以病例为基础的检验报告解读在检验医学科住院医师临床思维培养中的应用

检验报告正确解读是合格的检验医师必须具备的重要临床能力。同济大学附属东方医院检验医学科专业基地以《住院医师规范化培训内容与标准(2022年版)》检验医学科培训细则为指导,运用以多个病例为基础的病例分析教学方法,实施检验报告分层递进解读的教学流程,结合多种教学形式,探索病例教学与临床实践相结合的临床思维培养教学模式,为培养具有岗位胜任力的检验医学科住院医师提供教学思路。

以病例为基础的临床思维培养在微生物检验医师培养中的实践

随着检验医学实验室体系建设日臻标准化,检验技术手段不断更新,检验医学进入快速发展时期。目前,检验结果判读日趋复杂,临床医师在疾病的诊疗过程中对检验结果的依赖性也越来越强。在多学科交融发展的背景下,检验医师作为连接检验医学和临床医学的桥梁显得愈发重要。检验医师规范化培训在我国起步较晚,一直处于摸索前进阶段。临床微生物学属于检验医学的亚专业。近年来,该领域技术不断更新迭代,检测方式逐渐从传统形态学向基因诊断转换。由于该学科是针对微生物生命体的特殊学科,进而成为紧密联系临床的重要应用型学科。培养优秀的微生物检验医师成为当前检验医师规范化培训的重要任务。该专业规范化培训目的是培养具备丰富理论知识、掌握扎实的基本技能、沟通技能良好、适应感染性诊疗需求的微生物检验医师。该文将通过实际案例由点到面、由浅入深探讨如何利用病例教学引导和建立临床微生物检验医师的临床思维。

IS256与医院感染表皮葡萄球菌耐氨基糖苷类抗菌药物的关系

目的了解医院感染表皮葡萄球菌对不同类型氨基糖苷类抗菌药物的敏感特征,分析插入序列(IS)256与表皮葡萄球菌耐氨基糖苷类抗菌药物的关系。方法收集2007年2月至2007年7月外科病区中引起医院感染的表皮葡萄球菌48株,利用纸片扩散法测定细菌对4种氨基糖苷类抗菌药物(庆大霉素、奈替米星、链霉素和阿米卡星)药敏特征;构建IS256特异性引物,利用聚合酶链反应(PCR)检测48株细菌中IS256分布状况。结果48株临床分离的表皮葡萄球菌对4种氨基糖苷类抗菌药物的药敏特征分别为:对庆大霉素的耐药率为69%,敏感率为31%;对奈替米星的耐药率为8%,敏感率为79%,中介率为13%;对链霉素的耐药率为42%,敏感率为35%,中介率为23%;对阿米卡星的耐药率为15%,敏感率为75%,中介率为10%。全部临床分离株中,有25株细菌检出IS256。在庆大霉素耐药菌株中,IS256检出率高达70%,与敏感菌相比差异具有统计学意义(P<0.01);而对其他3种抗菌药物耐药的菌株中,IS256的检出与耐药无明显相关性(P>0.05)。结论表皮葡萄球菌临床分离株对氨基糖苷类抗菌药物存在不同程度耐药。IS256与表皮葡萄球菌对庆大霉素耐药密切相关。

表皮葡萄球菌生物膜形成与细菌耐药性的相关性分析

目的探讨表皮葡萄球菌临床分离株生物膜的形成情况,分析其生物膜形成与细菌耐药性的相关性。方法收集2014年1月至2015年2月住院患者血标本分离出的表皮葡萄球菌62株,采用生物膜形成试验和聚合酶链式反应(PCR)扩增试验检测细菌生物膜,并采用纸片扩散法(K-B法)进行细菌药物敏感性试验。结果利用生物膜形成试验检出生物膜阳性菌株23株,检出率为37.1%;PCR扩增试验检出icaA基因27株,检出率为43.5%,差异无统计学意义(P>0.05);两种方法同时阳性的菌株为14株。生物膜阳性菌株对所测抗菌药物的耐药率普遍高于生物膜阴性菌株,其中对庆大霉素、青霉素G、苯唑西林、左旋氧氟沙星、头孢西丁的耐药率比较差异有统计学意义(P<0.05),所有菌株对万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀均敏感。结论两种方法对表皮葡萄球菌生物膜的检出率无明显差异,生物膜阳性菌株耐药率普遍高于生物膜阴性菌株。

IS256与院内感染金黄色葡萄球菌耐氨基糖苷类抗生素的关系

目的：分析院内感染金黄色葡萄球菌药敏特征及其对不同类型氨基糖苷类药物的耐药特征;分析插入序列IS256与院内感染金黄色葡萄球菌耐氨基糖苷类抗生素的关系。方法：收集2007年1月~2007年4月外科病区中引起院内感染的金黄色葡萄球菌75株,利用纸片扩散法检测细菌对3种氨基糖苷类抗生素（庆大霉素、链霉素和阿米卡星）药敏特征;构建IS256特异性引物,利用PCR扩增技术检测75株细菌中IS256分布状况。结果：75株院内感染金黄色葡萄球菌对氨基糖苷类抗生素存在较高耐药率,分别为庆大霉素：82.7%,链霉素：90.7%,阿米卡星：78.7%;插入序列IS256的检出率在金黄色葡萄球菌对庆大霉素不同药敏组中有显著差异（P〈0.01）,在耐药菌中检出率为88.7%,而在敏感菌和中介菌株中检出率为8.3%和0%,IS256的检出率在链霉素和阿米卡星耐药菌株中差别无统计学意义（P〉0.05）。结论：院内感染金黄色葡萄球菌有明显多重耐药特征,且对氨基糖苷类抗生素耐药率较高,插入序列IS256与金黄色葡萄球菌对庆大霉素耐药有关。

利用IRS-PCR技术分析金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌基因多态性

目的:利用IRS-PCR技术分析院内感染金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌基因组多态性,以期进行更加行之有效的院内感染监控。方法:收集重症监护病房中引起院内感染的金黄色葡萄球菌23株和铜绿假单胞菌10株;利用IRS-PCR方法进行基因组多态性分析。结果:金黄色葡萄球菌表现明显同源性,与质控菌株显著不同;同病房不同来源铜绿假单胞菌则呈现不同型别多态性特征。结论:重症监护病房短期内存在金黄色葡萄球菌暴发流行;利用IRS-PCR技术进行细菌多态性分析快速、准确、可靠,而且可用于不同菌种,是用于流行病学监测的有效方法。

2013年上海市细菌耐药性监测

目的了解2013年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法对上海市40所医院的临床分离菌进行药敏试验。其中包括28所三级医院和12所二级医院,采用CLSI 2013年版标准判断结果。结果总计98 185株临床分离菌,革兰阳性菌26 655株,占27.1%,革兰阴性菌71 530株,占72.9%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(金葡菌)(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为50.8%和77.6%。在二级医院和三级医院MRSA、MRCNS的平均检出率分别为55.1%、80.6%和49.8%、77.0%。葡萄球菌属中未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。726株儿童肺炎链球菌非脑膜炎分离株中青霉素敏感、中介和耐药(PSSP、PISP和PRSP)的检出率分别为56.7%、15.6%和27.7%,107株成人分离株为91.6%、2.8%和5.6%。发现35株屎肠球菌和17株粪肠球菌对万古霉素耐药(VRE)。根据表型推测,多数VRE为VanA基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属和奇异变形杆菌中产ESBLs菌株的检出率分别为61.3%、37.1%和39.5%。上述3种细菌中产ESBLs菌株的检出率在二级医院和三级医院的检出率分别为63.0%、31.6%、56.3%和60.7%、38.7%、33.5%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为5.8%和6.6%。铜绿假单胞菌和不动杆菌属对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为25.3%、24.3%和52.6%、56.0%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中有少数菌株为对所有测试药物耐药的广泛耐药株。分离自尿液标本中的肠球菌属和大肠埃希菌对磷霉素的耐药率低。结论细菌耐药性仍对临床抗感染治疗构成严重威胁,尤其是二级医院中某些细菌的耐药率高于三级医院,应引起高度关注。

2014年上海市细菌耐药性监测

目的了解2014年上海市细菌耐药性监测情况。方法采用纸片扩散法(K-B法)或自动化仪器法对上海市40所医院的临床分离菌进行药敏试验。包括28所三级医院和12所二级医院,其中含3所儿童医院。采用CLSI 2014年版标准判断结果。结果总计102 113株临床分离菌,革兰阳性菌27 482株,占26.9%;革兰阴性菌74 631株,占73.1%。MRSA和MRCNS的检出率分别为47.4%和79.8%。MRSA、MRCNS在二级医院和三级医院的平均检出率分别为51.1%、79.9%和46.6%、79.8%。葡萄球菌属中未发现万古霉素和替考拉宁耐药株。845株儿童非脑膜炎分离株中青霉素敏感(PSSP)、中介(PISP)和耐药(PRSP)株的检出率分别为70.1%、14.6%和15.4%;167株成人分离株的PSSP、PISP和PRSP分别为97.6%、1.2%和1.2%。发现67株屎肠球菌和14株粪肠球菌耐万古霉素。根据PCR测序,多数万古霉素耐药肠球菌为van A和van M基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中ESBL的检出率分别为59.4%、35.9%和30.1%。上述ESBL菌株在二级医院和三级医院的检出率分别为61.6%、31.6%、35.0%和58.9%、36.9%、29.5%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率均为7.0%。鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中有少数对所有测试药物耐药的广泛耐药株。分离自尿液标本中的肠球菌属和大肠埃希菌对磷霉素的耐药率低。结论细菌耐药性仍对临床构成严重威胁,临床需合理规范应用抗菌药物,避免耐药株的广泛传播。

耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌产β内酰胺酶研究

目的了解鲍曼不动杆菌对13种抗生素耐药性及β内酰胺酶基因携带情况,为临床合理用药及控制医院感染提供依据。方法收集临床分离鲍曼不动杆菌共80株,其中亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌(imipenem resistant acinetobacter bauman-nii,IRAB)50株,亚胺培南敏感株(imipenem sensitive acinetobacter baumannii,ISAB)30株。采用琼脂稀释法检测上述细菌对13种抗菌药的MIC,三维试验检测AmpC酶,EDTA纸片协同试验检测金属酶表型。PCR检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、AmpC、IMP-1、IMP-4、VIM-2编码基因。结果 50株IRAB中MIC50>128mg/L的抗菌药有阿米卡星、环丙沙星、哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮、头孢西丁、磺胺甲口恶唑-甲氧苄啶,MIC50在32～128mg/L的抗生素有美罗培南、头孢哌酮-舒巴坦、头孢吡肟、头孢他啶,MIC50<8mg/L的抗生素有左氧氟沙星和多黏菌素B。对30株ISAB,MIC50<8mg/L的药物有美罗培南、阿米卡星、头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟和多黏菌素B。IRAB和ISAB中AmpC酶表型阳性的分别为42株(84%)和9株(30%),金属酶表型检测全部阴性。IRAB中PCR检测到36株OXA-23阳性(72%)、45株AmpC阳性(90%),ISAB中PCR检测到4株OXA-23阳性(13.3%)、20株AmpC阳性(66.7%),IRAB与ISAB相比,OXA-23阳性检出率差异有统计学意义(P<0.01),而AmpC阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。80株鲍曼不动杆菌中OXA-51均为阳性。结论 OXA-23是我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌携带的主要β内酰胺酶基因。

耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌膜蛋白机制研究

目的研究耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌膜蛋白机制并了解其流行型别。方法收集仁济医院、瑞金医院和上海市第六人民医院鲍曼不动杆菌共85株,其中亚胺培南和美罗培南耐药菌49株,敏感菌36株。用细菌基因组回文结构重复序列-聚合酶链反应(REP-PCR)分析其流行型别,PCR扩增检测碳青霉烯类水解酶及金属酶,对阳性扩增菌株进行DNA测序分析,同时用超声波和超速离心法提取细菌的膜孔蛋白并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行分析。结果49株耐亚胺培南和美罗培南鲍曼不动杆菌中,REP-PCR分析结果以A型为主,与敏感菌株存在很大差异;耐药菌株中oxa-51均为阳性,45株为oxa-23阳性;36株敏感菌株中检测到1株oxa-58阳性,29株为oxa-51阳性;金属酶(VIM和IMP-1/4型)均阴性;膜蛋白分析显示,在36株耐药株中38 000附近条带缺失,而在30株敏感株中有17株在相应位置处表达该条带。结论耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌主要以A型流行,产oxa-23水解酶和38 000附近膜孔蛋白条带缺失可能是其主要耐药机制。

2017年上海市细菌耐药性监测

目的了解2017年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法对上海市49所医院的临床分离菌进行药敏试验。包括30所三级医院(含3所儿童医院)和19所二级医院。采用美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2017年版标准判断结果。结果共获134078株临床分离菌,其中革兰阳性菌40243株,占30.0%;革兰阴性菌93835株,占70.0%。二级医院和三级医院菌株分别占29.0%和71.0%。在二、三级医院中革兰阳性菌和革兰阴性菌各为25.4%和74.6%、31.9%和68.1%。MRSA和MRCNS在各自菌种中的检出率分别为49.1%和79.7%。二级医院、三级医院的MRSA和MRCNS检出率分别为53.2%和72.1%、47.7%和82.2%。葡萄球菌属中未发现万古霉素耐药株。1041株儿童非脑膜炎肺炎链球菌分离株中青霉素敏感(PSSP)、中介(PISP)和耐药株(PRSP)分别占84.3%、7.8%和7.9%;330株成人分离株PSSP、PISP和PRSP分别为89.4%、4.2%和6.4%。检出5株(0.1%)万古霉素耐药粪肠球菌、64株(1.2%)万古霉素耐药屎肠球菌,经过PCR测序确认的菌株中主要为vanA基因型。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中ESBL的检出率分别为54.9%、35.1%和47.6%。上述产ESBL菌株在二级医院和三级医院的检出率分别为53.7%、31.5%、44.0%和55.5%、37.0%、50.0%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为11.1%和11.0%,二级医院、三级医院分别为9.0%和9.2%、12.2%和11.9%,碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)的检出率为11.9%,其中73.4%是肺炎克雷伯菌。鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中出现对大多数测试药物耐药而仅对1～2种抗菌药物敏感的广泛耐药株,二级医院和三级医院分别为64株、357株、7株、25株和412株、1129株、38株、45株。结论目前主要临床分离菌对于常用抗菌药物的耐药性仍甚为严重,尤其是多重耐药的革兰阴性杆菌,对人类健康构成严重威胁,需引起高度重视并采取有效措施防治耐药菌感染。

2016年上海市细菌耐药性监测

目的了解2016年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法对上海市47所医院的临床分离菌进行药敏试验。包括28所三级医院(床位数31 373张)和19所二级医院(床位数16 311张)。采用CLSI 2016年版标准判断结果。结果 12 2 548株临床分离菌,革兰阳性菌35 522株,占29.0%;革兰阴性菌87 026株,占71.0%。分离菌二级医院和三级医院分别占28.9%和71.1%;其中革兰阳性菌和革兰阴性菌在二、三级医院中分别占25.8%和74.2%、30.3%和69.7%。MRSA和MRCNS的检出率分别为48.7%和77.2%。MRSA、MRCNS在二级医院和三级医院的平均检出率分别为55.9%、73.3%和45.9%、78.6%。葡萄球菌属中未发现万古霉素耐药株。1 111株儿童非脑膜炎肺炎链球菌中青霉素敏感(PSSP)、中介(PISP)和耐药株(PRSP)的检出率分别为77.4%、13.2%和9.4%;上述细菌在二级医院中分别占97.8%、2.2%、0;在三级医院中分别占76.5%、13.7%、9.8%。285株成人分离肺炎链球菌PSSP、PISP和PRSP分别为94.0%、4.2%和1.8%;上述细菌在二级医院中分别占93.7%、5.3%、1.0%;在三级医院中分别占94.2%、3.7%、2.1%。发现37株屎肠球菌(二级医院14株,三级医院23株)和25株粪肠球菌(均分离自三级医院)耐万古霉素。根据PCR测序,多数万古霉素耐药肠球菌(VRE)为van A基因型。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中ESBL的检出率分别为52.2%、30.9%和29.8%。上述产ESBL菌株在二级医院和三级医院的检出率分别为55.1%、33.6%、34.0%和51.0%、29.7%、28.0%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南、美罗培南的总耐药率分别为8.9%、9.1%,二级医院和三级医院中耐药率分别为6.6%、7.1%和9.9%、10.0%。鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中出现对所有测试抗菌药物耐药的广泛耐药株,在二级医院和三级医院分别为223株、63株、10株、4株和224株、201株、22株、9株。结论目前临床主要病原菌对常用抗菌药物的耐药性仍极严重,对医疗机构构成严重威胁,需引起高度重视并采取有效感控措施。

2015年上海市细菌耐药性监测

目的了解2015年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法对上海市44所医院的临床分离菌进行药敏试验,包括27所三级医院(其中含3所儿童医院)和17所二级医院。采用美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2015年版标准判断结果。结果 107 853株临床分离菌,革兰阳性菌31 585株,占29.3%;革兰阴性菌76 268株,占70.7%。MRSA和MRCNS的检出率分别占各自菌种的46.9%和74.2%。MRSA、MRCNS在二级医院和三级医院的平均检出率分别为53.6%、70.3%和44.3%、75.6%。葡萄球菌属中未发现万古霉素和利奈唑胺耐药株。1 021株肺炎链球菌儿童非脑膜炎分离株中青霉素敏感(PSSP)、中介(PISP)和耐药(PRSP)株的检出率分别为77.8%、13.3%和8.9%。232株成人分离株PSSP、PISP和PRSP分别为88.4%、5.2%和6.4%。检出51株屎肠球菌和3株粪肠球菌耐万古霉素。根据PCR测序,多数耐万古霉素肠球菌为vanA基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中ESBL的检出率分别为57.0%、32.3%和41.5%。上述ESBL菌株在二级医院和三级医院的检出率分别为58.0%、29.0%、45.5%和56.5%、33.9%、40.2%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为7.4%和7.7%。鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中有少数菌株为广泛耐药株。结论细菌耐药性仍对临床构成严重威胁,需引起高度重视,避免耐药株的广泛传播。

6573例非淋菌性尿道炎患者支原体感染及药敏情况分析

目的调查分析6 573例非淋菌性尿道炎(NGU)患者支原体感染情况及对抗菌药物的敏感性,为临床合理用药及流行病学提供依据。方法对6 573例NGU患者进行支原体培养及药敏试验,分别对中国籍患者和外籍患者两组进行比较分析。结果在5 675例中国籍患者中检出支原体感染2 985例(52.6%),其中,解脲支原体(Uu)感染2 312例(40.7%);男性感染率为35.2%,女性感染率为61.4%。898例外籍患者支原体感染440例(49.0%),其中,Uu感染327例(36.4%);男性感染率为32.2%,女性感染率为59.5%。药敏试验结果显示,中国籍患者Uu感染时敏感率依次为米诺环素(MIN)96.7%、多西环素(DOX)96.2%、交沙霉素(JOS)93.7%、克拉霉素(CLA)89.7%;外籍患者依次为MIN(98.9%)、DOX(98.4%)、JOS(95.8%)、CLA(92.1%)。结论中国籍NGU患者支原体感染率略高于外籍患者,感染类型均以Uu为主;女性感染率均明显高于男性;外籍患者对所试药物敏感性均高于中国籍患者,两组患者对MIN、DOX、JOS及CLA均呈现较强的敏感性。

rDNA-ITS序列分析对临床少见丝状真菌鉴定作用的评估

目的评价内转录间隔区(ITS)的多态性序列分析(rDNA-ITS序列分析)对临床少见丝状真菌的鉴定作用,以形态学鉴定方法加以补充验证。方法将3株待检真菌通过聚合酶链反应(PCR)扩增和基因测序方法分析rDNA-ITS序列,从GenBank获取相似序列,使用BLAST工具对rDNA-ITS序列进行对比分析,利用GenBank中的系统发育软件自动生成系统,构建系统发育树,根据系统发育树并结合对比指标确定距离与同源性均有较大鉴定意义的对比序列,并与真菌ITS1、ITS2、26S rDNA D1/D2片段的序列分析结果及形态学鉴定结果进行比较。结果 2株菌株能通过rDNA-ITS序列分析的方法鉴定到种,另1株由于相似序列较多,需要形态学方法加以配合鉴定。rDNA-ITS序列分析相对真菌ITS1、ITS2、26S rDNA D1/D2片段有更好的真菌鉴定作用。结论相对于传统形态学方法,利用rDNA-ITS序列分析鉴定丝状真菌不受检验人员经验水平影响,较为客观,同时由于其包含的信息量相对丰富,因此,较其他靶序列具有更好的真菌鉴定作用。但该方法也存在一定局限,因此,仍需结合形态学方法进行鉴定。

耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药机制研究

目的了解我院分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌(PA)耐药机制及同源性分型情况。方法收集临床分离耐亚胺培南PA,用K-B法检测28株耐亚胺培南PA对12种抗菌药的敏感性,用肠杆菌科细菌基因间重复序列(ERIC)进行同源性分析,并用PCR法检测外膜孔蛋白OprD2和金属β内酰胺酶(IMP、VIM)基因。结果28株耐亚胺培南PA对其他12种抗菌药的耐药率在14.8%~42.3%。经ERIC-PCR分析后共有11个基因型。其中A型为11株:A1型9株,A2型2株;B型为5株:B1型2株,B2型2株,B3型1株;C型3株;D型2株;E^K型各1株。PCR检测到OprD2基因仅4株,其缺失率为85.7%,28株PA中检测到1株VIM基因,经测序证实为VIM-2型。结论本院耐亚胺培南PA的主要耐药机制为外膜孔蛋白缺失。在外科和高干病房中出现多种基因型的耐亚胺培南PA传播。

奇异变形杆菌产超广谱β内酰胺酶基因检测

目的了解我院2007年1月—2008年6月临床分离119株奇异变形杆菌产ESBLs检出率,并分析研究其耐药性和耐药基因分型。方法用药敏纸片法(K-B法)对119株奇异变形杆菌进行抗菌药敏试验,并作ESBLs初筛和确证试验。对其中产ESBLs菌用PCR方法检测TEM、CTX-M-1组、CTX-M-2组、CTX-M-9组和SHV5种基因并对其进行测序。结果119株奇异变形杆菌ESBLs确证试验阳性率为20.2%,产ESBLs菌株对头孢呋辛、头孢唑林、头孢克洛和哌拉西林等耐药率均为100%,对头孢噻肟、庆大霉素和环丙沙星耐药率分别为95.5%、95.2%和86.4%。24株表型确证试验产ESBLs菌中,TEM基因检出率为70.8%,CTX-M-1组基因检出率为54.2%,CTX-M-2组基因检出率为33.3%,未检测到CTX-M-9组和SHV基因。经DNA测序,17株产TEM型ESBLs奇异变形杆菌均属于TEM-1型基因,13株CTX-M-1组和8株CTX-M-2组奇异变形杆菌分别为CTX-M-3型和CTX-M-2型基因,未检测到TEM型ESBLs菌株。结论奇异变形杆菌中产ESBLs菌株检出率较高,产ESBLs菌对头孢菌素类、喹诺酮类、磺胺类和氨基糖苷类等抗菌药物呈多重耐药性。

Agilent2100分析仪在鲍曼不动杆菌同源性分析中的应用

目的Agilent 2100分析仪在基因组外非编码重复序列片段的聚合酶链反应(REP-PCR)同源性分析中的应用并评估该系统。方法应用REP设计引物并进行PCR扩增,用Agilent2100分析仪DL7500 Labch ip芯片进行产物分析。结果51株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌中,耐药菌株分为4大型别(A、B、C、D),其中A型共48株,分别为A1型33株,A2型13株,A3型和A4型各1株;B、C、D型各1株;18株碳青霉烯类敏感菌株中,有2株与A1型别一致,其他菌株型别都不一致。结论基于REP-PCR的Agilent2100同源性分析具有快速、易于操作、高重复性和高分辨率、结果定量处理和多种形式输出等优点,可作为临床同源性分析鉴定和分型的一线工具。