珊瑚姜油对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨珊瑚姜油(ZCO)对宫颈癌He La细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法 5~80 mg·L^(-1)ZCO体外作用于He La细胞。CCK-8检测细胞毒性;吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色,倒置显微镜观察细胞形态变化;比色法检测caspase-3酶活性;Western blotting检测hsp-70表达;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期。结果 ZCO以时间-剂量依赖性方式抑制He La细胞株增殖,镜下见典型细胞凋亡形态,caspase-3酶活性亦呈剂量依赖性增加。随药物浓度增加,hsp-70蛋白表达量逐渐减少,G2期细胞逐渐增加,细胞阻滞在G2/M期。结论 ZCO对He La细胞株具有抑制增殖及促凋亡作用,其机制是激活凋亡关键酶,使hsp-70蛋白表达量逐渐下降,使细胞周期阻滞在G2/M期。

AKT反馈激活拮抗4EGI-1对黑素瘤A375细胞的抑制作用

目的:探索4EGI-1对黑素瘤A375细胞中AKT通路的激活作用及后者对4EGI-1抑制A375细胞增殖的影响。方法:用20、40、60μmol/L的4EGI-1处理黑素瘤A375细胞12、24 h,Western boltting检测4EGI-1对A375细胞中AKT磷酸化的影响;A375细胞分别受4EGI-1(40μmol/L)、BEZ235(5μmol/L)、4EGI-1(40μmol/L)+BEZ235(5μmol/L)联合处理,CCK-8实验和流式细胞术分别检测4EGI-1、BEZ235单独或联合处理对A375细胞增殖和细胞周期的影响,Western boltting检测对细胞周期相关蛋白Cyclin D1表达的影响。结果:4EGI-1促进A375细胞中AKT的磷酸化,且具有剂量依赖性;而BEZ235能够拮抗4EGI-1对AKT的促磷酸化作用。与4EGI-1组和BEZ235组相比,联合组的A375细胞增殖抑制率显著升高[24 h时,4EGI-1组和BEZ235组抑制率分别为(7.6±1.2)%和(2.4±3.1)%,而联合组抑制率为(19.8±4.3)%;P<0.05],S期细胞比例显著降低(4EGI-1组和BEZ235组S期细胞比例分别为25.65%和25.82%,联合处理组细胞S期为13.08%;P<0.05),Cyclin D1表达显著降低(4EGI-1组和BEZ235组Cyclin D1相对表达值为0.81±0.04和0.76±0.04,联合处理组细胞Cyclin D1相对表达值为0.25±0.03;P<0.05)。结论:AKT反馈激活拮抗4EGI-1对黑素瘤A375细胞的抑制作用,联合使用AKT抑制药物能够增强4EGI-1对A375细胞的生长抑制作用。

乳房外Paget病误诊为湿疹1例

患者男，65岁。阴囊部红斑伴瘙瘁11年余。曾多次以湿疹治疗，无明显好转。4个月前出现糜烂、渗出，并伴有明显恶臭，予以手术切除。皮损组织病理：表皮内可见呈巢的Paget细胞，真皮可见累及，基底部皮损未发现肿瘤细胞，切缘见肿瘤累及。免疫组化：CKL（＋），CEA（＋），MelanA（-），HMB-45（-），EMA（＋），GCDEP（＋），CK5／6（-），CK7（＋），CK20（-），p53（＋），p63（-），ki67阳性率约10％-20％。诊断：乳房外Paget病。

姜黄挥发油对黑色素瘤wm9细胞增殖与凋亡的影响

目的研究姜黄挥发油对黑色素瘤wm9细胞增殖与凋亡的影响。方法应用不同浓度的姜黄挥发油作用于黑色素瘤的wm9细胞。用细胞增殖计数试剂盒(CCK8)检测增殖抑制率,倒置显微镜观察细胞形态学变化,ELISA法检测Caspase-3酶活性,流式细胞检测细胞周期和凋亡。结果姜黄挥发油在不同浓度下,对黑色素瘤wm9细胞作用表现不同,当药物浓度达到40mg/L,倒置显微镜下可见到典型的凋亡细胞;Caspase-3酶活性随着药物浓度的递增,呈现药物浓度-酶活性正相关性;经姜黄挥发油作用后的wm9细胞被阻滞在G_2/M期。结论姜黄挥发油诱导黑色素瘤wm9细胞凋亡的机制与细胞周期G2/M期阻滞、Caspase酶活化参与凋亡有关。

松油烯-4-醇对人黑色素瘤WM35细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究松油烯-4-醇(T4O)对WM35细胞增殖及凋亡的影响并探讨其作用机制。方法:不同浓度T4O体外作用WM35细胞。CCK-8测抑制率;AO/EB染色后倒置显微镜观察细胞形态;比色法测Caspase-3酶活性;流式细胞术测凋亡及周期;JC-1测线粒体膜电位(MMP);蛋白印迹测Bax及Bcl-2表达。结果:T4O以时间-剂量依赖性方式抑制WM35细胞增殖。T4O诱导WM35细胞凋亡,呈剂量依赖性,随药物浓度增加,Caspase-3酶活性逐渐增强,MMP逐渐降低,Bax/Bcl-2比值升高,周期阻滞在G2/M期。结论:T4O对WM35细胞有抑制增殖及促凋亡作用,其机制是通过线粒体途径使凋亡相关蛋白Bax表达上调、Bcl-2下调,激活凋亡途径关键酶Caspase-3,使细胞周期阻滞在G2/M期。

姜黄挥发油对人恶性黑色素瘤细胞株A375细胞增殖及凋亡的影响

目的姜黄挥发油（ tumienc volatile oil,TV0 ） 对多种肿瘤细胞具有抑制作用,能显著减少肿瘤数目,缩小瘤体体积.文中研究TV0 对人表皮黑色素瘤A3 7 5细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法观察不同浓度TV0在体外对A375细胞的作用,CCK8 法测不同浓度TVO（2.5-160mg/ L）在不同时间段（24、48、7211）对人375细胞的增殖抑制率;根据CCK8 结果选取有效最低药物浓度进行实验.吉姆萨染色,倒置显微镜观察细胞凋亡形态;D N A片段化检测细胞凋亡;流式细胞术测细胞凋亡率; Western blot检测Caspase-3及BIRC7 蛋白表达.结果 CCK-8检测显示TV0 浓度为0 - 160mg/L ,抑制率达0 - 4 0 %,并呈时间依赖关系;TV0 诱导A375细胞凋亡,吉姆萨染色下可见药物诱导后细胞增殖变慢,贴壁性降低,细胞间隙增大,形态变得不规则,有核固缩、核碎裂及核溶解,提取DNA凝胶电泳药物作48 h 后,可见凋亡典型的DNA梯状条带,并随药物浓度增加细胞核碎裂越明显;浓度为2.5、5、10mg/ L 的TVO,A3 7 5凋亡率分别为12.7%、13.6%、15.4%,死亡率仅为 0.1% ;与 0mg/L TV0 作用 48 h 后 Caspase-3 表达量（0.412±0.060）比较,2.5、5、1 0 mg/L TV0 作用后表达量（1.021 土0.02、1.238±0.07、1.484±0.09）逐渐增加（P 〈0.05）;与 0 mg/L TV0 作用 4 8 h 后 BIRC7 蛋白表达量（1.538± 0.060）比较,2.5、5、10mg/L TVO作用表达量（1.298±0.02、1.136±0.07、0.54 1±0.09）逐渐下降（P 〈0.05）. 结论TVO对人恶性黑色素瘤细胞株A375细胞有抑制增殖作用,同时有促其凋亡作用,具有抗肿瘤细胞功效,可能与通过下调细胞凋亡抑制蛋白BIRC7表达,激活细胞凋亡途径关键酶Caspase-3,进而抑制肿瘤细胞分化、增殖与促进凋亡有关.

姜黄挥发油对WM35细胞增殖及凋亡的作用机制

目的研究姜黄挥发油（turmericvolatileoil，TVO）对人表皮黑素瘤WM35细胞增殖及凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法不同浓度（5～160mg／L）TVO体外作用WM35细胞。噻唑蓝（MTT）法测增殖抑制率；倒置显微镜观察细胞形态变化，碘化丙啶（PI）染色，观察荧光数目；DNA片段化检测细胞凋亡；比色法测Caspase-3酶活性；实时荧光定量RT—PCR测Bax及Bcl-2基因mRNA表达水平；流式细胞仪测细胞凋亡及周期。结果TVO对WM35细胞有抑制增殖的作用，且呈时间一剂量依赖性（P〈O．05）。TVO诱导WM35细胞凋亡，呈剂量依赖性（P〈0．05），Caspase-3酶活性随药物浓度增加而增强（P〈0．05），Bax／Bcl-2表达水平比值随药物浓度增加而升高（P〈0．05）；细胞周期阻滞在s期。结论TVO对WM35细胞有抑制增殖及促进凋亡的作用，其机制是使凋亡相关基因Bax表达水平上调、Bcl-2表达水平下调，激活细胞凋亡途径关键酶Caspase-3，将细胞周期阻滞在s期，进而抑制肿瘤细胞分化与增殖。

松油烯-4-醇对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨松油烯-4-醇（T4O）对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法不同浓度（5~80μmol/L）T4O体外作用于U266细胞。CCK-8法检测增殖抑制率;AO/EB染色,倒置显微镜观察细胞凋亡形态;比色法检测Caspase-3酶活性;流式细胞术检测细胞凋亡及周期;JC-1染色检测细胞线粒体膜电位。结果 T4O对U266细胞有增殖抑制作用,呈时间-剂量依赖性（P〈0.05）。T4O诱导U266细胞凋亡,呈剂量依赖性（P〈0.05）,随药物浓度增加,Caspase-3酶活性逐渐增强（P〈0.05）,线粒体膜电位逐渐降低（P〈0.05）,细胞周期被阻滞在G2期。结论 T4O对U266细胞有抑制增殖及促凋亡作用,其机制是激活细胞凋亡途径关键酶Caspase-3,使细胞线粒体膜电位降低,并且使细胞周期阻滞在G2期,进而抑制肿瘤细胞分化与增殖。

姜黄挥发油对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖及侵袭力的影响

目的:探讨姜黄挥发油(TVO)对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株增殖及侵袭力的影响。方法:分别用不同浓度的TVO(1.25～160 mg/L)行体外干预细胞,应用MTT法检测细胞存活率;细胞划痕实验检测160 mg/L TVO对细胞迁移能力的影响;应用Transwell细胞侵袭试验检测细胞侵袭能力;用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:随着TVO浓度的升高及干预时间的延长,SH-SY5Y细胞存活率逐渐减低(P<0.01),凋亡率逐渐增加;经160 mg/L TVO的培养液培养12、24、48 h后,其细胞迁移度明显低于对照组(P<0.01);随TVO浓度增高,细胞侵袭能力逐渐减弱(P<0.01),且当浓度达到160 mg/L时,侵袭力与顺铂无明显差异。结论:TVO能有效地抑制SH-SY5Y细胞增殖及侵袭。

浅议公路桥梁施工过程中的质量控制措施

近年来,我国重视公路等基础设施的完善,全国公路里程数不断增加,对桥梁施工技术提出更高要求。本文以公路桥梁施工过程中的质量控制措施为核心进行研究,首先指出公路桥梁工程施工质量管理和控制的重要性,其次,分析公路桥梁施工质量管理过程中存在的问题,并提出相应的解决措施,为进一步提高公路桥梁施工质量管理提供理论支持。

姜黄挥发油对THP-1细胞增殖及凋亡的影响

目的研究姜黄挥发油（TVO）对急性单核细胞白血病THP-1细胞株增殖及凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法不同浓度（5～80mg／L）TV0体外作用于THP-1细胞。应用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖抑制率；经吉姆萨染色，倒置显微镜观察细胞形态变化；DNA片段化测细胞凋亡；流式细胞仪检测细胞凋亡及周期；比色法测Caspase-3酶活性。结果TVO具有抑制THP-1细胞株增殖的作用，并表现出时间一剂量依赖性。同时，TVO能诱导THP-1细胞凋亡，呈现剂量依赖性，镜下见典型细胞凋亡形态，Caspase-3酶活性随药物浓度增加而增强。经TVO作用后的细胞周期被阻滞在G1期，G2／M期及s期细胞数减少。结论TVO对THP-1细胞株具有增殖抑制及促凋亡的作用，其机制可能是使细胞周期阻滞在G1期，且激活了细胞凋亡途径中关键酶Caspase-3活性，从而抑制肿瘤细胞的增殖与分化。

姜黄挥发油的研究进展

根据国内外相关文献,就姜黄挥发油的提取工艺、化学成分、药理作用、临床应用及其不良反应等方面进行综述。姜黄挥发油具有广泛的医药应用价值,在药理、临床应用、质量研究等方面均值得进一步研究并加以充分开发和利用。

姜黄挥发油对皮肤鳞癌A431细胞增殖及凋亡的影响

为研究姜黄挥发油（turmeric volatile oil,TVO）对皮肤鳞癌（CSCC）A431（以下简称A431）细胞增殖及凋亡的影响并探讨其机制,该实验采用不同质量浓度（5~80 mg·L^-1）TVO体外作用于A431细胞,利用细胞增殖/毒性检测试剂盒（celcounting kit-8,CCK-8）法检测细胞增殖活性;倒置显微镜观察细胞形态变化;吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）双染色荧光显微镜观察A431细胞凋亡情况;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（caspase-9）表达量。结果显示,随TVO质量浓度的增加对A431细胞生长具有显著的抑制增殖作用,呈剂量依赖关系,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）。与对照组比较,不同质量浓度TVO组均出现细胞皱缩及细胞破碎现象,细胞凋亡率增加,并呈剂量依赖性,caspase-3,caspase-9的相对表达量上调,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）,提示了TVO能抑制皮肤鳞癌A431细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与上调caspase-3,caspase-9的表达有关。

芳姜黄酮衍生物对A375人黑素瘤细胞增殖及凋亡作用的机制研究

目的：研究一种芳姜黄酮衍生物（ATD）对人皮肤黑色素瘤A375细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度（5、10、20、40、80μmol/L）ATD、长春新碱及芳姜黄酮体外作用A375及人皮肤成纤维细胞（HSF）48 h。CCK？8法检测细胞增殖抑制率；吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色，倒置显微镜观察细胞凋亡形态；DNA片段化检测细胞凋亡；比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase？3）活性；流式细胞仪检测细胞凋亡及周期。结果ATD、长春新碱及芳姜黄酮对A375细胞有抑制增殖作用，且呈剂量依赖性（ATD：R2=0.99，F=340.96；长春新碱：R2=0.99，F=349.19；芳姜黄酮：R2=0.89，F=25.41，均P〈0.05），三者IC50分别为（15.96±0.02）、（77.00±0.04）及（356.95±0.01）μmol/L。当药物浓度为5μmol/L及10μmol/L时，ATD对HSF增殖抑制率分别为（8±0.06）%和（25±0.02）%，长春新碱为（33±0.04）%和（29±0.08）%，芳姜黄酮为（49±0.09）%和（34±0.07）%；ATD对A375细胞抑制率分别为（26±0.06）%和（39±0.02）%，长春新碱为（8±0.04）%和（17±0.08）%，芳姜黄酮为（6±0.09）%和（10±0.07）%，与二甲基亚砜相比，差异均有统计学意义（P＜0.05），且ATD对A375细胞增殖抑制活性强于长春新碱及芳姜黄酮（P＜0.05），但对HSF细胞毒性却明显低于长春新碱及芳姜黄酮（P＜0.05）。ATD、长春新碱及芳姜黄酮均可诱导A375细胞凋亡，caspase？3活性随3种药物浓度增加而增强，且药效为ATD〉长春新碱〉芳姜黄酮。流式细胞仪检测证实，3种药物都能诱导细胞发生不同程度凋亡，同芳姜黄酮及长春新碱相比，ATD能显著诱导细胞凋亡，且以晚期凋亡为主。随药物浓度增加，ATD组G1期A375细胞逐渐增多，G2期及S期细胞数明显减少。结论 ATD对A375细胞有抑制增殖及促凋亡作用，该作用明显强于芳姜黄酮及长春新碱，其机制可能是激活caspase？3，使细胞周期阻滞在G1期，进而抑制肿瘤细胞分化与增殖。

芳姜黄酮衍生物对WM35细胞增殖及凋亡的影响

目的研究芳姜黄酮衍生物(ATD)对人皮肤黑色素瘤WM35细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法不同浓度(5~80μmol/L)ATD体外作用WM35细胞。CCK-8法检测增殖抑制率;AO/EB染色、倒置显微镜观察细胞凋亡形态;DNA片段化检测细胞凋亡;比色法检测Caspase-3酶活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测Bax及Bcl-2蛋白表达。结果 ATD对WM35细胞有增殖抑制作用,呈时间-剂量依赖性(P<0.05)。ATD诱导WM35细胞凋亡,呈剂量依赖性(P<0.05),Caspase-3酶活性随药物浓度增加而增强(P<0.05)。随药物浓度增加,Bax/Bcl-2比值逐渐升高。结论 ATD对WM35细胞有抑制增殖及促凋亡作用,其机制是使凋亡相关蛋白Bax表达上调、Bcl-2表达下调,激活细胞凋亡途径关键酶Caspase-3,进而抑制肿瘤细胞分化与增殖。