积雪草酸通过调控细胞凋亡和自噬缓解脂多糖诱导肉鸡急性肾损伤的研究

旨在探讨积雪草酸(AA)对脂多糖(LPS)诱导肉鸡肾细胞凋亡和自噬的影响。将40只1日龄肉鸡适应性饲养至7日龄,并随机分为对照组(Con)、LPS组(LPS)、低剂量AA组(LPS+AA 15 mg·kg^(-1))和高剂量AA组(LPS+AA 30 mg·kg^(-1))。AA预处理组的肉鸡连续14 d每日灌胃相应剂量AA。除Con组,其余组肉鸡在第16、18和20日龄时腹腔注射0.5 mg·kg^(-1)剂量的LPS构建急性肾损伤(AKI)模型;第21日龄时处死肉鸡并采集肾组织样品。苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学变化;计算肾脏系数和检测肾组织抗氧化酶水平;实时荧光定量(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)分别检测凋亡和自噬相关基因及蛋白的表达;免疫组织化学和免疫荧光检测细胞色素c(Cytc)和微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)蛋白在肾组织的表达与分布;TUNEL染色检测肾细胞凋亡率。结果发现,AA可减轻LPS诱导的肉鸡肾病理损伤,显著降低肾脏系数和肾组织丙二醛(MDA)含量,显著升高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性(P<0.05)。AA显著降低了LPS诱导的AKI中P 53、BAX和Caspase 3的mRNA表达,显著促进了LPS诱导的AKI中BCl2、Beclin1、ATG5、LC 3-Ⅰ和LC 3-Ⅱ的mRNA表达(P<0.05);此外,AA预处理显著降低了LPS诱导的AKI中P53、Bak1、BAX和Cleaved-Caspase3的蛋白表达(P<0.05),显著促进了LPS诱导的AKI中Beclin1、ATG5、LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达(P<0.05)。免疫组织化学和免疫荧光结果表明,AA预处理显著降低了LPS诱导的AKI中Cytc蛋白的表达与分布(P<0.001),促进了LC3蛋白在LPS诱导的AKI中的表达与分布(P<0.001)。TUNEL结果表明,AA显著降低了LPS诱导的肉鸡肾细胞凋亡率(P<0.001)。总之,AA通过抑制氧化应激、促进细胞自噬和降低细胞凋亡,缓解了LPS诱导的肉鸡AKI。此结果为AA成为潜在饲料添加剂和预防LPS诱导肉鸡AKI提供了理论依据。

积雪草酸通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路减轻脂多糖诱导肉鸡肾细胞焦亡

旨在研究积雪草酸(asiatic acid, AA)通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路减轻脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导肉鸡肾细胞焦亡的作用机制。将40只1日龄健康黄羽肉鸡适应性饲养至7日龄,随机分成4组:空白对照组(CON)、LPS诱导模型组(LPS)、AA低剂量组(LPS+AA 15 mg·kg^(-1))和AA高剂量组(LPS+AA 30 mg·kg^(-1))。AA处理组的肉鸡用对应剂量的AA预处理14 d。除空白对照组外,其余肉鸡在16、18和20日龄时腹腔注射0.5 mg·kg^(-1)的LPS构建急性肾损伤模型,在20日龄,腹腔注射LPS 12 h后处死肉鸡,并采集肾组织样品。采用苏木精-伊红染色(HE)观察肾组织病理变化;RT-qPCR法检测肾组织中HMGB1、TLR4、NF-κB、IκB、NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平;Western blot法检测肾组织中HMGB1、TLR4、P-NF-κB、NLRP3、GSDMD、IL-1β和Cleaved caspase-1/Caspase-1的蛋白表达水平;免疫组化技术检测P-IκB蛋白在肾组织中的表达水平;免疫荧光技术检测HMGB1、NLRP3和ASC蛋白在肾组织中的表达水平。结果显示,LPS会引发肾小管上皮细胞产生空泡变性以及肾小球发育不良,而经AA处理可以改善由LPS诱导引起的病理损伤。同时,LPS使肉鸡肾组织中HMGB1/TLR4/NF-κB通路和焦亡相关基因蛋白表达升高(P<0.05),AA可以显著下调由LPS诱导所导致的肾组织中HMGB1、TLR4、NF-κB、IκB、NLRP3、Caspase-1、TNF-α和IL-18的mRNA水平升高(P<0.05);TLR4、P-NF-κB、NLRP3、IL-1β和Cleaved caspase-1/Caspase-1的蛋白水平显著下降(P<0.05);免疫组化和免疫荧光结果表明,AA可以显著降低LPS所诱导的肾组织中P-IκB、HMGB1、NLRP3和ASC蛋白的表达与分布。综上所述,AA能够通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路减轻LPS诱导肉鸡肾细胞焦亡。

积雪草酸通过抑制氧化应激和铁死亡减轻脂多糖诱导的肉鸡心肌损伤的研究

旨在探讨不同浓度积雪草酸(AA)对脂多糖(LPS)诱导肉鸡心肌氧化应激和铁死亡的影响。选取50只1日龄肉鸡适应性饲养至7日龄,并随机分为5组,即对照组(Control)、LPS组(LPS)、低剂量AA组(LPS+AA 15 mg·kg^(-1))、中剂量AA组(LPS+AA 30 mg·kg^(-1))、高剂量AA组(LPS+AA 60 mg·kg^(-1))。所有AA组用相应剂量的AA连续灌胃14 d。在16、18和20日龄时,所有LPS组肉鸡腹腔注射0.5 mg·kg^(-1) LPS以建立急性心肌损伤(AMI)模型并于21日龄时处死肉鸡并采集心肌样品。通过苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理学变化;使用谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)试剂盒检测心肌组织氧化应激指标;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测心肌组织氧化应激和铁死亡相关基因和蛋白的表达情况;通过免疫组织化学法检测心肌组织中Nrf2和SLC7A11的阳性表达率;通过免疫荧光法检测心肌组织中GPX4的阳性表达率。结果发现,AA预处理可以减轻LPS诱导的心肌病理损伤;与LPS组相比,中剂量AA预处理后心肌中GSH-Px的活性显著升高(P<0.01),AA预处理均显著降低MDA的含量(P<0.05);此外,AA预处理降低了LPS诱导的心肌Keap1、HMGB1和PTGS2的mRNA表达(P<0.05),促进了Nrf2、HO1、NQO1、GCLC、GCLM、SLC7A11、FTH1和GPX4的mRNA表达(P<0.05),同时,也降低了Keap1、HMGB1的蛋白表达,促进了Nrf2、HO1、NQO1、SLC7A11、FTH1和GPX4的蛋白表达(P<0.05);免疫组织化学和免疫荧光结果表明,AA预处理可促进Nrf2(P<0.01)、SLC7A11(P<0.01)和GPX4(P<0.05)的表达。本结果首次表明,AA可通过调节氧化应激和铁死亡缓解LPS诱导的急性心肌损伤(AMI)。AA有望成为未来预防LPS诱导肉鸡AMI的潜在食品添加剂。

日粮添加黑水虻和螺旋藻对幼猫免疫功能的影响

为探究日粮中添加黑水虻和螺旋藻对幼猫生长发育和免疫功能的影响,将体重相近、健康的18只45~60日龄断奶田园幼猫随机等分为对照组(饲喂某进口品牌幼猫粮)、试验组(饲喂基于空白对照组配方,额外添加黑水虻和螺旋藻的猫粮)和空白对照组(饲喂基础配方猫粮),试验时长24 d。结果表明:与其他两组相比较,试验组的幼猫体重增重效果和粪便成型更好;猫杯状病毒(FCV)、猫细小病毒(FPV)和猫疱疹病毒(FHV)的抗体水平更高;幼猫抗氧化能力和免疫功能更强,其中免疫球蛋白水平、白细胞介素-2等免疫力指标显著升高;此外,血清中代谢物茶皂醇A和熊果酸含量的差异也进一步反映了试验组幼猫的免疫力和抗氧化能力得到了提升。综上所述,日粮中添加黑水虻和螺旋藻能促进幼猫生长发育,提高幼猫的免疫功能。

黄芪、山药和山楂对幼猫生长性能、 毛发、抗氧化、免疫指标及肠道菌群的影响

试验旨在研究黄芪、山药和山楂对幼猫生长性能、毛发质量、粪便性状、血清抗氧化、免疫指标,及肠道菌群的影响。选取18只45~60日龄的幼猫,随机分为3组,每组6个重复,每个重复1只猫。空白对照组(H组)幼猫饲喂基础幼猫粮,试验对照组(R组)幼猫饲喂市售幼猫粮,试验组(T组)在基础幼猫粮中添加0.2%黄芪、0.2%山药、0.2%山楂。试验期30 d。结果显示,T组幼猫平均日增重高于H组和R组,料重比低于H组(P>0.05)。T组幼猫毛鳞片厚度和贴服度更高。T组幼猫血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于R组(P<0.05)。T组幼猫粪便评分高于H组和R组(P>0.05),肠道菌群丰富度更高,菌群结构更相似。研究表明,幼猫粮中添加黄芪、山药和山楂可改善幼猫生长性能、粪便性状、毛发质量、抗氧化能力和免疫能力,优化肠道菌群结构,更利于幼猫健康成长。

猫肾脏淋巴瘤病例分析研究

介绍英国短毛猫肾脏淋巴瘤的诊断过程,同时对猫淋巴瘤的相关资料进行回顾,以加深对该疾病的了解,为今后对猫肾脏淋巴瘤的诊治提供参考。患猫临床表现为精神沉郁、厌食、呕吐;实验室检查可见血红蛋白(HGB)下降且血小板压积(PCT)降低,淋巴细胞数值(LYM)与尿素氮(BUN)水平偏低,对称性二甲基精氨酸(Symmetric dimethylarginine,SDMA)水平明显升高;腹部超声见右肾及肾周淋巴结肿大,肾边缘有实质性团块增生。肾脏肿物穿刺结果提示多量脱落的低分化淋巴细胞。综合上述检查结果患猫确诊为免疫母细胞来源的肾脏淋巴瘤。