大鼠慢性充血性心力衰竭模型的建立与评价

目的采用腹主动脉部分缩窄术,建立大鼠慢性充血性心力衰竭模型。方法沿胸骨柄,腹正中切开后分离腹主动脉和左肾动脉,在左肾动脉上方1.0～1.5 cm处,将7号针头(去尖)与腹主动脉一起结扎,然后抽出针头。术前给予大鼠心电监测并密切观察术后大鼠临床症状;应用超声心动图动态监测左室舒张末期内径(LVEDd),舒张末期室间隔厚度(IVSd)和左室后壁厚度(LVPWd)。8周后再次给予心电监测并处死大鼠,解剖心脏,计算HW/BW、LVW/BW,并制作病理切片,经HE染色后置于光镜下观察心肌组织形态和纤维化程度。结果与假手术组相比,第3周开始,模型组每周平均尿量开始减少;4周后,模型组大鼠出现毛发光泽不良、呼吸急促、爪背及尾巴紫绀和水肿、活动力下降等临床症状;4周后,模型组大鼠IVSd、LVPWd和LVEDd均增加(p<0.05),分别为(2.34±0.25 vs 1.73±0.14)mm、(2.43±0.14 vs 1.55±0.31)mm和(5.57±0.26 vs 5.57±0.26)mm;8周后,模型组大鼠IVSd(3.07±0.33 vs 3.07±0.33)mm,p<0.05、LVPWd(3.61±0.20 vs 1.62±0.18)mm,p<0.01和LVEDd(7.05±0.10 vs 4.71±0.16)mm,p<0.01均有显著性差异,提示心衰程度加剧;而正常组与假手术组上述各指标均无明显变化(p>0.05);解剖发现模型组心肌重量指数明显高于假手术组;病理结果显示,模型组心肌细胞体积增大直径增宽,细胞排列不整齐、染色不均、间质纤维化明显。结论腹主动脉部分缩窄术造模可以在8周内成功建立慢性充血性心力衰竭模型,且此法重复性好,对心衰机制的研究具有重要价值。

TGF-β1在慢性充血性心力衰竭中的表达及其作用

目的探索TGF-β1在慢性充血性心力衰竭发生过程中的表达变化及其作用。方法将25只成年雄性SD大鼠随机分为正常组5只,假手术组10只,手术组10只,假手术组和手术组观察时间点为术后1、2、4、8 w。采用腹主动脉部分缩窄术,建立大鼠慢性充血性心力衰竭模型。应用超声心动图动态监测左室舒张末期内径(LVEDd),舒张末期室间隔厚度(IVSd)和左室后壁厚度(LVPWd);解剖心脏,计算心肌重量指数(心重/体重(HW/BW)和左室重/体重(LVW/BW));免疫组织化学染色法检测TGF-β1表达变化。结果手术组术后1 w LVEDd、IVSd和LVPWd分别为(4.87±0.26)mm、(2.04±0.11)mm和(1.93±0.19)mm;此后呈进行性增加趋势,假手术组无明显变化。正常组HW/BW和LVW/BW分别为(2.79±0.13)和(1.90±0.21);手术组术后8 w HW/BW可达(4.03±0.25),LVW/BW(3.15±0.31);假手术组无明显变化。手术组TGF-β1表达量明显高于正常组和假手术组。线性回归提示TGF-β1表达与LVW/BW存在线性相关。结论腹主动脉部分缩窄术造模可以在8 w内成功建立慢性充血性心力衰竭模型;慢性充血性心力衰竭发生过程中TGF-β1表达量明显增高。

糖原合成酶激酶-3β与转化生长因子-β1在慢性充血性心力衰竭中的变化

目的研究糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)和转化生长因子-β1(transforminggrowth factor-β1,TGF-β1)在大鼠压力超负荷性心力衰竭发生过程中的变化。方法将25只成年雄性SD大鼠随机分为正常组5只,假手术组10只,模型组10只,假手术组和模型组观察时间点为术后1周、2周、4周、8周。采用腹主动脉部分缩窄术,建立大鼠慢性充血性心力衰竭模型。应用超声心动图动态监测左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDd),舒张末期室间隔厚度(interventricular septal thickness,IVST)和左心室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness,LVPWT);解剖心脏,计算心质量指数;免疫印迹技术检测GSK-3β和P-GSK-3β的变化,免疫组织化学染色法检测TGF-β1表达变化。结果模型组术后1周LVEDd、IVST和LVPWT分别为(4.87±0.26)mm、(2.04±0.11)mm和(1.93±0.19)mm;此后呈进行性增加趋势,术后8周分别达(6.94±0.12)mm、(2.98±0.21)mm、(3.63±0.18)mm,均高于正常组和假手术组,差异有统计学意义(P<0.01);假手术组上述指标各观察点之间比较无明显变化(P>0.05)。模型组术后8周心质量指数和左心室质量指数均高于正常组和假手术组,差异有统计学意义(P<0.01)。正常组、假手术组、模型组心肌GSK-3βWestern blotting灰度值无明显区别;模型组术后8周心肌细胞p-GSK-3βWestern blotting灰度值明显高于正常组和假手术组(P<0.05)。模型组心肌组织TGF-β1免疫组织化学检测的表达量明显高于正常组和假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。线性回归分析提示p-GSK-3β和TGF-β1表达与左心室质量指数存在线性相关。结论压力超负荷性心力衰竭发生过程中同时出现p-GSK-3β和TGF-β1表达的增高。

充血性心力衰竭大鼠心肌及海马组织GSK-3β表达的变化

目的:探讨充血性心力衰竭大鼠心肌及海马区GSK-3β的变化。方法:将25只成年雄性SD大鼠随机分为正常组(5只)、假手术组(10只)和模型组(10只),采用腹主动脉部分缩窄术建立大鼠慢性充血性心力衰竭模型。术后1、2、4、8周应用超声心动图动态监测左室舒张末期内径(LVEDd)、舒张末期室间隔厚度(IVSd)和左室后壁厚度(LVPWd);计算心肌重量指数[心重/体重(HW/BW)、左室重/体重(LVW/BW)];免疫组织化学染色法检测大脑海马区GSK-3β和p-GSK-3β表达变化。结果:模型组LVEDd、IVSd、LVPWd高于正常组和假手术组,且呈时间依赖性上升趋势(P<0.01)。模型组心肌重量指数与正常组和假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组心肌和海马组织p-GSK-3β灰度值明显高于假手术组(P<0.01)。结论:压力超负荷性心力衰竭发生过程中,大脑海马区p-GSK-3β表达量明显增高,GSK-3β活性明显下降。