刺槐素通过核因子κB信号通路抑制脂多糖诱导的巨噬细胞损伤

目的:探讨刺槐素(Acacetin)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠骨髓巨噬细胞(BMDMs)的抗炎作用机制。方法:CCK-8法检测各浓度刺槐素(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L)对小鼠骨髓巨噬细胞增殖的影响,筛选最佳剂量;分离培养小鼠骨髓巨噬细胞,LPS(50 ng/mL)预处理BMDMs(0 min,10 min,30 min,60 min),加入刺槐素(10μmol/L)孵育0.5 h。蛋白质印迹法检测p65、磷酸化p65(p-p65)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)的表达,激光共聚焦观察核因子κB核转位情况。结果:CCK-8结果显示,5~40μmol/L的刺槐素对小鼠骨髓巨噬细胞增殖无明显影响,结合课题组前期研究结果,选择10μmol/L刺槐素作为后续研究剂量;与空白对照组比较,LPS不同时间刺激组p-p65、p-IκBα的表达水平均显著增加,给予刺槐素治疗后,能显著降低p-核因子κB p65和p-IκBα的表达;刺槐素能抑制LPS介导的核因子κB p65核转位。结论:刺槐素的抗炎作用与抑制核因子κB信号通路有关,刺槐素可作为一种有潜力的候选抗炎药物。

刺槐素通过自噬调控ROS/NLRP3信号通路对脑缺血再灌注损伤发挥保护作用

目的基于自噬/ROS/NLRP3炎症小体信号通路,探讨刺槐素(Acacetin)对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)损伤后的小胶质细胞保护作用机制。方法培养小鼠小胶质细胞(BV2),分为正常对照组、OGD模型组和OGD+Acacetin组(10μmol)。缺氧6 h复氧24 h后采用4-甲基偶氮唑蓝(MTT)检测BV2细胞活性;乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞的死亡率;活性氧(ROS)试剂盒测定细胞内ROS水平;Western blot检测LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、beclin-1、NLRP3、caspase-1和IL-1β等蛋白的表达。结果刺槐素能增加OGD/R损伤后小胶质细胞的存活率,减少LDH的释放,降低ROS的生成,增加LC3-Ⅱ和beclin-1蛋白的表达,进一步下调NLRP3、caspase-1和IL-1β的表达。结论Acacetin能减轻OGD/R后小胶质细胞的损伤从而对脑缺血再灌注损伤发挥保护作用,其作用机制可能与抑制ROS的产生、激活自噬、抑制NLRP3炎症小体有关。

刺槐素对小鼠骨髓巨噬细胞AIM2炎症小体活化的抑制作用

目的 探讨刺槐素对脂多糖(LPS)和双链DNA模拟物poly(dA:dT)共诱导的小鼠骨髓巨噬细胞(BMDMs)黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)炎症小体活化的影响。方法 在小鼠股骨中分离并培养BMDMs,将其分为对照组、LPS组、LPS+poly(dA:dT)组和LPS+poly(dA:dT)+刺槐素组。对照组将BMDMs继续在完全培养基中培养3 h;LPS组将BMDMs在加入含50 ng/mL LPS的完全培养基中培养3 h;LPS组+poly(dA:dT)组将BMDMs在加入含50 ng/mL LPS的完全培养基中培养3 h,再加入poly(dA:dT) 10μmol/L作用0.5 h;LPS+poly(dA:dT)+刺槐素组将BMDMs在加入含50 ng/mL LPS的完全培养基中培养3 h,然后加入刺槐素10μmol/L作用0.5 h,最后加入poly(dA:dT) 10μmol/L作用0.5 h。采用Western blotting法检测细胞裂解液pro-Caspase-1、pro-白细胞介素(IL)-1β和上清液Caspase-1、IL-1β蛋白相对表达量,ELISA法检测细胞上清液IL-1β、IL-18、TNF-α蛋白表达,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞上清液LDH浓度。结果 各组细胞裂解液pro-Caspase-1、pro-IL-1β蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与对照组、LPS组比较,LPS+poly(dA:dT)组和LPS+poly(dA:dT)+刺槐素组上清液Caspase-1、IL-1β蛋白相对表达量均升高,且LPS+poly(dA:dT)组升高更明显(P均<0.05)。与对照组、LPS组比较,LPS+poly(dA:dT)组和LPS+poly(dA:dT)+刺槐素组细胞上清液IL-1β、IL-18蛋白表达均升高,且LPS+poly(dA:dT)组IL-1β升高更明显(P均<0.05)。与对照组比较,LPS组、LPS+poly(dA:dT)组和LPS+poly(dA:dT)+刺槐素组细胞上清液TNF-α蛋白表达及LDH水平均升高,且LPS+poly(dA:dT)组和LPS+poly(dA:dT)+刺槐素组升高更明显(P均<0.05)。结论 刺槐素对小鼠BMDMs的AIM2炎症小体活化具有抑制作用,能够减少细胞中Caspase-1、IL-1β蛋白表达,从而减轻炎症反应。

刺槐素的药理研究进展

刺槐素是一种天然黄酮类药物,可从多种植物中提取获得,因其广泛的药理作用,受到众多研究者的关注。越来越多的研究表明,刺槐素具有抗肿瘤、保护心脏、抗炎、保护神经等作用,在相关疾病的治疗中均具有巨大的潜力。本文通过对刺槐素多种药理作用机制的研究进展进行综述,探讨刺槐素的潜在药用价值,并阐明其具体作用机制,以期为今后的临床应用提供理论依据。

体检人群代谢综合征及其不同组分高尿酸血症流行特征研究

目的:探讨体检人群中代谢综合征(metabolic syndrome,MS)及其不同组分高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)流行特征。方法:纳入2021年6月~2023年3月在某医院健康管理中心的体检者作为研究对象。分析MS及其不同组分的HUA患病率,进一步将研究对象按性别分层,评估不同MS组分数量人群的血清尿酸水平(serum uric acid,SUA)和HUA患病率及两性中具有最高HUA患病率的MS组分组合方式;logistic回归分析不同MS组分数量人群HUA的患病风险。结果:共有66520人纳入本次研究,MS组SUA水平(t=−82.947,P<0.001)和HUA患病率(χ2=3421.632,P<0.001)显著高于非MS组。腹型肥胖、高血压、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)降低和甘油三酯(TG)增高者的SUA水平和HUA患病率显著高于正常者(P<0.001),而糖尿病患者SUA水平和HUA患病率存在性别差异,男性糖尿病患者SUA水平和HUA患病率显著低于血糖正常者,女性中这一结果相反。随MS组分数量增加,女性SUA水平和HUA患病率逐渐上升,而男性中,仅在MS1~MS4中观察到这样的趋势。男性HUA患病率最高的MS组分组合为腹型肥胖+高血压+HDL-C降低+TG增高(54.35%),女性为腹型肥胖+高血压+糖尿病+HDL-C降低+TG增高(41.46%)。Logistic回归分析显示:校正性别、年龄和民族后,女性HUA的患病风险随着MS组分数量的增加而增加,而在男性中,MS1~MS4的HUA患病风险不断上升。进一步校正体重指数、总胆固醇增高、低密度脂蛋白增高、冠心病后,结果仍然一致。结论:体检人群中MS及其各组分是HUA的危险因素,MS组分的不同组合与HUA的相关性不同,HUA的患病风险与MS异常组分数量具有相关性。

乌鲁木齐市体检人群高血压类型与其危险因素的多重对应分析

背景高血压的早发现、早诊断、早治疗及良好控制具有重要的健康和经济效益,有必要在体检人群中探讨高血压的危险因素,针对性地对高血压进行预防和控制。目的探讨乌鲁木齐市体检人群高血压类型与其危险因素之间的关系。方法选取2016年乌鲁木齐市石油新村街道和卡子湾街道社区卫生服务中心参加新疆全民健康体检的35~74岁居民6 699例为研究对象,对高血压类型与糖尿病、性别、年龄、体质指数、吸烟、饮酒之间的关系进行多重对应分析。结果多重对应分析结果显示,糖尿病、肥胖与单纯收缩期高血压(ISH)、双期高血压(SDH)关联密切;吸烟、饮酒与单纯舒张期高血压(IDH)关联密切。根据性别、年龄段进一步分层分析,男性35~44、45~54岁组,糖尿病、肥胖与ISH、SDH有关联性,吸烟、饮酒与IDH有关联性;男性55~64、65~74岁组与35~44、45~54岁组不同,未发现吸烟、饮酒与各种类型高血压的关联性;女性各年龄段糖尿病、肥胖与ISH均有关联性。结论多重对应分析在体检数据中有良好的应用,糖尿病、肥胖与ISH,35~54岁男性吸烟、饮酒与IDH的相关性值得关注。

刺槐素对Nigericin诱导小鼠骨髓巨噬细胞NLRP3炎症小体活化的影响

目的探讨刺槐素对尼日利亚菌素(Nigericin)诱导的小鼠骨髓巨噬细胞(BMDM)含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的影响。方法分离并培养小鼠BMDM细胞,将BMDM细胞随机分为空白对照组、LPS组、LPS+Nigericin组、LPS+2.5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+5μmol/L刺槐素+Nigericin组和LPS+10μmol/L刺槐素+Nigericin组。除空白对照组外,其他各组加入LPS(50 ng/mL)处理3 h,除空白对照组、LPS组外其他各组继续加入2.5、5、10μmol/L刺槐素处理0.5 h,然后加入刺激剂10μmol/L的Nigericin处理0.5 h。用Western blotting法检测裂解液中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1前体(Pro-caspase-1)、白细胞介素-1β前体(Pro-IL-1β)和上清液中caspase-1、IL-1β蛋白表达,提示NLRP3炎症小体活化情况;用ELISA法检测上清液中NLRP3炎症小体活化后炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α释放情况;用乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒检测细胞上清液LDH活性,提示NLRP3炎症小体活化后细胞死亡情况。结果各组细胞裂解液中Pro-caspase-1、Pro-IL-1β蛋白表达比较差异无统计学意义(P均>0.05);与空白对照组比较,LPS+Nigericin组上清液中caspase-1、IL-1β蛋白表达高,上清液IL-1β、IL-18、TNF-α水平及LDH活性高(P均<0.05)。与LPS+Nigericin组比较,LPS+2.5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+10μmol/L刺槐素+Nigericin组上清液caspase-1、IL-1β蛋白表达及IL-1β、TNF-α水平逐渐降低(P均<0.05);LPS+5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+10μmol/L刺槐素+Nigericin组LDH活性低(P均<0.05),LPS+2.5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+10μmol/L刺槐素+Nigericin组LDH活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论刺槐素能有效抑制Nigericin诱导的小鼠BMDM骨髓巨噬细胞NLRP3炎症小体的活化。

男男性行为人群人乳头瘤病毒16/18型感染风险的潜在类别分析

背景近年男男性行为人群(MSM)是性病发生率的高发人群,尤其是人乳头瘤病毒(HPV)16/18型感染率居高不下,而HPV感染若不有效控制会发展成性病,因此研究与MSM HPV16/18型感染高发相关的主要影响因素很重要。目的采用潜在类别分析(LCA)探讨MSM的HPV16/18型感染风险,为实施针对性的干预措施提供科学依据。方法于2016年3月-2017年8月在乌鲁木齐市采用滚雪球抽样法招募884例MSM,对其一般人口学特征、性行为特征、HPV感染相关因素进行调查,行基因分型检测HPV16型和HPV18型,并采用LCA对HPV16/18型感染风险进行分类预测。结果共纳入了性行为对象性别、性交方式、有无同性商业性性行为、有无毒品使用、有无性传播感染史、肛交使用安全套、有无同性肛交、性取向、有无包皮环切术9个研究变量。潜在类别数为3的模型Akaike信息准则(AIC)和Baysian信息准则(BIC)最低,为最佳模型。根据性行为特征、HPV感染相关因素分为HPV感染低风险组(520例)、HPV感染中风险组(290例)、HPV感染高风险组(74例),感染率分别为9.2%、14.5%、24.3%,HPV感染高风险组的感染率高于HPV感染低风险组(P<0.05)。结论 LCA能用于区分MSM的HPV16/18型感染风险。

刺槐素对鞭毛蛋白诱导的小鼠骨髓巨噬细胞NLRC4炎症小体活化的影响

目的:研究刺槐素(Acacetin)对鞭毛蛋白诱导的小鼠骨髓巨噬细胞Nod样受体家族蛋白4(the nod-like receptor family card domaincontaining protein 4,NLRC4)活化的影响。方法:将小鼠骨髓巨噬细胞分为对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+鞭毛蛋白组及LPS+Acacetin+鞭毛蛋白组,对照组加入完全培养基,LPS组用LPS(50 ng/mL)预处理3 h,LPS+鞭毛蛋白组用LPS(50 ng/mL)预处理3 h后加入鞭毛蛋白(10μmol/L)刺激0.5 h;LPS+刺槐素+鞭毛蛋白组用LPS(50 ng/mL)预处理3 h后再加入Acacetin(10μmol/L)处理0.5 h,最后加入鞭毛蛋白(10μmol/L)刺激0.5 h;采用WB检测细胞裂解液Pro-caspase-1和Pro-IL-1β的表达,上清液中caspase-1和IL-1β的蛋白表达;ELISA法检测上清液中IL-1β、IL-18和TNF-α的含量,LDH检测试剂盒检测细胞上清液中LDH的活性。结果:与对照组相比,LPS+鞭毛蛋白组细胞上清液中caspase-1、IL-1β蛋白表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05),细胞裂解液中Pro-caspase-1、Pro-IL-1β蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);与LPS+鞭毛蛋白组比较,LPS+Acacetin+鞭毛蛋白组细胞上清液caspase-1、IL-1β蛋白表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),细胞裂解液中Pro-caspase-1、Pro-IL-1β蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA结果显示,与对照组相比,LPS+鞭毛蛋白组细胞上清液中IL-1β、IL-18、TNF-α水平及LDH活性明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);与LPS+鞭毛蛋白组比较,LPS+Acacetin+鞭毛蛋白组细胞上清液IL-1β释放水平明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05),IL-18、TNF-α的水平及LDH的活性降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:刺槐素可有效抑制鞭毛蛋白诱导的小鼠骨髓巨噬细胞NLRC4炎症小体的活化,减少细胞损伤。

乌鲁木齐市男男同性性行为人群高危性行为在rush poppers使用与人乳头瘤病毒感染之间的中介效应

目的了解乌鲁木齐市男男同性性行为人群(MSM)rush poppers使用情况,分析高危性行为在rush poppers使用与人乳头瘤病毒感染之间的中介效应。方法2018年1—6月在乌鲁木齐市,通过网络、现场宣传等方式招募MSM651名,使用在线问卷收集数据,并采集肛周脱落细胞进行HPV分型检测。根据Baron和Kenny的判定标准,采用多因素logistic回归分析高危性行为(多性伴、肛交安全套使用)在rush poppers使用与HPV感染之间的中介效应。结果651名研究对象年龄为(32.0±8.0)岁,近6个月用过rush poppers174名(26.7%),近6个月性伴数≥2的MSM350名(46.9%),肛交未使用安全套者188名(28.9%),rush poppers使用者HPV感染率为60.3%(150/174)。调整年龄、婚姻状况后,rush使用与HPV的感染有关联[OR(95%CI)值为2.34(1.63~3.36),P<0.05],rush使用与近6个月性伴数有关联[OR(95%CI)值为2.72(1.89~3.93),P<0.05];调整年龄、婚姻状况、近6个月性伴数、肛交安全套的使用后,rush poppers使用与HPV的感染仍有关联[OR(95%CI)值为2.21(1.53~3.19),P<0.05];调整年龄、婚姻状况、rushpoppers使用、肛交安全套使用后,近6个月性伴数与HPV的感染仍有关联[OR(95%CI)值为1.46(1.05~2.04),P<0.05]。结论近6个月性伴数在乌鲁木齐MSM rush poppers使用和HPV感染之间存在中介效应,rushpoppers使用应成为HPV防控工作关注的重点。

基于潜类别模型的男男性行为人群HPV感染风险分类研究

目的探讨潜类别模型对确定男男性行为人群(MSM)人乳头瘤病毒(HPV)感染高危人群的意义。方法2016年3月至2017年4月在乌鲁木齐市采用滚雪球法招募MSM,通过调查问卷收集包括人口学特征、性行为特征及性传播感染史和包皮环切术的信息,采集肛管内脱落细胞并使用37型HPV检测试剂盒进行分型鉴定,用潜类别模型对其进行HPV感染风险分类,根据潜类别模型Akaike信息准则(AIC)选定潜类别数3为最优模型;基于3组潜类别人群的性行为特征、性传播感染史和包皮环切术,将其命名为:HPV感染高风险组、中风险组和低风险组。结果共招募704例MSM,HPV感染高风险组(49.3%)、中风险组(26.1%)和低风险组(24.6%),其HPV感染结局在3组间的差异有统计学意义(χ^2=8.816,P=0.012)。HPV感染高风险组中自我认知性取向为同性恋的条件概率为0.803,近6个月同性性伴数2个和3个及以上的条件概率分别为0.307和0.462,有性传播感染史者和未行包皮环切术的条件概率为0.100和0.663,都高于其他两组。结论潜类别模型确定MSMHPV感染高危人群具有可行性,该人群在MSM中占一定比例且HPV感染风险最高。

口试训练法在预防医学专业流行病学课程中的应用

目的探索在预防医学专业流行病学课程中使用口试训练法的效果。方法建立口试训练题库,2018年9月-2019年1月以新疆医科大学2013级本科预防医学专业3个班的学生为对象,将各班一半学生分到口试训练组,在流行病学教学中,对口试训练组除传统教学外,在实习课课程中增加口试训练,学期末考试结束后分析成绩,并运用质性研究方法在学生中开展定性访谈、现场记录,以类属分析法整理分析结果。结果口试训练组学生口试成绩与理论考试成绩呈相关性(r=0.41,P<0.05),口试训练组与非训练组理论考试成绩差异无统计学意义(t=-1.258,P>0.05),按照班级(1班t=-0.091,2班t=1.873,4班t=0.194)、性别(男t=1.312,女t=1.004)、民族(汉族t=1.312,少数民族t=-0.071)分层,两组理论考试成绩差异均无统计学意义(P>0.05);访谈学生大多支持口试训练法(17/18)。结论口试训练法能减少学生应试焦虑情绪,提高语言表达和沟通能力,促进学生主动学习,增强学生的综合能力、增进师生交流,在过程评价中客观性较好,值得进一步推广。

白介素6、程序性死亡因子配体在胃食管反流病中的作用

目的探讨白介素6(IL-6)、程序性死亡因子配体1(PD-L1)在胃食管反流病(GERD)发生中的作用。方法在体外培养大鼠的食管上皮细胞、CD4^(+)T细胞,并建立正常大鼠食管上皮细胞和CD4^(+)T细胞共培体系。实验组培养基依次加入鹅去氧胆酸、胰酶、盐酸溶液,使得培养基pH分别调节为4、5、6,培养12 h、24 h、48 h后分别收集下室细胞和上下室上清。对照组细胞正常培养,不予任何刺激处理。采用ELISA法、Western blot检测各细胞组中IL-6、PD-L1的表达水平。实验数据以x±s表示。总体比较采用重复测量方差分析,对于满足球形检验数据无需校正,如需校正采用Greenhouse-Geisser校正。结果随着pH浓度的增加、培养时间的延长,IL-6、PD-L1在各细胞中的表达量增高,其中IL-6、PD-L1在上皮细胞和CD4+细胞共培体系中的表达量最高(P<0.05)。结论炎症细胞因子IL-6可能促进GERD中PD-L1的表达,在GERD的发生发展中发挥重要作用。

SDET与Menza危险评分对暴露前预防用药的男男性行为者队列HIV阳转风险评价

目的探讨SDET及Menza两种危险评分对男男性行为者(MSM)艾滋病暴露前预防用药艾滋病病毒(HIV)阳转风险评价的适用性。方法通过乌鲁木齐非政府组织招募HIV阴性MSM,依其意愿分为时间驱动组、事件驱动组及空白对照组,进行口服替诺福韦24个月的干预;问卷调查获得MSM性行为特征,计算每位MSM的SDET及Menza危险评分,通过两种危险评分的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积评价其对MSM HIV阳转的预测效果;结合多因素Logistic回归分析筛选出对HIV阳转有影响的变量,将变量加入原危险评分后再次评价并进行比较。结果共纳入527名MSM的HIV抗体阴性受试者,2年随访过程中30名MSM血清HIV阳转;SDET和Menza危险评分评价MSM HIV血清阳转风险的ROC曲线下面积为0.623和0.663;经多因素Logistic回归分析发现,MSM依从性与通过互联网寻找性伴是MSM的HIV阳转的影响因素(P <0.05);对两种危险评分加入依从性及通过互联网寻找性伴两个变量后重新评分,其评价MSM HIV血清阳转风险的ROC曲线下面积变化不大(P> 0.05),分别为0.691和0.701。结论 SDET及Menza危险评分对暴露前预防用药的这一特殊MSM队列阳转风险评价效果良好,因其简单易行,今后可考虑在这一特殊人群中推广使用。