习技术的心理探究"是由珠海城市职业技术学院承担的教育部"十五"规划重点课题。课题旨在从心理和行为的角度探讨形成中小学生学习技术的因素。我校负责中学生学习技术方面的研究,本人参与了课题组实验和统计。本文从组建课题小组、收集中学生学习技术、实施问卷调查、数据分析、得出结论等这样的过程来分析中学生学习技术对学习成绩产生的影响,为能及时了解中学生学习技术存在的问题及防治或干预矫正提供依据。