TPARM对人结直肠癌细胞株SW480增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响

目的 探讨四肽重复结构域(TTC)12,也被称为TPARM,其表达对人结肠癌细胞SW480增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法 将人结肠癌SW480细胞株分为3组:NC组、TPARM-siRNA组和Scr-siRNA组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法和Western印迹法检测各组TPARM mRNA和蛋白表达。细胞计数试剂盒(CCK)8法、平板克隆法测定各组TPARM表达对SW480细胞增殖的影响。Western印迹法检测TPARM表达对各组周期相关蛋白及凋亡相关蛋白的表达。流式细胞术检测各组TPARM表达对SW480细胞凋亡的影响。Transwell小室侵袭实验和划痕实验观察TPARM表达对SW480细胞侵袭、迁移能力的影响。结果 与NC组、Scr-siRNA组比较,转染TPARM-siRNA后,SW480细胞中TPARM mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。分别与NC组和Scr-siRNA组比较,TPARM-siRNA转染组SW480细胞增殖明显减少(P<0.05),周期蛋白依赖性激酶(CDK)2、CDK4、CDK6的蛋白表达明显下降(P<0.05);SW480细胞凋亡水平明显增加(P<0.05),髓细胞白血病序列(Mcl)-1、B淋巴细胞瘤(Bcl)-xl及Bcl-2的蛋白表达水平明显下降,Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达明显升高(P<0.05);SW480细胞的侵袭和迁移能力被抑制。结论 TPARM可能通过使结直肠癌细胞增殖增加和凋亡减少及促进结肠癌细胞的侵袭和迁移能力,从而在结直肠癌发生发展中发挥作用。

相和与歌行

根据《汉书》记载，汉武帝刘彻为了制礼作乐，创作新的音乐曲调供自己享受，也为了想通过各地民歌来了解人民对政治的看法和意见，让当时的“乐府”（即音乐机关）去收集各地的民歌。

别旁茶通过上调CAV-1对炎症性肠病细胞模型增殖、凋亡的影响

目的 探讨别旁茶是否通过调控小窝蛋白-1(caveolin-1,CAV1)的表达影响炎症性肠病(IBD)细胞模型的增殖和凋亡。方法 采用RT-qPCR和蛋白免疫印迹验证CAV-1-siRNA的敲低效率和pcDNA-CAV-1的过表达效率。采用CCK-8测定别旁茶处理对各组HT-29细胞的增殖影响。蛋白免疫印迹检测别旁茶处理对各组凋亡相关蛋白的表达。蛋白免疫印迹检测pcDNA-CAV-1和别旁茶处理对Occludin和Claudin-1的蛋白表达水平的影响。结果 在HT-29细胞中CAV-1-siRNA的敲低效率和pcDNA-CAV-1的过表达效率得到验证。别旁茶可以通过上调CAV-1促进IBD细胞模型中HT-29细胞的增殖水平和抗凋亡蛋白的表达。别旁茶可以通过上调CAV-1来促进Occludin和Claudin-1的蛋白表达水平。结论 别旁茶通过上调CAV-1来促进Occludin和Claudin-1的蛋白表达水平,从而促进HT-29细胞的增殖水平并抑制其凋亡水平,在IBD细胞模型中发挥保护作用。

别旁茶苷治疗溃疡性结肠炎小鼠的疗效及机制探讨

目的:探讨别旁茶苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗作用及其相关的作用机制。方法:18只C57BL/6小鼠随机分为对照组、UC组和UC+别旁茶苷组,每组6只。UC组和UC+别旁茶苷组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液7 d,建立UC小鼠模型。对照组小鼠自由饮用不加DSS的水。造模期间,UC+别旁茶苷组小鼠连续7 d给予别旁茶苷灌胃,剂量20 mg/(kg·d);对照组和UC组小鼠给予等体积蒸馏水灌胃。每日观察小鼠体质量和疾病活动指数(DAI)变化情况。给药7 d后处死小鼠,测量结肠长度,HE染色观察结肠炎症情况,Western blot检测各组小鼠结肠组织抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xl、小窝蛋白-1(CAV-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、紧密连接蛋白Occludin和Claudin-1的表达情况。统计分析3组小鼠上述指标的差异。结果:所有小鼠均存活。与对照组比较,UC组小鼠体质量更低,DAI评分更高,结肠更短,差异均具有统计学意义(均P<0.05),结肠组织炎性浸润严重。与UC组小鼠相比,UC+别旁茶苷组小鼠体质量更高,DAI评分更低,结肠更长,差异均具有统计学意义(均P<0.05),结肠组织炎性浸润得到缓解。Western blot结果显示,与对照组比较,UC组小鼠结肠组织Bcl-2、Bcl-xl、CAV-1、Occludin和Claudin-1的表达明显更低,iNOS表达明显更高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。UC+别旁茶苷组小鼠结肠组织中Bcl-2和Bcl-xl、CAV-1、Occludin和Claudin-1的表达明显高于UC组,而iNOS表达低于UC组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:别旁茶苷能缓解UC模型小鼠的症状,其作用机制可能与上调抗凋亡蛋白表达、通过CAV-1/iNOS途径保护肠黏膜屏障相关。

转录因子HIF-1α通过正调控TPARM基因表达影响人结肠癌细胞株SW480的增殖、凋亡

目的探讨转录因子HIF-1α是否通过调控TPARM的表达从而影响结肠癌细胞的增殖及凋亡。方法通过生物信息学分析转录因子HIF-1α与TPARM的启动子序列是否结合。敲低和过表达HIF-1α后检测TPARM的mRNA和蛋白表达水平。双荧光素酶报告实验验证HIF-1α是否与TPARM的启动子序列有结合。CCK-8和免疫印迹实验检测HIF-1α和TPARM对结肠癌细胞株SW480增殖和调亡的影响。结果生物信息学网站提示转录因子HIF-1α与TPARM启动子的部分序列有结合位点。敲低和过表达HIF-1α能调控TPARM的mRNA和蛋白表达水平, 两者关系为正相关。双荧光素酶报告实验验证了转录因子HIF-1α能促进TPARM启动子活性。CCK-8和免疫印迹实验验证了HIF-1α通过上调TPARM来发挥促进结肠癌细胞株SW480增殖以及抗凋亡的作用。结论转录因子HIF-1α通过促进TPARM的mRNA和蛋白水平表达, 影响结肠癌细胞SW480的增殖、凋亡水平, 为确定结肠癌治疗的有效分子靶点提供了实验依据。