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不同理化因子对新疆紫草愈伤组织生长及紫草宁衍生物合成的影响 被引量:30
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作者 叶和春 尹作鸿 +3 位作者 李国凤 吴新 董教望 伍正蓉 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1991年第12期927-931,共5页
本文报道了不同理化因子对新疆紫草(Arnebia euchroma)愈伤组织生长及紫草宁衍生物生物合成的影响。试验结果表明,有利于愈伤组织生长和色素形成的合适温度为25℃;培养基pH值的最适范围为5.3—5.8;白光对愈伤组织的生长和紫草宁衍生物... 本文报道了不同理化因子对新疆紫草(Arnebia euchroma)愈伤组织生长及紫草宁衍生物生物合成的影响。试验结果表明,有利于愈伤组织生长和色素形成的合适温度为25℃;培养基pH值的最适范围为5.3—5.8;白光对愈伤组织的生长和紫草宁衍生物的形成具有强烈的抑制作用;培养基中添加0.2mg/L的IAA和0.5mg/L的KT对愈伤组织的生长具有促进作用;IAA和KT对紫草宁衍生物合成无促进作用,并随两者浓度的提高,培养物中紫草宁衍生物的含量与产量逐渐降低。 展开更多
关键词 紫草 愈伤组织 紫草宁衍生物 培养
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新疆紫草细胞大量培养的研究
2
作者 叶和春 李国凤 《植物学报》 CAS CSCD 1992年第S1期93-94,共2页
新疆紫草(Arnebia euchroma)为多年生草本植物,其根中含有多种萘醌类化合物(即紫草宁及其衍生物),为我国传统的中草药,监床用于抗菌、消炎,如治疗皮肤烧伤、烫伤及溃疡久治不愈、妇科炎症等。此外还具有抗促性腺激素及抗肿瘤活性。除药... 新疆紫草(Arnebia euchroma)为多年生草本植物,其根中含有多种萘醌类化合物(即紫草宁及其衍生物),为我国传统的中草药,监床用于抗菌、消炎,如治疗皮肤烧伤、烫伤及溃疡久治不愈、妇科炎症等。此外还具有抗促性腺激素及抗肿瘤活性。除药用外,紫草宁衍生物还是理想的天然色素和染料,可用于食品、化妆品的添加剂。 展开更多
关键词 新疆紫草 大量培养 细胞生长 紫草素 妇科炎症 抗肿瘤活性 促性腺激素 萘醌类 多年生草本 色素形成
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Ri质粒转化的青蒿发根培养及青蒿素的生物合成 被引量:77
3
作者 蔡国琴 李国珍 +1 位作者 叶和春 李国凤 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期315-320,共6页
用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)转化药用植物青蒿(Artemisia annua L.)并建立了发根体外培养系统。Southern杂交、NPTⅡ酶的检测证明Ri质粒的T-DNA转移并整合到植物的核基因组上。在发根培养系统中,检测了青蒿的重要次生代谢... 用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)转化药用植物青蒿(Artemisia annua L.)并建立了发根体外培养系统。Southern杂交、NPTⅡ酶的检测证明Ri质粒的T-DNA转移并整合到植物的核基因组上。在发根培养系统中,检测了青蒿的重要次生代谢物—青蒿素的含量,检测了不同理化因子对发根生长及青蒿素含量的影响。结果表明:光照(日光灯,12h光周期,2000lx)有利于次生产物青蒿素的积累。培养基的pH值为5.4。蔗糖浓度为3%不仅促进发根的生长,而且促进青蒿素的积累。低浓度亲乙酸(NAA)对发根生长具有促进作用,但抑制青蒿素的合成。赤霉素GA_3对发根的生长及次生产物的合成都具有促进作用,其最适浓度为4.8mg/L。 展开更多
关键词 中药 青蒿 RI质粒 发根 青蒿素 生物合成
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中药青蒿的生理生化特征及其研究进展 被引量:47
4
作者 耿飒 叶和春 +1 位作者 李国凤 麻密 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2002年第1期90-97,共8页
This article presents a brief review concerning the different aspects of studies on Artemisia annua L. Many research papers have been published regarding artificial planting, and physiological and chemical characteris... This article presents a brief review concerning the different aspects of studies on Artemisia annua L. Many research papers have been published regarding artificial planting, and physiological and chemical characteristics of A. annua in recent years. The progresses in investigations to enhance artemisinin production from A. annua cell, tissue culture, whole plants, and gene manipulation are discussed in this paper. Fig 2, Ref 展开更多
关键词 中药青蒿 次生代谢 青蒿素 组织培养 遗传性状 基因工程 生理生化特征
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青蒿试管苗开花及用花器官为外植体诱导丛生芽生产青蒿素 被引量:23
5
作者 耿飒 叶和春 +2 位作者 李国凤 麻密 种康 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2001年第3期201-206,共6页
将培养于MS培养基上 5wk的青蒿试管苗置于光周期 13 ,光强 6 0 0 0lx ,温度为 2 6℃ (昼 )和 2 2℃ (夜 )的条件下 ,成功地诱导其开花 .利用不同发育阶段的花蕾和花器官为外植体诱导丛生芽 ,发现不同浓度 (ρ)的 6 BA对丛生芽的诱导率... 将培养于MS培养基上 5wk的青蒿试管苗置于光周期 13 ,光强 6 0 0 0lx ,温度为 2 6℃ (昼 )和 2 2℃ (夜 )的条件下 ,成功地诱导其开花 .利用不同发育阶段的花蕾和花器官为外植体诱导丛生芽 ,发现不同浓度 (ρ)的 6 BA对丛生芽的诱导率和青蒿素的生物合成有重要影响 .结果表明 :以花蕾为外植体诱导丛生芽的最佳培养基是 :MS附加 4.0mgL-1的 6 BA和 0 .0 5mgL-1的NAA ;但当 ρ(6 BA)在 0~ 0 .5mgL-1之间时 ,有利于青蒿素的合成 ,ρ(6 BA) =0 .5 ~ 4mgL-1时抑制青蒿素的生物合成 .丛生芽中促进青蒿素合成的最佳 ρ(6 BA)为 0 .5mgL-1.用HPLC法测定发现用此法得到的丛生芽青蒿素的含量比直接利用叶片诱导的丛生芽青蒿素含量高 1倍 .图 5表 3参 2 展开更多
关键词 青蒿 外植体 丛生芽 青蒿素 试管苗 花器官 诱导
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碳源和氮源对水母雪莲悬浮培养细胞生长和黄酮合成的影响 被引量:17
6
作者 邢建民 赵德修 +3 位作者 李茂寅 叶和春 李国凤 李佐虎 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期230-234,共5页
在MS培养基上进行水母雪莲(SausureamedusaMaxim)细胞悬浮培养时研究了碳源和氮源的影响。结果表明碳源以蔗糖最适合,蔗糖浓度则以40g/L较好,细胞生长量干重为1812g/L,总黄酮合成量达到142... 在MS培养基上进行水母雪莲(SausureamedusaMaxim)细胞悬浮培养时研究了碳源和氮源的影响。结果表明碳源以蔗糖最适合,蔗糖浓度则以40g/L较好,细胞生长量干重为1812g/L,总黄酮合成量达到142325mg/L。在培养过程中,水母雪莲细胞能够快速将蔗糖水解为葡萄糖和果糖,并首先利用葡萄糖。氮源总浓度(包括NH+4和NO-3)为60~120mmol/L,NH+4/NO-3比例为20/40有利于雪莲细胞生长和黄酮合成。用HPLC检测显示4′,5,7三羟基3′,6二甲氧基黄酮(Jaceosidin)和4′,5,7三羟基6甲氧基黄酮(Hispidulin)2种黄酮的含量分别达到细胞干重的146%和0010%。 展开更多
关键词 水母雪莲 悬浮培养 碳源 氮源 细胞生长 黄酮
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植物萜类代谢工程 被引量:28
7
作者 韩军丽 李振秋 +3 位作者 刘本叶 王红 李国凤 叶和春 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期561-569,共9页
植物萜类化合物不仅在植物生命活动中起重要作用,而且具有重要商业价值。随着近年来萜类代谢途径和调控机理研究的深入,代谢工程已成为提高萜类产量最有潜力的途径之一。对萜类代谢工程领域具代表性的研究结果进行了全面回顾,然后讨论... 植物萜类化合物不仅在植物生命活动中起重要作用,而且具有重要商业价值。随着近年来萜类代谢途径和调控机理研究的深入,代谢工程已成为提高萜类产量最有潜力的途径之一。对萜类代谢工程领域具代表性的研究结果进行了全面回顾,然后讨论了萜类代谢工程的研究方法和策略,其中重点探讨了功能基因组学方法在萜类代谢途径及调控机理研究方面的应用。 展开更多
关键词 萜类化合物 代谢工程 功能基因组学 研究策略
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青蒿素研究进展 被引量:61
8
作者 王玉 +2 位作者 欧阳藩 叶和春 李国风 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 1999年第1期41-48,共8页
青蒿素是目前治疗疟疾的特效药。本文对自青蒿素发现以来的最新研究进展进行了比较详尽的综述。内容包括:青蒿素的发现及历史,青蒿素的来源,青蒿素的全合成,青蒿素的生物合成,青蒿素衍生物以及植物组织培养生产青蒿素。
关键词 青蒿素 青蒿素衍生物 合成
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青蒿发根生长及青蒿素生物合成动态的研究 被引量:14
9
作者 刘本叶 叶和春 +4 位作者 李国凤 陈大华 耿飒 张艳萍 陈建林 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期401-404,共4页
从747条发根农杆菌ATCC15834转化的青蒿株系025发根中,筛选出7个生长较快的发根系,这7个系在生长速度和青蒿素含量上均有显著差异,其中发根系HR9青蒿素产率最高,达到每月3325mg/L。青蒿发根的生长... 从747条发根农杆菌ATCC15834转化的青蒿株系025发根中,筛选出7个生长较快的发根系,这7个系在生长速度和青蒿素含量上均有显著差异,其中发根系HR9青蒿素产率最高,达到每月3325mg/L。青蒿发根的生长量和青蒿素含量极显著高于未转化根和愈伤组织。青蒿发根在分批培养中没有明显的迟滞期,接种后第7天进入指数生长期,第11天生长最快,第20天进入稳定期。青蒿发根中青蒿素含量呈明显的“与生长相关”特性,在指数生长期,青蒿素含量缓慢下降,生长速度减缓后,青蒿素含量上升,发根生长停止后,继续延长培养时间,青蒿素含量也不再提高。在分批培养中,青蒿发根适宜的培养时间为21d。 展开更多
关键词 青蒿 发根 发根农杆菌 青蒿素 生物合成
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几种理化因子对贯叶金丝桃细胞培养中的细胞生长和总金丝桃素合成的影响研究 被引量:10
10
作者 许明淑 黄璐琦 +2 位作者 陈美兰 叶和春 李国凤 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期921-923,共3页
目的 :为了探讨几种理化因子对贯叶金丝桃愈伤组织中金丝桃素含量的影响。方法 :采用高效液相色谱法和植物组织培养的方法。结果与结论 :当硝态类氮和铵态类氮的比例 3∶1时贯叶金丝桃愈伤组织的生长量提高至 1.6倍 ,金丝桃素的合成量... 目的 :为了探讨几种理化因子对贯叶金丝桃愈伤组织中金丝桃素含量的影响。方法 :采用高效液相色谱法和植物组织培养的方法。结果与结论 :当硝态类氮和铵态类氮的比例 3∶1时贯叶金丝桃愈伤组织的生长量提高至 1.6倍 ,金丝桃素的合成量也略有提高 ;加入甘露 (0 .1~ 0 .2mol·L-1时 )金丝桃素的合成量有很大的提高 ;加入PVPP ,PVP等防褐化的物质能促进贯叶金丝桃愈伤组织的生长。 展开更多
关键词 理化因子 贯叶金丝桃 细胞培养 细胞生长 总金丝桃素 合成
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青蒿素生物合成分子调控研究进展 被引量:13
11
作者 王红 叶和春 +2 位作者 刘本叶 李振秋 李国凤 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期646-650,共5页
青蒿素是目前世界上最有效的疟疾治疗药物。通过对青蒿素的生物合成途径 ,青蒿素生物合成途径的关键酶 ,青蒿素生物合成的分子调控的介绍 ,综述了青蒿素生物合成分子调控的最新研究进展。
关键词 青蒿 青蒿素 生物合成 分子调控
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植物细胞培养生产紫杉醇的研究进展 被引量:12
12
作者 邢建民 查丽杭 +3 位作者 李佐虎 刘大陆 叶和春 李国凤 《植物学报》 CAS CSCD 1997年第3期23-30,共8页
植物细胞培养生产紫杉醇的研究进展邢建民查丽杭李佐虎刘大陆(中国科学院化工冶金研究所,北京100080)叶和春李国凤(中国科学院植物研究所,北京100093)ADVANCESINTHESTUDYONTAXOLPRODU... 植物细胞培养生产紫杉醇的研究进展邢建民查丽杭李佐虎刘大陆(中国科学院化工冶金研究所,北京100080)叶和春李国凤(中国科学院植物研究所,北京100093)ADVANCESINTHESTUDYONTAXOLPRODUCTIONBYPLANTCELLC... 展开更多
关键词 紫杉醇 植物细胞培养 愈伤组织 生物反应器 紫杉醇合成 培养液 次级代谢物 生化工程 悬浮培养 细胞生长
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外循环气升式反应器培养新疆紫草细胞 被引量:17
13
作者 陈士云 侯嵩生 +5 位作者 叶和春 李国凤 张健 李新明 陈路 董教望 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期81-86,共6页
采用两步培养法进行新疆紫草细胞悬浮培养及5L外循环气升式反应器扩大培养,探讨了培养过程中细胞生长、紫草色素合成与培养液的电导率、可溶性糖含量变化之间的关系。第一步培养时细胞生长迅速,但也有一部分色素合成,电导率及可溶性糖... 采用两步培养法进行新疆紫草细胞悬浮培养及5L外循环气升式反应器扩大培养,探讨了培养过程中细胞生长、紫草色素合成与培养液的电导率、可溶性糖含量变化之间的关系。第一步培养时细胞生长迅速,但也有一部分色素合成,电导率及可溶性糖含量迅速下降;第二步培养初期电导率也开始下降,但当色素合成达到高峰并有一部分外泌到培养基后,电导率又开始回升。可溶性糖消耗很快,到后期已测不出其存在。因此通过监测培养液中电导率及可溶性糖的变化情况,可以为新疆紫草细胞大规模培养与色素合成提供有用的参数指标。 展开更多
关键词 新疆紫草 悬浮培养 生物反应器
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温度对青蒿毛状根生长和青蒿素生物合成的影响(英文) 被引量:21
14
作者 郭晨 +1 位作者 叶和春 李国风 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第10期1828-1831,共4页
本实验研究了不同温度(15℃~35°C)对青蒿毛状根生长和青蒿素生物合成的影响,发现25°C有利于毛状根生长,30°C促进了青蒿素生物合成。通过温度改变的二步培养技术(培养前20d温度控制在25°C,后10d温度提高到30°... 本实验研究了不同温度(15℃~35°C)对青蒿毛状根生长和青蒿素生物合成的影响,发现25°C有利于毛状根生长,30°C促进了青蒿素生物合成。通过温度改变的二步培养技术(培养前20d温度控制在25°C,后10d温度提高到30°C),青蒿素的产量得到明显提高,高于在恒温培养时(25°C或30°C)的结果。 展开更多
关键词 青蒿 青蒿素 毛状根 温度
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植物类异戊二烯代谢途径的分子生物学研究进展 被引量:59
15
作者 陈大华 叶和春 +1 位作者 李国凤 刘彦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第6期551-558,共8页
New advances in molecular biology of plant secondary metabolic pathway were summarized. The biosynthesis of artemisinin was used as an example, combined with the research work in the authors’ laboratory. Some new way... New advances in molecular biology of plant secondary metabolic pathway were summarized. The biosynthesis of artemisinin was used as an example, combined with the research work in the authors’ laboratory. Some new ways for producing plant secondary metabolites were proposed. 展开更多
关键词 类异戊二烯 次生代谢 生物合成 分子调控 HMGR
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发根农杆菌转化青蒿影响因素的研究 被引量:9
16
作者 刘本叶 叶和春 +4 位作者 李国凤 贾燕涛 麻密 陈建林 张艳萍 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期349-353,共5页
对叶盘法转化过程中各种影响因素进行研究.结果表明:发根农杆菌种类、基本培养基和青蒿株系对转化率有明显影响,而培养基pH在5.2~5.8对转化率没有明显影响;发根农杆菌ATCC15834的转化率最高;基本培养基中MS效... 对叶盘法转化过程中各种影响因素进行研究.结果表明:发根农杆菌种类、基本培养基和青蒿株系对转化率有明显影响,而培养基pH在5.2~5.8对转化率没有明显影响;发根农杆菌ATCC15834的转化率最高;基本培养基中MS效果最好;青蒿株系025对发根农杆菌最敏感;处于对数生长期的发根农杆菌(D660nm=0.75)稀释5倍后用来转化效果最好;幼嫩的叶片的转化率比成熟叶片高;向共培养培养基中加入乙酰丁香酮等酚类物质对转化没有促进作用.在最适的转化条件下,发根农杆菌ATCC15834对青蒿株系025的转化率可达到100%.PCR检测证明,青蒿发根基因组中含有发根农杆菌Ri质粒TDNA上的rolC片段. 展开更多
关键词 青蒿 发根农杆菌 发根诱导率 RI质粒 发根
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青蒿丛生芽诱导影响因素的研究(英文) 被引量:9
17
作者 耿飒 姬生栋 +3 位作者 袁金云 卢龙斗 叶和春 李国凤 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期566-572,共7页
目的 对影响青蒿丛生芽诱导因素进行基础性研究。方法 把常规的植物组织培养技术应用于调控青蒿中次生代谢产物青蒿素的生物合成代谢。结果 青蒿的基因型 ,激素和基本培养基对丛生芽的发生有显著影响 ,而光强在 10 0 0~ 6 0 0 0 lx... 目的 对影响青蒿丛生芽诱导因素进行基础性研究。方法 把常规的植物组织培养技术应用于调控青蒿中次生代谢产物青蒿素的生物合成代谢。结果 青蒿的基因型 ,激素和基本培养基对丛生芽的发生有显著影响 ,而光强在 10 0 0~ 6 0 0 0 lx和温度在 2 0℃~ 30℃对丛生芽的发生影响不大 ;在 5种基因型的青蒿中 ,0 2 5丛生芽的诱导率最高 ;诱导丛生芽的激素组合是 6 - BA2 .0 mg/ L 和 NAA0 .15 mg/ L;另外 ,离子在青蒿丛生芽的诱导和青蒿素的生物合成过程中起着非常重要的作用。结论 组织培养条件下 ,青蒿丛生芽的诱导及青蒿素的生物合成可以通过理化因子有效地进行调控。 展开更多
关键词 青蒿 丛生芽 诱导率 青蒿素
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中药青蒿鲨烯合酶的大肠杆菌表达、纯化与功能鉴定 被引量:8
18
作者 李振秋 王花红 +2 位作者 王红 李国凤 叶和春 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期309-312,共4页
利用PCR方法,将经RACE方法克隆到的中药青蒿鲨烯合酶cDNA(AF302464)开放阅读框的3′末端截短99bp,插入到原核表达载体pET30a(+)的NcoⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,构建N端和C端均携带有HIS6表达标签的鲨烯合酶重组表达载体pETSSA.将pETSSA转... 利用PCR方法,将经RACE方法克隆到的中药青蒿鲨烯合酶cDNA(AF302464)开放阅读框的3′末端截短99bp,插入到原核表达载体pET30a(+)的NcoⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,构建N端和C端均携带有HIS6表达标签的鲨烯合酶重组表达载体pETSSA.将pETSSA转入大肠杆菌BL21(DE3),0.5mmol/LIPTG(isopropyl-beta-D-thiogalactoside)28℃诱导重组鲨烯合酶的表达.表达产物经镍琼脂糖柱纯化.纯化蛋白加入酶促反应体系(含FPP和NADPH),GC-MS分析酶促反应体系的正己烷萃取物,结果显示重组鲨烯合酶可以催化FPP向鲨烯的转化.青蒿鲨烯合酶的功能鉴定为进一步利用反义或RNAi技术限制甾类生物合成,从而提高青蒿中的青蒿素含量提供了基础. 展开更多
关键词 鲨烯合酶 大肠杆菌表达 功能鉴定 青蒿
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真菌诱导子对青蒿发根细胞生长和青蒿素积累的影响(英文) 被引量:13
19
作者 王红 叶和春 +2 位作者 李国凤 刘本叶 种康 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第9期905-909,共5页
3种真菌诱导子 (大丽花轮枝孢 (VerticilliumdahliaeKleb .)、葡枝根霉 (Rhizopusstolonifer (Ehrenb .exFr.)Vuill)和束状刺盘孢 (Colletotrichumdematium (Pers .)Grove) )处理青蒿 (ArtemisiaannuaL .)的发根 ,均能促进发根中青蒿素... 3种真菌诱导子 (大丽花轮枝孢 (VerticilliumdahliaeKleb .)、葡枝根霉 (Rhizopusstolonifer (Ehrenb .exFr.)Vuill)和束状刺盘孢 (Colletotrichumdematium (Pers .)Grove) )处理青蒿 (ArtemisiaannuaL .)的发根 ,均能促进发根中青蒿素的积累 ,其中以大丽花轮枝孢的诱导效果最好 ;对细胞生长均没有明显影响。经大丽花轮枝孢处理的发根中青蒿素含量达 1.12mg/gDW ,比对照 (0 .77mg/gDW )提高 45 %。诱导子的作用效果与诱导子浓度、诱导子作用时间及发根的生长状态有关。对大丽花轮枝孢来说 ,诱导子作用的最适浓度为每毫升培养基含糖 0 .4mg ;发根在指数生长末期对诱导作用最敏感 ;在加入诱导子 4d后收获发根 ,发根中的青蒿素含量最高。 展开更多
关键词 青蒿 发根 青蒿素 真菌诱导子 细胞生长 抗疟药
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青蒿无性系中青蒿素生物合成的相关因素 被引量:16
20
作者 张龙 叶和春 李国凤 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2004年第3期277-280,共4页
通过诱导丛生芽的方法得到青蒿高产无性克隆系S1,并用S1进行了青蒿素生物合成相关因素的研究 .发现在Hoagland培养液中添加 0 .4 4mg/L浓度的ZnSO4或者 5 .72mg/L的HBO3 时 ,能有效提高青蒿素的含量 .研究表明 ,青蒿素含量和青蒿各株系... 通过诱导丛生芽的方法得到青蒿高产无性克隆系S1,并用S1进行了青蒿素生物合成相关因素的研究 .发现在Hoagland培养液中添加 0 .4 4mg/L浓度的ZnSO4或者 5 .72mg/L的HBO3 时 ,能有效提高青蒿素的含量 .研究表明 ,青蒿素含量和青蒿各株系间的遗传差异存在很大关系 ,RAPD分析的结果表明 ,用OPA15能够在青蒿高产株系中扩增到OPA15 10 0 0 这一特异性片段 .另外 ,对青蒿素含量和青蒿生殖生长关系的研究表明 ,青蒿素含量最高的发育时期是现蕾期 .图 7表 1参 展开更多
关键词 青蒿 无性克隆系 青蒿素 遗传差异 RAPD 生殖生长
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