微生态制剂MMA对新生儿高间接胆红素血症的改善作用

本研究使用微生态制剂ＭＭＡ对２０例新生儿高间接胆红素血症患者进行了口服或十二指肠内灌注治疗。结果发现ＭＭＡ对新生儿高间接胆红素血症有显著改善作用：治疗组血清总胆红素值明显下降，十二指肠液直接胆红素增多，这些与对照组常规治疗法比较均有显著性差异（Ｐ＜００５），说明微生态制制ＭＭＡ能阻止肠道直接胆红素转变为间接胆红素，减少胆红素的肠肝循环。

绿舒筋对实体型肝癌小鼠脾自然杀伤细胞活性的调节作用

用＾１２５Ｉ－ＵｄＲ释放法研究实体型癌鼠脾自然杀伤细胞活性，以探讨绿舒筋注射液对肿瘤机体细胞免疫功能的调节作用，通过该药对害体型肝癌鼠的治疗及其生存期的影响和其自然杀伤细胞（ＮＫ）活性的测定，动态观察，发现一定剂量的绿舒筋注射液对实体型肝癌鼠脾自然杀伤细胞活性有显著增强作用，并明显延长该鼠生存期，此结果提示ＮＫ活性的促进可能为绿舒筋抗肿瘤作用的机理之一。

nisP基因在nisin生物合成终末成熟过程中的控制作用

本研究应用分子克隆和基因缺失突变技术首创了一个乳酸链球菌ｎｉｓｉｎ生物合成基因ｎｉｓｐ的突变株。此菌株能分泌完整的ｎｉｓｉｎ 前体肽链，却不能分泌有活性的ｎｉｓｉｎ。经生物活性、ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＲＰ—ＨＰＬＣ等技术测定，ｎｉｓｉｎ 前体Ｎ—末端连接有先导序列，用胰酶或产活性ｎｉｓｉｎ的菌细胞膜蛋白处理ｎｉｓｉｎ前体，使之失去先导链，成为有活性的成熟的ｎｉｓｉｎ肽分子。此研究结果证明ｎｉｓｐ基因在ｎｉｓｉｎ生物合成最后阶段的成熟过程起决定作用。

淋病奈瑟菌孔蛋白B原核重组质粒的构建、表达与蛋白鉴定

目的克隆和分析淋病奈瑟菌孔蛋白(porinⅠB,PⅠB)的基因序列并表达相应的蛋白质,为淋病奈瑟菌感染的检测和基因工程疫苗的研究与开发建立基础。方法PCR扩增出孔蛋白PⅠB DNA片段后构建出重组质粒pET-PⅠB,并经质粒酶切筛选、DNA测序和异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导大肠埃希菌DE3表达蛋白予以证实。结果所得PⅠB核苷酸序列与GenBank(AF090801)公布的序列相比较,同源性达99.28%,推导氨基酸序列同源性为98.14%。SDS-PAGE检测到40 kD大小的融合蛋白。结论淋病奈瑟菌孔蛋白PⅠB原核表达质粒构建正确。

绿舒筋对带瘤机体的巨噬细胞细胞毒功能的调节作用

用^(125)I—UdR释放法研究绿舒筋对带瘤小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)细胞毒功能的调节作用发现,一定剂量的绿舒筋注射液能显著增强数种带瘤鼠腹腔Mφ对P815(甲基胆蒽诱发的小鼠肥大细胞瘤细胞)的溶解作用。用药带瘤鼠组与未用药带瘤鼠组比较,前者Mφ对肿瘤细胞的溶解率显著高于后者(P<0.01).体外实验结果表明,其Mφ杀瘤细胞活性的增强,可能与药物促进Mφ接受γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子的活化作用有关。

乳链菌肽nisinZ的pH吸附法分离纯化技术研究

通过 p H吸附法 ,利用乳酸链球菌亚种 N8(L actococcus lactis subsp. lactis N8)和乳酸链球菌亚种ATCC1145 4,研究了 nisin Z分子在不同 p H环境下的吸附作用及其分离纯化效率 ,并经麦黄酮 SDS- PAGE和 RP- HPL C纯度鉴定 ,证实用此技术分离 nisin Z具有高效高纯度、操作简便等良好特征。nisin在 p H6 .5吸附率达 10 0 % ,p H3以下完全释放。该技术可望开辟对 nisin等微生物分泌性蛋白的分离纯化新途径。

医学微生物学中的微生态学问题

微生态学与微生物学微生态学是近年来快速发展起来的一门新兴学科。１９７７年德国ＶｏｌｋｅｒＲｕｓｈ博士首次明确提出微生态学（ｍｉａｒｏｅｃｏｌｏｇｙ）一词，并在德国的赫尔本建立起世界上第一个微生态学研究所。他认为微生态学是生态学的微观层次，从而在１９８...

乳酸链球菌nisk基因与细菌性双成分调节子的研究

本研究通过对乳酸链球菌亚种Ｎ８的Ｎｉｓｉｎｚ结构基因下游部分基因区的分子克隆、序列分析和ＯＲＦ的检测，揭示出一个属于细菌性双成份调节于系统的基因，ｎｉＳＫ，其起始区略与ｎｉｓＲ末端重叠，并发现ｎｉｓＲ和ｎｉｓｋ同被转录一个多顺反子ｍＲＮＡ。在ｎｉｓＫ编码区后，有一个ρ非依赖性终止子（Ｇ°＝－４．７Ｋａｌ／ｍｏｌ）。推导出的含４４７个氮基酸的ｎｉｓｋ蛋白在其Ｎ末端区有两个过膜序列。其Ｃ末端区与细菌性双成份调节子系统的若干组氦酸激酶Ｃ末端同源。

某院流感嗜血杆菌耐药性及其对氨苄西林耐药机制

目的了解流感嗜血杆菌对常用抗菌药物的耐药性及其对氨苄西林的耐药机制。方法采用纸片扩散法和头孢硝噻吩纸片法,对2012年1月1日—12月31日某院住院及门诊患者送检标本分离的流感嗜血杆菌耐药性和β-内酰胺酶进行检测,聚合酶链反应（PCR）法对耐氨苄西林菌株进行TEM型和ROB型β-内酰胺酶基因扩增。结果 100例流感嗜血杆菌感染患者,年龄段分布主要为1~10岁,占61.00%。流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率为35.00%（35株）,对复方磺胺甲口恶唑耐药率高,达64.65%;对左氧氟沙星和阿奇霉素敏感率最高,分别为97.96%、96.84%,对环丙沙星、头孢噻肟、氯霉素、头孢呋辛和氨苄西林/舒巴坦敏感率均较高,依次为96.91%、92.78%、85.71%、77.89%和74.75%。100株流感嗜血杆菌中,21株β-内酰胺酶阳性,且均为氨苄西林耐药株。对35株耐氨苄西林菌株进行TEM和ROB基因检测,结果 22株TEM型阳性,未检出ROB阳性株。结论流感嗜血杆菌对复方磺胺甲口恶唑敏感率低,对其他常用抗菌药物敏感率高;流感嗜血杆菌对氨苄西林的主要耐药机制为产TEM型β-内酰胺酶。

幽门螺杆菌分离培养技术的改进

探讨自制的改良布氏活性炭巧克力培养基 ,置厌氧罐蜡烛培养环境分离临床粘膜标本幽门螺杆菌 ( Hp)的检出率。结果表明 :66例粘膜标本中分离出 Hp5 4株 ( 81.8% ) ,4 4株 Hp滤液有 2 4株 ( 5 4 .5 % )具有细胞毒活性 ,其中 2 6例消化性溃疡患者有 18例 ( 69.2 % ) ,18例慢性胃炎患者有 6例 ( 3 3 .3 % )为 Hp( Toxin+ )感染。结果提示 :通过对 Hp生物学性状和毒素的检测结果证实 ,该法可用于临床粘膜标本

幽门螺杆菌对6种抗生素的耐药性及其机制的研究

目的了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对6种常用抗生素的耐药状况,探讨耐甲硝唑rdxA基因突变与耐药性的关系。方法分离培养76株Hp,以琼脂稀释法检测Hp对甲硝唑、替硝唑、四环素、克拉(红)霉素、阿莫西林、利福平的最小抑菌浓度(Mininum Inhibitory Concentration,MIC),再用PCR方法扩增甲硝唑耐药相关基因rdxA,DNA测序分析敏感株和耐药株耐药基因的序列与耐药性的关系。免疫印记(West-ern Blotting)分析耐药基因的表达与耐药性的关系。结果武汉地区人群Hp对甲硝唑、替硝唑、四环素、克拉(红)霉素、阿莫西林、利福平的耐药率分别为67.1%、43.4%、3.9%、11.8%、17.1%和10.5%;甲硝唑耐药基因序列分析表明rdxA基因有插入或点突变;Western Blot显示耐药株和敏感株的rdxA基因的表达有差异。结论幽门螺杆菌对6种抗生素有较高的耐药率,rdxA基因突变导致基因表达水平改变,导致Hp对甲硝唑耐药。

幽门螺杆菌耐甲硝唑基因分型与耐药性关系研究

目的 :了解幽门螺杆菌 (Hp )对甲硝唑的耐药株状况 ,探讨耐甲硝唑基因分型与耐药性的关系。方法 :分离培养 Hp,以纸片扩散法检测 Hp对甲硝唑的耐药性 ,再用 PCR方法扩增甲硝唑耐药基因 ,用RFLP方法进行基因分型。最后比较基因型与耐药性的关系。结果 :武汉地区人群 Hp对甲硝唑耐药率为67% ,耐药株基因型与耐药性有相关性。结论 :可以以基因型鉴定 Hp对甲硝唑的耐药性 ,此方法 ,稳定可靠。

肺炎克雷伯菌质粒β-内酰胺酶的筛选及其耐药性

目的 了解头孢类耐药肺炎克雷伯菌 (KPN)质粒 β 内酰胺酶的分布及耐药性 ,寻求最佳的检测方法。方法 双纸片协同试验和三维试验检测超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs) ,表型筛选法和三维试验检测质粒AmpC酶。结果 182株KPN中 ,ESBLs检出率双纸片协同试验为 4 2 .85 %、三维试验为 4 5 .0 5 % ,两法总符合率为95 12 % ;表型筛选法显示 9株 (4 .9% )产AmpC酶 ,三维试验则为 7株 (3.8% ) ;4株 (2 .2 % )同时产两种酶 ;产酶株对三代头孢高度耐药 ,对喹诺酮类、复方新诺明交叉耐药率也很高 ,对氨基糖苷类有一定敏感性 ,尚未发现亚胺培南耐药株。结论 KPN质粒 β 内酰胺酶以ESBLs为主 ;双纸片协同试验操作简便 ,为检测ESBLs最常用方法 ;AmpC酶表型筛选法只能作为初筛 ,确证还需用三维试验证实。

党参注射液上调抗氧化酶表达作用的实验研究

目的观察和探讨党参注射液对快速老化模型大鼠学习记忆能力及血、肝、肾、海马、脑皮质的抗氧化酶表达的影响。方法采用氟哌啶醇造成大鼠获得性记忆缺失动物模型,用电跳台法观察对照组、模型组、实验组大鼠行为学改变,测定各组大鼠组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。结果与对照组、模型组比较,党参注射液能使实验大鼠多种组织SOD、GSH-Px显著升高(P<0.001)。结论党参确有上调抗氧化酶表达作用,提示党参能抵抗氧自由基损伤。

湖北地区幽门螺杆菌VacA基因分型及疾病相关性分析

目的了解湖北地区幽门螺杆菌(Hp)空泡毒素基因(vacA)不同亚型及其与慢性胃炎(CG)和慢性消化性溃疡(CPU)之间的相关性。方法采用共享引物PCR技术和特异的PCR分型引物,对74例CG或CPU患者胃黏膜活检组织Hp分离株进行分型,并分析不同亚型与这两种疾病的相关性。结果湖北地区的Hp vacA基因主要以s1a-m 2型为主,vacA的优势亚型分布与上海和广州相似,除了s2型以外,s1a-m 1、s1b-m 1、s1b-m 2、s1c-m 1和s1c-m 2均有分布;另有8株不能被完全分型。结论湖北地区Hp vacA基因的不同亚型与CG和CPU之间不存在相关性,CG和CPU的引发因素有待进一步研究。

肺炎克雷伯菌质粒介导的β-内酰胺酶的筛选及其耐药性检测

目的 了解对头孢类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌 (Kpn)中超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)和AmpC酶的分布及其对抗生素的敏感性 ,寻求检测肺炎克雷伯菌质粒 β 内酰胺酶的最佳方法。 方法 收集临床分离的肺炎克雷伯菌182株 ,采用双纸片协同试验和三维试验检测ESBL ,表型筛选法和头孢西丁三维试验检测AmpC酶。结果 双纸片协同试验检测出产ESBL株 78株 ,占 4 2 85 % (78/ 182 ) ,三维试验显示产ESBL株 82株 ,占 4 5 0 5 % (82 / 182 ) ,两者相比总符合率为 95 12 % (78/ 82 )。AmpC酶表型筛选法结果显示可疑产AmpC酶株 9株 ,占 4 9% (9/ 182 )。三维试验显示产AmpC酶为 7株 ,占 3 8% (7/ 182 ) ;同时产ESBL和AmpC酶菌株为 2株 ,占 1 1% (2 / 182 )。产酶株对三代头孢高度耐药 ,对喹诺酮类、复方新诺明交叉耐药率也很高 ,对氨基糖苷类抗生素有一定敏感性 ,尚未发现亚胺培南耐药株。结论 双纸片协同试验为检测ESBL最常用方法 ,AmpC酶表型筛选法只可作为初步筛查 ,确证时采用三维试验。产ESBL和 (或 )AmpC酶的Kpn对多种抗生素耐药 。

人食管癌组织存在螺杆菌16S rRNA基因

目的检测人类食管癌组织是否有螺杆菌基因,以初步探讨螺杆菌的感染是否与人类食管癌的发生发展相关。方法收集食管癌患者的手术切除标本34例,采用聚合酶链反应(PCR)扩增螺杆菌16SrDNA,阳性者再扩增幽门螺杆菌(Hp)的特异基因glmM。随机选2例阳性标本的PCR产物进行分子克隆、测序、序列分析和近缘细菌遗传进化树比较。对阳性标本进行针对幽门螺杆菌菌体蛋白的免疫组化染色。结果32.3%(11/34)的食管癌组织中发现有螺杆菌16S rRNA基因存在。2例测序及同源性比较和分析显示,食管癌组织中螺杆菌序列与Hp的16S rDNA序列有99%同源性。进化树显示2例食管癌组织中螺杆菌序列与Hp的进化距离最近。所有的阳性标本均扩增出Hp特异基因glmM。免疫组织化学染色显示阳性标本的幽门螺杆菌的蛋白表达主要位于细胞质和间质。结论人类食管癌组织中检测出螺杆菌特异基因和Hp特异性DNA,提示食管癌组织存在螺杆菌慢性感染,可能与人类食管癌的发生有关。

延龄草 续断上调抗氧化酶表达作用的比较研究

目的:观察和探讨延龄草、续断对氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达作用的影响。方法:雄性W istar大鼠40只,随机分为对照组、模型组、实验1组和实验2组。除对照组外,其余大鼠均用氟哌啶醇建立痴呆症(A lzhe im er D is-ease,AD)动物模型,实验组分别腹腔注射延龄草注射液、续断注射液。测定各组大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的含量。结果:与对照组比较,延龄草注射液、续断注射液均能使模型大鼠多种组织SOD、GSH-PX显著升高,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:延龄草和续断都能增强抗氧化酶表达作用,但对多数组织SOD和GSH-PX表达值的影响,延龄草显著强于续断。

不同临床样品肺炎支原体的分离培养

不同临床样品肺炎支原体的分离培养黄庆华叶嗣颖（同济医科大学微生物教研室，武汉４３００３０）陈桂蓝（武汉市第四医院检验科）关键词临床标本分离培养肺炎支原体属本文采用肺炎支原体（ＭＰ）选择培养基，并对不同的临床样品辅以适当的处理，获得了分离ＭＰ较好的结果...

幽门螺杆菌临床分离株的随机扩增多态性DNA指纹图分析

目的 :建立武汉及周边地区幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)感染病人胃内分离的Hp的DNA指纹图谱 ,并进行数理统计分析 ,探讨Hp基因型与疾病的相互关系 ,为临床诊断、防治及致病机制提供理论与实践基础。方法 :采取随机扩增多态性DNA指纹法 (RandomamplifiedpolymorphicDNA ,RAPD)对 4 8例病人Hp基因组DNA进行PCR反应 ,其随机引物为 :12 90 5’ GTGGATGCGA 3’。反应产物经 2 %琼脂糖凝胶电泳 ,成像存盘。用统计分析软件 (Statisticanalysissoftware,SAS)对HpDNA指纹图的相似性以及与疾病的相关性进行分析。结果 :每个菌株都有其独特的DNA指纹图 ,显示其基因的多态性 ;计算机聚类分析显示 :HpDNA指纹图可分为两大类 ,其与宿主疾病之间有一定程度的相关性 (P <0 0 5 )。结论 :(1)RAPD对HpDNA扩增结果是稳定、可靠的 ,是一种较好的分型方法。 (2 )幽门螺杆菌感染所致疾病可能与其基因型相关。