人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立

目的建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法培养人子宫内膜癌细胞系Ishikawa,制成肿瘤细胞悬液,于裸鼠（10只）右侧肩胛背部皮下注射,每只裸鼠注射约1×107个细胞。接种后每日观察裸鼠精神、活动、饮食、排便等状况及是否有肿瘤生长、肿瘤生长速度等。以接种部位可见或触及肿瘤小结节为成瘤标准,若第一次移植失败则考虑行二次瘤细胞接种。发现肿瘤生长后每3 d计算肿瘤体积。当肿瘤最长径达15 mm或出现皮肤破溃时,立即处死荷瘤裸鼠;否则于接种第49天将荷瘤裸鼠处死、剥出肿瘤,测量瘤体长径,称取瘤体质量。取肿瘤组织切片后行HE染色,观察肿瘤组织病理变化。结果有1只裸鼠第一次接种失败,在第二次接种后移植成功,一次成瘤率为9/10。在接种第40天和第46天各发现1只裸鼠瘤体表面皮肤破溃,发现后脱颈处死荷瘤裸鼠,测得肿瘤最长径分别为12.2、12.6 mm,肿瘤体积分别为505.14、510.30 mm3,肿瘤质量分别为0.88、0.86 g;至接种第49天,存活的7只裸鼠移植瘤瘤体表面皮肤完整,无破溃缺损,处死裸鼠后完整剥离肿瘤,测得肿瘤最长径为11.7~14.0 mm,瘤重0.86~1.23 g。取移植瘤组织进行病理检查,肿瘤组织大体表现与镜下表现符合人子宫内膜癌的特点。结论采用将Ishikawa细胞株接种于裸鼠右侧肩胛皮下的方式成功建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,且移植瘤组织和细胞保留了人子宫内膜癌的病理特征。

miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平对多囊卵巢综合征患者肥胖及代谢紊乱的影响

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者外周血淋巴细胞miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平与肥胖及相关代谢紊乱的关系。方法收集PCOS患者60例(非肥胖组22例,肥胖组38例)。电化学发光法检测其血清促卵泡素(b FSH)、促黄体生成素(b LH)、雌二醇(b E2)、孕激素(b P)、睾酮(b T)、空腹胰岛素(FINS)水平,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖(Glu),实时荧光定量PCR(q PCR)法检测淋巴细胞miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平。肥胖组控制体重后复测上述指标。结果肥胖组b T、Glu、FINS、HOMA-IR水平均明显高于非肥胖组(P均<0.05);肥胖组控制体重后BMI、b LH、b T、Glu、FINS、HOMA-IR水平较控制前均明显降低(P均<0.05)。肥胖组miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水均明显高于非肥胖组(P均<0.05),且控制体重后较控制前亦明显降低(P均<0.05)。miR-21的表达量与b T呈正相关(r=0.342,P=0.008),miR-27a、miR-27b的表达量与FINS呈正相关(r=0.413,P=0.001;r=0.397,P=0.002)。结论 miR-21、miR-27a和miR-27b可能参与PCOS患者肥胖及相关代谢紊乱的进程。

小干扰RNA沉默CXCR4和CXCR7对人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨针对趋化因子受体基因CXCR4和CXCR7的小干扰RNA(siRNA)对人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法:将子宫内膜癌Ishikawa细胞株注射于裸鼠肩胛背部皮下建立动物模型,待肿瘤最长径达5~7mm后,将所有荷瘤裸鼠随机分组,分别给予CXCR4-siRNA和CXCR7-siRNA单独或联合瘤体内注射,并以阴性对照siRNA和生理盐水作为对照组,每3 d治疗一次,共6个治疗周期。观察各组裸鼠移植瘤的生长,比较各组移植瘤的体积和质量的差异,并以实时荧光定量RT-PCR、Western blotting和免疫组化技术验证CXCR4和CXCR7的基因沉默效果。结果:成功建立Ishikawa细胞裸鼠移植瘤模型,与阴性对照siRNA组和空白对照组相比,CXCR4 siRNA治疗组、CXCR-siRNA治疗组和CXCR4-siRNA+CXCR7-siRNA治疗组的肿瘤的生长均明显受到抑制(均P<0.05);CXCR4-siRNA和/或CXCR7-siRNA瘤体内直接注射能显著下调CXCR4、CXCR7 mRNA(均P<0.05)和蛋白(均P<0.01)的表达。结论:siRNA干扰CXCR4和CXCR7表达能够有效抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤的生长。