腹膜间皮细胞过氧化物酶体增殖物活化受体γ的表达及其配体对CD40和细胞间黏附分子1的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)在大鼠腹膜间皮细胞 (RPMCs)中的表达以及脂多糖(LPS)的调节作用,并探讨PPAR-γ天然配体15d-PGJ2及人工合 成配体cightazone对RPMCs表达CD40和ICAM-1的影响。方法 分离及培养RPMCs,常规传代 及鉴定,取第2代细胞用于实验研究。LPS不同浓度(0．1、1．0、10、50及100μg／ml)、LPS(1 μg／ml)处理后不同时间点及15d-PGJ2(3 μmol／L)、ciglitazone(10μmol／L)作用细胞36h后收 集细胞。RT-PCR检测PPAR-γ、CD40以及ICAM-1 mRNA表达。免疫细胞化学检测PPAR-γ在 RPMCs中的分布。Western印迹检测PPAR-γ及ICAM-1蛋白表达。结果 (1)常规培养的RPMCs 表达一定量PPAR-γ,表达部位主要分布于RPMCs细胞核内,在细胞浆微弱表达。(2)随着LPS 浓度逐渐增大,PPAR-γ蛋白表达水平呈逐渐增高的趋势,LPS浓度为10μg／ml时其表达为最 高峰。LPS(1μg／ml)作用12 h时PPAR-γ蛋白表达最强,PPAR-γ1表达高于PPAR-γ2;之后显 著降低,持续至72 h。(3)LPS刺激后RPMCs CD40mRNA表达显著增强;15d-PGJ2、ciglitazone显著 降低CD40 mRNA表达(P均<0．01)。(4)LPS刺激后RPMCs ICAM-1蛋白表达显著增加;15d-PGJ2 增加LPS介导的ICAM-1 mRNA表达(P<0．01),但显著抑制ICAM-1蛋白表达(P<0．05)。 ciglitazone对LPS介导的ICAM-1 mRNA和蛋白表达均有显著抑制作用(P均<0．05)。结论 RPMCs结构性表达PPAR-γ。LPS调节PPAR-γ表达呈现先增强后抑制趋势。PPAR-γ配体可显著 抑制LPS介导的CD40 mRNA和ICAM-1蛋白的表达。提示RPMCs功能性表达PPAR-γ,可能通 过负性调节炎症介质分泌而参与腹腔局部防御。