性激素六项检验在妇科疾病诊断中的价值分析

探讨性激素六项检验在妇科疾病诊断中的价值。方法 抽取2020年6月-2021年9月,安徽医科大学第一附属医院妇产科收治的130例妇科疾病患者(观察组)为研究对象,并纳入同期接受健康体检的120例健康女性(对照组)。采集两组清晨空腹静脉血,用全自动化学发光免疫分析仪进行促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、催乳激素(PRL)这六项性激素指标检查。比较六种性激素在妇科疾病中的应用效果。结果 FSH、LH、E2、P、T、PRL检测结果方面,观察组性激素指标水平相较于对照组更高(均P<0.05)。月经不调者的FSH、E2、P值相较于妇科炎症、妇科肿瘤、不孕症更高,妇科炎症患者的LH、T值相较于妇科肿瘤、月经不调、不孕症更高,不孕症患者的PRL值相较于妇科炎症、妇科肿瘤、月经不调更高(次之为妇科肿瘤)(均P<0.05)。结论 性激素指标(六项)在妇科疾病中均呈高表达,不同妇科疾病患者间的性激素指标检测值存在一定差异,能为其病情鉴别诊断提供量化参考依据,有较高推广应用价值。

羊水细胞胎儿染色体分析及其在产前诊断中的意义

目的介绍一种较为完善的羊水细胞培养方法,并通过对羊水细胞染色体检查的结果分析,探讨其在产前诊断中的意义。方法无菌条件下,取羊水细胞培养,实验过程中尝试了一些新的方法,收获、制片、G显带,镜下核型分析。结果产前诊断抽取羊水培养120例,116例培养成功,成功率为96.6%。其中6例染色体异常,异常率占5.1%,异常病例中三体综合征占多数;另有2例是染色体异态性。结论120例羊膜腔穿刺者均未发生感染和流产,且实验过程中尝试改进的一些经验使羊水细胞培养更具有实用性。胎儿羊水细胞染色体检查是目前安全、有效的诊断胎儿染色体的方法,在诊断检查中占重要地位。

114例原发性闭经患者细胞遗传学分析研究

目的通过细胞遗传学研究,在染色体水平对原发性闭经患者发病原因进行探讨。方法对114例原发性闭经经过培养、制片、烤片、胰酶消化、Giemsa染色后,在镜下观察30个核型分析3个核型,有异常者加倍观察60～100个核型。结果在114例患者中,45例发生染色体核型异常,异常率为39.5%,分别是数目异常、结构异常、完全型睾丸女性化染色体等,其中最常见的是数目异常,即Turner综合征。结论原发性闭经患者染色体异常发生率高,均进行细胞遗传学检查,以明确病因。

荧光原位杂交技术在产前遗传学诊断中的应用

目的研究荧光原位杂交(FISH)技术在产前遗传学疾病诊断中的意义。方法收集产前血清学筛查高危的孕妇羊水标本6例,采用21、18号染色体探针对间期和中期细胞进行FISH检测。结果杂交良好,背景暗、信号明显,6例标本中1例胎儿确诊为21三体综合征,余5例正常。所有结果与染色体核型分析一致。结论FISH检测简便、快速、准确性高、特异性强,对协助临床咨询及产前遗传学诊断具有重要意义。

FISH技术在产前诊断中应用及检测结果分析

目的探讨国产探针在产前诊断临床应用的可行性,对荧光原位杂交(FISH)技术检测结果的准确性进行分析。方法采用FISH技术对107例未培养羊水标本及8例培养失败的羊水标本进行染色体数目异常的检测,采用染色体核型分析技术作为对照。结果采集的107例羊水标本中,培养成功99例,成功率为92.5%;培养未成功的8例均行脐带血核型分析,结果核型正常。107例孕妇中,检测出6例胎儿染色体核型异常,其中1例为结构异常;107例未培养羊水标本FISH检测成功106例,成功率99.1%,检测出5例异常。8例羊水培养失败标本再行FISH,成功7例,成功率87.5%,所得结果与染色体核型分析结果均相符。FISH检测目标染色体的结果与染色体核型分析结果相符率为100%。结论国产探针在产前诊断临床应用中是可行的;目前FISH检测方法应与染色体核型分析法互相结合做出准确的检测结果。FISH技术应用于产前诊断不仅可以加快产前诊断的速度,而且可以延长胎儿羊水染色体检查在产前诊断中的时间窗。

FISH技术和染色体核型分析联合检测体外受精-移植后胎儿与葡萄胎共同妊娠1例

目的探讨胎儿和葡萄胎共同妊娠病例的诊断方法。方法结合超声、临床检查、病理检查、染色体核型分析和荧光原位杂交技术(FISH技术)诊断1例体外受精-移植后胎儿和葡萄胎共同妊娠的病例,并随访患者的预后情况。结果孕妇因阴道流血较多而行钳刮术终止妊娠。刮出物送病理和遗传学分析,病理结果符合葡萄胎的诊断,染色体核型分析和FISH技术的结果相符,均显示胎儿和葡萄胎的染色体均为二倍体,结合病理结果、超声显示和血HCG水平,诊断为完全性葡萄胎与胎儿共存。结论葡萄胎是一种少见的妊娠滋养细胞疾病。可用染色体核型分析和FISH技术检测胎儿是否整倍体,并结合临床特点等决定临床治疗方案。FISH技术所需时间短,便于临床及时诊治。

117例羊水细胞培养结局及影响因素的探讨

目的探讨影响羊水细胞培养结局的相关临床因素。方法对117例孕妇行羊膜腔穿刺术抽取羊水行羊水细胞培养。对孕妇的年龄、孕周、外周血WBC、中性粒细胞(N)、羊膜腔穿刺指征、羊水的WBC、RBC等指标与培养结局进行相关性分析。结果117例羊水培养中成功112例,成功率为95.73%。孕妇年龄、外周血WBC、N计数与羊水细胞培养结局的差异有统计学意义(P<0.05);孕周、穿刺指征、羊水WBC和RBC计数与羊水细胞培养结局的差异无统计学意义(P>0.05);羊水WBC计数与孕妇外周血WBC、N计数之间无相关性(P>0.05)。结论孕妇的年龄、外周血WBC和N计数对羊水细胞培养结局有影响,高龄、外周血WBC≥10×109/L、N≥7.5×109/L易导致羊水培养失败。建议羊膜腔穿前检查孕妇外周血常规。

罗氏易位患者通过植入前遗传学诊断获妊娠

目的通过胚胎植入前遗传学诊断(PGD)技术使遗传性不孕不育夫妇获得后代。方法 1例原发性不孕、慢性输卵管炎患者行常规体外受精和胚胎移植(IVF-ET)失败后,夫妇双方检查染色体核型,男方为罗氏易位,45,XY,t(13;14)。对卵母细胞浆内单精子注射(ICSI)受精后第3天适宜活检的胚胎进行逐个活检,每个胚胎取出1个卵裂球,经细胞裂解及细胞核固定,使用13号染色体位点特异性探针、14号染色体端粒探针与变性后核内染色体杂交,对荧光信号进行分析。13号及14号染色体均有两个信号的为正常或平衡的易位携带者,选择这两种可能的胚胎给予移植。结果超促排卵后取卵20个,成熟18个,ICSI后正常受精16个,第3天适宜胚胎活检的有12个,13号及14号染色体信号均两个的胚胎6个,第4天移植3个致密桑椹期胚胎,1个致密桑椹期胚胎行玻璃化法冷冻,另2个因检查为正常胚胎未继续发育而被丢弃。移植后14 d尿人体绒毛膜促性腺激素(HCG)阳性,移植后35 d阴道超声见1个孕囊并可见胚芽及原始心管搏动,为单胎妊娠。结论针对13号及14号染色体易位的检查于活检后24 h内出结果,罗氏易位患者可通过PGD技术获得后代。

介入性产前诊断技术实施中的心理护理体会

目的对介入性产前诊断技术实施中孕妇心理进行初步探讨,为做好产前诊断心理护理提供依据。方法采用焦虑自评量表(SAS),在来本院产前诊断中心行介入性产前诊断技术的孕妇中进行调查,给孕妇讲明调查表的填写方法,由孕妇本人填写。结果行介入性产前诊断的孕妇皆有高危指征,其心理较健康孕妇复杂,针对其心理分析表明,50%的孕妇恐惧自身损伤,77.6%的孕妇焦虑胎儿损伤,97.8%的孕妇对胎儿健康的焦虑,3.2%的孕妇担心隐私泄露。结论对进行介入性产前诊断技术的孕妇进行心理护理,疏导这些孕妇的心理压力,有利于介入性产前诊断技术的顺利开展。

植入前胚胎遗传学筛查中两轮荧光原位杂交技术的建立

目的建立两轮荧光原位杂交技术(FISH)对单个胚胎细胞进行植入前遗传学筛查(PGS)的实验方法以增加高龄妇女、反复种植失败、习惯性流产等不孕不育夫妇的妊娠率,降低流产的风险。方法对常规行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)及卵母细胞浆单精子注射(ICSI)的卵母细胞于受精后第3天行胚胎活检,取1～2枚卵裂球,裂解、核固定后,分别使用MultiVysionTMPB探针(13、16、18、21、22号染色体位点特异性探针)和15、X、Y 3种着丝粒探针杂交,对荧光信号进行分析。结果两轮FISH均可获得较稳定的信号,每种色彩显示2条信号说明细胞核中被检测染色体是2个。结论两轮FISH可以使检查的染色体数目达到8种,48 h内出结果,应用于PGS周期,为选择合适的胚胎移植提供了一定的依据。

原位杂交技术用于快速诊断胎儿常见染色体数目异常的研究

目的评价荧光原位杂交技术在胎儿常见染色体数目异常快速诊断中的应用价值。方法应用13、18、21、X、Y染色体区域特异性DNA探针对50例具有产前诊断适应证孕妇的羊水中胎儿细胞进行原位杂交,每张玻片至少计数50个细胞。检测13、18、21、X、Y染色体变异情况。同时对羊水中胎儿细胞培养后行细胞遗传学染色体核型分析,以此监测对比荧光原位杂交结果的准确性。结果所测50份标本的13、18、21、X、Y染色体数目均与常规染色体核型分析的结果相符。其中,有1例检测结果显示为21-三体,与其产前血清学筛查结果、超声检查显示胎儿多发畸形以及羊水细胞培养染色体核型分析结果相符。结论荧光原位杂交技术检测过程简单、快速,特异性较强,且灵敏度较高,是一种可用于临床的快速产前诊断方法。

用囊胚内细胞团建立小鼠胚胎干细胞系的尝试

目的建立小鼠129品系胚胎干细胞(ES)系。方法分离囊胚内细胞团接种至小鼠胚胎成纤维细胞,培养、传代以获得细胞系,通过形态观察、碱性磷酸酶检查、体内外分化实验予以鉴定。结果共获取12个囊胚,培养后有9个内细胞团增殖,消化传代,分离出2株克隆;形态观察具有明显的ES细胞形态,染色体核型检查为XY,碱性磷酸酶检查细胞呈阳性,体外分化实验表明可自发分化为外、中和内胚层细胞,体内分化实验获得典型的畸胎瘤,并具备小鼠特异性表面标志物Oct-4、SSEA-1。结论应用本方法建立了两株129品系胚胎干细胞系,并证实其符合小鼠胚胎干细胞的特征。

204对自然流产夫妇染色体核型分析

目的分析自然流产与染色体异常核型之间的关系。方法采用人外周血淋巴细胞培养,常规G显带技术行染色体核型检查,后结合临床资料对其进行分析。结果204对自然流产夫妇中,检出染色体异常16例(平衡易位15例,罗伯逊易位1例),检出率3.82%,较一般人群的染色体异常率为高,差异有显著性(P<0.01);检出染色体多态性39例,检出率9.56%;流产例次染色体异常组(2.94±0.85)及多态性组(2.76±1.45)均较正常染色体组(1.05±1.39)为高,差异皆有显著性(P<0.01)。结论人体夫妇染色体异常是流产的重要原因之一,但染色体多态性方面的因素也不可忽视。对自然流产夫妇进行常规的染色体检查及遗传咨询具有一定的临床意义。

染色体异常与疾病之间关系的临床分析

目的研究染色体异常与临床疾病发生之间的关系。方法采用人外周血淋巴细胞培养,常规G显带技术进行核型分析。结果298例检查者中,染色体异常59例,染色体检出率18.8%。染色体异常疾病主要发生于有不良妊娠史、男性少弱精症、男女性发育异常及智力低下。在59例染色体异常中,数目异常占20.34%,嵌合体占5.08%,结构异常占20.34%,染色体多态性占49.15%,有3例社会性别为女性,染色体核型为男性。结论染色体异常会导致临床疾病的发生,遗传咨询和产前诊断对染色体异常疾病有预防作用。

310对染色体多态性夫妇妊娠结局的结果研究

目的研究染色体多态性与妊娠、妊娠期疾病、妊娠结局的关系。方法收集310对染色体多态性夫妇资料,分为女方多态组、男方多态组和双方多态组3组,对患者是否妊娠、妊娠期并发症和合并症、妊娠结局、围生儿出生身长、体质量等做跟踪随访。结果女方多态组流产率为12.24%(6/49),男方多态组流产率为11.76%(12/102),双方多态组流产率为33.33%(7/21),与男方多态组比较,双方多态组流产率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),与女方多态组比较,双方多态组流产率明显增高,但差异无统计学意义。而3组足月产率和早产率比较差异均无统计学意义。3组患者围产儿的活产率和死产率以及出生时体质量、身长差异均无统计学意义。多态性患者未足月胎膜早破(PPROM)的发生率高达4.46%。结论夫妻双方多态性与不良妊娠结局成正相关性。

反复种植失败患者经植入前遗传学筛查获妊娠的研究

目的通过微阵列比较基因组杂交技术进行胚胎植入前遗传学筛查（PGS）使反复种植失败夫妇获得后代。方法 1例继发性不孕、慢性输卵管炎患者经常规体外受精和胚胎移植（IVF-ET）治疗3个周期均未获妊娠。夫妇双方检查染色体核型正常。本周期对卵母细胞质内单精子注射（ICSI）受精后第5天（D5）或第6天（D6）,选择适宜活检的囊胚进行活检,每个囊胚取出3-5个胚胎滋养层细胞。经细胞裂解及全基因组扩增后,对扩增产物进行荧光标记,与微阵列比较基因组芯片进行杂交（a CGH）,并对杂交后的芯片进行扫描和结果分析。最终选择整倍体的平衡胚胎进行移植。结果经控制性促排卵后获卵24个,成熟24个,ICSI后正常受精14个,有13个正常受精卵发生卵裂,D5接受胚胎活检的囊胚有2个,D6接受活检的囊胚有2个。活检后胚胎均行玻璃化冷冻超低温保存。a CGH检查显示平衡的整倍体胚胎共2个,其中1枚为D5胚胎,另1枚为D6胚胎。活检后3个月行胚胎解冻移植,移植1枚D6胚胎。移植后第14天患者尿人体绒毛膜促性腺激素（HCG）示阳性,移植后第35天经阴道超声见1个孕囊并可见胚芽及原始心管搏动,为单胎妊娠。结论 反复种植失败患者可通过植入前遗传学筛查获得临床妊娠。

国产探针用于羊水胎儿细胞染色体FISH检测的影响因素分析及对策

目的探讨FISH技术用于羊水胎儿细胞染色体检查实验中遇到的问题和解决办法及实验中的体会。方法应用国产的探针(CSP18/CSPX/CSPY探针组和GLP13/GLP21探针组)对116例羊水中的细胞进行检测,从而判断胎儿13、18、21、X和Y染色体的数目有无异常。结果预实验中15例羊水标本检测失败,通过摸索实验条件后,有100例羊水的FISH检测成功。与染色体核型分析的结果相比较,准确率为99%。一例不符合的羊水胎儿染色体核型为46,XY,Yqh+。结论通过100多例羊水FISH实验的摸索,列出几点在实验中的心得体会,不断完善国产探针的实验条件,从而使实验的成功率和准确率都得到稳固和提高。

生育能力异常的人群染色体多态性及畸变临床数据分析

目的报告本科室生育能力异常人群的染色体多态性及畸变检出率的结果。方法回顾性分析从2010年1月—2015年12月就诊于安徽医科大学第一附属医院生殖中心生育功能异常(包括不孕不育、少弱畸精子症、胚停、复发性流产及胎儿畸形等)的8084例患者,于我中心行外周血细胞遗传学G显带染色体核型分析的检查结果。结果 8084例生育功能异常患者中,检出染色体变异核型1329例,占比16.43%。其中包括染色体多态性1009例,占比12.48%(1009/8084),染色体多态性的患者中,染色体长臂次缢痕qh+患者749例(包括1qh+、9qh+、16qh+共545例,Yqh+共210例),D/G组染色体短臂及随体多态性变异160例,9号染色体臂间倒位75例,46,XY,inv(y)3例,其他染色体(非9号及Y染色体)臂间倒位14例,小Y共2例。检及异常核型的染色体共320例,占比3.96%(320/8084),其中染色体易位患者186例(含罗氏易位40例,染色体相互易位145例);嵌合体12例;46,X,i(X)4例;46,X,del(X)3例;46,X,del(Y)2例;45,XO有7例;47,XN,+21检出5例;47,XXX 8例;47,XXY 55例;47,XYY 7例;47,XY,+mar4例;48,XY,+mar,+mar 1例;其他较少见异常核型27例。结论人类染色体多态性及畸变与人类生育能力异常(不孕不育、少弱畸精子症、胚停、复发性流产及胎儿畸形)等可能存在相关性。

罕见47,XX,del(Y)(q11.2)/46,XX嵌合型克氏征1例报告并文献复习

目的探讨罕见47,XX,del(Y)(q11.2)/46,XX嵌合型克氏征的诊断和治疗经验。方法我们报告1例27岁男性患者,因"婚后未避孕2年未育"就诊。3次离心后精液分析提示无精子症,我们进一步对患者的性激素、阴囊腹、盆腔超声、染色体核型及Y染色体微缺失进行了检查。结果(1)性激素、阴囊腹、盆腔超声、染色体核型及Y染色体微缺失检查:促卵泡生成素(FSH)(44.78mIU/ml)、促黄体生成素(LH)(22.19 m IU/ml)明显升高,睾酮(T)(5.22nmol/L)低于正常范围;超声检查示双侧睾丸体积减小(约2ml),余无异常;2次外周血染色体核型分析(400带,G显带,30个细胞)示:46,XX;Y染色体微缺失检查6个经典位点(s Y84、s Y86、s Y127、s Y134、s Y254、s Y255)及SRY基因均存在。(2)进一步分析其父母核型,父亲:46,X,del(Y)(q11.2)[21]/45,X[17]/46,X,Yqh-[2],母亲:46,XX,1qh+;(3)鉴于其父亲存在染色体嵌合,再次增加患者核型分析细胞数至100个,证实患者核型为47,XX,del(Y)(q11.2)[15]/46,XX[85],属罕见的嵌合型克氏征。结论染色体核型异常是男性不育症的重要病因,但临床常规使用的G显带法染色体核型分析并不能充分发现低比例染色体嵌合的存在,详细的家系分析结合Y染色体微缺失检查对于鉴别46,XX男性性反转综合征和低比例嵌合型克氏征十分必要。