生物催化肌醇生产葡萄糖醛酸转化体系的构建与优化

葡萄糖醛酸(D-glucuronic Acid),由于其良好的解毒性能,广泛应用于医药、保健、食品及医美领域。随着合成生物学的高速发展,利用工程菌生产葡醛酸的生物发酵法取代化学合成成为一种趋势。研究结果表明:最佳诱导条件为在OD_(600)为0.5时,培养基中加入0.2 mmol/L的IPTG,26℃诱导8 h,构建的重组菌株BL21/pETDuet-miox可以实现肌醇氧化酶(MIOX)的高效表达;然后将肌醇氧化酶载体质粒pETDuet-miox转化进不同的表达宿主中,根据转化产量最佳表达宿主为Escherichia coli Rosetta(DE3);以肌醇氧化酶作为催化剂催化肌醇生产葡萄糖醛酸的最佳催化形式为冷冻破壁后菌体;得出最佳催化条件为在pH值为7.5的MOPS缓冲体系中,催化温度30℃时,对菌体添加量选择100 g/L湿菌体,底物质量浓度选定2 g/L。在此条件下肌醇转化率80.3%,葡醛酸产量达到1.606 g/L。本项研究为葡萄糖醛酸生物合成提供新的方法,也为葡醛酸的低成本工业化生产奠定基础。

高等植物大叶藻研究进展及其对海洋沉水生活的适应

综述和讨论了目前对海洋沉水植物大叶藻的研究进展 ,主要包括 :(1 )形态解剖结构特点 ,(2 )基本生理研究 ,(3 )耐盐机理 ,(4)生存限制因子 ,(5 )问题与展望。其中着重讨论了大叶藻与海洋沉水生活相适应的一些特点 ,特别是其对海水盐度的适应机理。

盐分胁迫对大叶藻某些胞内酶耐盐性及其生理功能的影响(英文)

分别以 3个盐度 (10 0 %、15 0 %和 2 0 0 %人工海水 )处理大叶藻 (ZosteramarinaL .)植株 5d ,然后在体外测定了大叶藻叶片中两个胞内酶 (PEP羧化酶和苹果酸脱氢酶 )的耐盐性和在不同盐度介质中 (10 0 %、15 0 %、2 0 0 %、30 0 %人工海水 )经不同盐度 (10 0 %、15 0 %和 2 0 0 %人工海水 )海水预处理的大叶藻叶片光合速率以及一些生理指标的改变。结果表明在高于海水的盐度下 ,大叶藻叶片中丙二醛 (MDA)、还原性糖和Na+ ,Cl-含量及渗透势 (绝对值 )均随海水盐度的提高而增加 ,但K+ 和游离氨基酸的含量均降低。从处理 5d的植株中提取的苹果酸脱氢酶在体外每一盐度下 ,其活性 (A)大小依次为 :A10 0 %ASW>A150 %ASW>A2 0 0 %ASW(artificialseawater) ,并且其活性对盐度敏感(低盐度激活高盐度抑制 ) ;但从 10 0 %及 2 0 0 %人工海水 (ASW)处理的植株中提取的PEP羧化酶的活性在体外对盐度不敏感 ,而从 15 0 %人工海水处理的植株中提取的PEP羧化酶的活性对盐度具有很高的抗性。实验结果显示由15 0 %人工海水处理的植株 ,在每一特定的盐度下其光合速率均高于另外两组处理 (10 0 %ASW和 2 0 0 %ASW) ,并且 3个处理的光合速率均与其PEPC在不同盐度下的活性表现相一致。但是 ,经 15 0 %ASW处理的大叶藻植株是否?

86例特重烧伤患者血小板计数变化和深静脉血栓的预防

目的回顾86例特重烧伤患者伤后血小板计数(PLT)的变化,探讨深静脉血栓的预防办法。方法选50例健康志愿者作为对照组,取入院时伤后4、7、14、21、28 d的PLT值与对照组进行比较。结果入院时比对照组PLT稍有升高(P<0.05),伤后4 d明显小于对照组(P<0.01),伤后7 d恢复至正常范围,伤后14 d达到高峰,伤后14 d、21 d均明显大于对照组(P<0.01),28 d有下降,但乃高于对照组(P<0.01)。结论特重烧伤后患者PLT经短暂时间下降后增高,持续时间较长,其潜在的危害性是深静脉血栓形成;深静脉血栓预防包括尽量避免长时间深静脉置管,鼓励卧床患者早期肢体活动和锻炼,预防性用药可干扰血小板的活性和凝血因子的产生。

逆行指掌侧固有动脉岛状皮瓣修复指端缺损的临床效果研究

目的 观察逆行与顺行指掌侧固有动脉岛状皮瓣修复指端缺损的疗效。方法 回顾性选取本院2010年1月至2020年12月收治的指端缺损58例患者,分为逆行组(施行逆行指掌侧固有动脉岛状皮瓣修复,通过缝接神经重建皮瓣感觉)与顺行组(施行顺行指掌侧固有动脉岛状皮瓣修复,皮瓣携带指掌侧固有神经),每组29例患者。比较皮瓣感觉、近侧指间关节(PIP)及远侧指间关节(DIP)活动度、密歇根手部功能量表(MHQ)评分、并发症发生情况。结果 逆行组TPD明显高于逆行组(P<0.05)。与对应健侧指PIP及DIP的活动度相比,伤侧逆行组和顺行组相应指骨间关节活动度均有降低,但伤侧逆行组PIP及DIP的活动度均高于顺行组(P<0.05)。两组患者术后的MHQ评分,在全手功能、日常活动、工作能力、疼痛、外观、手功能满意程度方面比较无明显差异(P>0.05)。两组术后常见并发症有术指感染、皮瓣暗紫、术指肿胀,但两组并发症总发生率比较无明显差异(P>0.05)。结论 逆行及顺行指掌侧固有动脉岛状皮瓣均可有效修复指端缺损,其中逆行皮瓣较顺行皮瓣可改善术后指骨间关节活动度,但在顺行皮瓣在感觉重建方面更有优势。

游离股前外侧皮瓣修复拇指环形Ⅳ度烧伤和脱套伤8例

对8例拇指环形Ⅳ度烧伤和脱套伤患者采用游离股前外侧皮瓣包裹创面,进行软组织修复及功能重建。8例皮瓣全部存活,7例为Ⅰ期愈合;1例电击伤皮瓣术后22h出现静脉危象,积极处理后皮瓣成活。回访结果,皮瓣恢复保护性感觉,拇指对指对掌功能恢复。提示股前外侧皮瓣有切取面积大、部位隐蔽、对主要血管不造成损伤、血管蒂较长、皮瓣术后可恢复保护性感觉等优点,是修复拇指环形Ⅳ度烧伤和脱套伤较理想的方法。

GmHSFA1基因克隆及其过量表达提高转基因大豆的耐热性

热激转录因子在调节植物对逆境胁迫应答和热激蛋白基因表达方面起重要作用。采用生物信息学和比较基因组学方法结合RACE技术从大豆基因组中克隆到一个新的热激转录因子基因GmHsfA1,其cDNA全长1 781 bp,包含1个1 533 bp的开放阅读框,编码含有510个氨基酸残基的蛋白质(GenBank登录号为AY458843)。与其他转录因子的分子结构相似,GmHSFA1也含有4个典型的结构功能域-DNA结合域、寡聚域、核定位信号和C端激活域。BLAST分析表明,GmHSFA1与其同源性最高的番茄热激转录因子LpHSFA1之间的氨基酸序列相似性为52．46％。RT-PCR、Northern和遗传转化结果显示:1)GmHsfA1在大豆的不同组织中呈现组成型表达模式;2)常温下转基因大豆植株的GmHsfA1表达水平明显高于非转基因对照;3)GmHsfA1的过量表达激活了转基因大豆植株中热激蛋白基因GmHsp22在非诱导条件下的转录,并加强了高温胁迫下另2个热激蛋白基因GmHsp23和GmHsp70的表达;4)转GmHsfA1大豆植株的耐热温度(达52℃)明显高于非转基因植株。上述结果说明,GmHsfA1的过量表达激活或促进其下游3个热激蛋白基因的转录或表达,明显提高了转基因大豆植株的耐热能力。

赖草根茎分蘖相关基因LRC1的克隆及表达

运用同源基因克隆技术从典型的克隆植物赖草中克隆了其根茎分化相关基因LRC1,通过RACE获得其全长cDNA为1.598kb,开放阅读框(ORF)为1299bp,编码432个氨基酸。同源分析结果显示,赖草LRC1基因属于GRAS转录因子家族,与控制水稻分蘖及烟草侧枝发生的相应蛋白具有很高的同源性,与控制水稻分蘖的MOC1基因同源性达到91%。实时定量检测结果表明,LRC1基因在赖草初花期的根茎节、根茎节间、根茎尖和穗、茎、叶片6个组织部位均有表达,但在根茎中的表达量显著高于其它部位,特别是在分蘖产生的根茎节其表达量是叶片的43倍。

黄河黑山峡河段的功能定位和开发任务

从协调水沙关系、解决宁蒙河段防洪防凌问题、黄河水资源合理配置、区域生态建设、西北电网和西电东送的稳定安全运行等方面,分析了黑山峡河段开发的功能定位和开发任务,即:协调水沙关系和防洪防凌;协调水量调度和发电运用之间的矛盾,充分发挥水资源综合效益;为附近地区供水,改善生态环境;合理配置全河水资源,满足国家长远发展战略需要。

黄河流域大中型病险水库存在问题及除险加固对策

黄河流域大中型水库不仅在工农业生产的发展方面发挥了巨大的作用 ,还提高了河流的防洪能力 ,减轻了洪涝灾害损失。由于重建设、轻管理 ,加上投入不足 ,水库工程存在大量的安全隐患 ,影响了水库效益的正常发挥。统一黄河流域大中型病险水库除险加固规划 ,加速病险水库治理 ,是十分必要和紧迫的。在分析大中型病险水库存在主要问题的基础上 ,提出了除险加固工程措施和非工程措施。

黄河流域大中型病险水库存在的问题及除险加固措施

目前 ,黄河流域大中型水库中有相当一部分存在着防洪标准低 ,渗漏、破损严重 ,工程管理薄弱等问题 ,因而在规划期间 ,有必要在工程设施和工程管理方面采取措施 ,对大中型病险库进行除险加固 ,主要措施有 :加高大坝 ,增建泄洪设施 ,采用灌浆及预应力锚索等措施对建筑物进行补强加固。在工程管理方面 ,新建改建防汛公路 ,改建大坝安全监测设施 。

游离组织瓣移植修复Ⅳ度烧伤创面

目的探讨因各种原因烧伤所致的Ⅳ度烧伤创面缺损,应用游离组织瓣移植修复创面的手术方法和临床效果。方法对因电烧伤、热压伤及意识丧失状态下的烧伤等所致的Ⅳ度烧伤不同部位创面缺损患者73例,采用游离组织瓣移植手术进行缺损创面的修复。结果 67例组织瓣完全成活,3例组织瓣远端2～5cm坏死,经带蒂皮瓣或植皮治疗修复;2例移植后术中见组织瓣动脉供血障碍,经处理,把组织瓣修成全厚皮予供瓣区回植,修复创面;1例足踝部电烧伤,因血管损伤严重,组织瓣坏死。结论应用游离组织瓣移植不失为一种修复Ⅳ度烧伤创面缺损的有效方法。

三门峡库区潼三段存在的问题及治理措施

三门峡库区潼关—三门峡河段目前存在的主要问题是河势变化大、塌滩塌岸严重。初步分析认为 ,三门峡水库在“蓄清排浑”运用方式下 ,库岸结构松散、工程布局不够合理及工程数量少是河势变化和塌滩塌岸的主要原因 ,并据此提出了在潼三河段采取上段以防冲为主 ,中段以防冲为主、防浪为辅 ,下段以防浪为主、防冲为辅的工程治理措施 。

黄河潼关至三门峡大坝河段治理措施探讨

黄河潼关至三门峡河段位于黄河中游,在黄河治理中占据着较为重要的位置。三门峡水库建成后,该河段库岸坍塌剧烈,两岸相继修建了一系列防护工程,取得了一定成效。概略分析了目前潼关至三门峡河段在库岸坍塌和治理工程方面存在的问题,工程治理的外部制约条件,提出了治理原则和措施。

苯酚烧伤48例治疗分析

2000年1月至2008年1月，我院共收治苯酚烧伤患者48例，其中治愈47例，中毒、死亡1例，现总结报告如下。

家兔氢氟酸烧伤后血心肌酶的变化

目的观察家兔氢氟酸烧伤后心肌酶的变化及不同治疗方法的效果。方法39只家兔均用55%氢氟酸造成3%TBSA烧伤创面,随机分为3组。A组12只,静脉注射等渗盐水5ml·kg-1·h-1;B组15只,给予等渗盐水的同时,在伤后0.5、1.0、3.0、6.0、12.0h静脉注射0.1mol/L葡萄糖酸钙,每次0.1mmol/kg;C组12只,在输注的等渗盐水中加入硫酸镁0.25mmol/kg,并于伤后0.5、1.0、3.0、6.0、12.0h静脉注射0.1mol/L葡萄糖酸钙,每次0.05mmol/kg。各组家兔均于伤后1.0、3.0、6.0、12.0、24.0、48.0、72.0h抽静脉血检测心肌酶。结果伤后心肌酶较伤前明显升高,12￣24h达到高峰,A组与B、C组比较,伤后不同时相点开始CPK、LDH、HBDH差异有显著性(P<005)。结论家兔氢氟酸烧伤对心肌有一定程度损害,采用静脉补充钙剂、镁剂治疗对减轻心肌损伤有作用。

黄河流域重要支流规划意见

黄河支流众多,系统开展规划工作的支流较少,支流的治理开发需要在黄河流域综合规划的指导下进行。根据黄河主要支流的自然特点和流域治理开发要求,对支流进行了初步分类。对湟水、洮河、清水河、大黑河、窟野河、无定河、汾河、渭河、伊洛河、沁河、大汶河等重要支流提出了治理开发与保护的指导性意见及主要治理措施,对其他支流提出了分类治理开发与保护的规划建议。

股前外侧皮瓣游离移植修复Ⅳ度烧伤创面

电烧伤、热压伤等引起的Ⅳ度烧伤，除造成体表组织的严重损伤外，还常伴有深部的肌腱、骨骼等烧伤外露，创面修复困难。1998年7月至2010年6月笔者采用股前外侧皮瓣游离移植修复Ⅳ度烧伤创面39例，获得了较满意疗效，报道如下。

带蒂背阔肌皮瓣转移修复Ⅳ度烧伤创面

目的观察应用带蒂背阔肌皮瓣转移修复Ⅳ度烧伤创面的临床效果方法2004年4月至2014年3月应用带蒂背阔肌皮瓣修复头颈部、胸腹部、肩关节和上肢Ⅳ度烧伤创面13例，皮瓣面积28cm×11cm×45cm×19cm，以胸背动脉为血管蒂顺行转移修复12倒，以肋间和腰动静脉为血管蒂逆行转移I例。结果12例移植皮瓣完全成活，创面Ⅰ期愈合，1例大面积肌皮瓣远端1~2cm起水疱，经换药治疗愈合。13例经随访〉1年，皮瓣质地柔软，外形良好、结论带蒂背阔肌皮瓣修复Ⅳ度烧伤创面的疗效可靠，副作用少，在头颈部、胸腹部。