沃柑霉腐病病原菌的鉴定、生物学特性及拮抗菌株筛选

沃柑霉腐病原菌的鉴定、生物学特性研究及其拮抗菌株筛选,将有助于沃柑的生物防腐研究。目前对于柑橘霉腐的病原菌已经分离出意大利青霉、指状青霉、扩展青霉等,未见文献报道针对武鸣地区沃柑霉腐病病原菌的鉴定及生物学特性研究。为了明确武鸣地区沃柑霉腐病的主要病原菌及其生物学特性,以在武鸣沃柑种植核心示范区生产基地采集的霉腐沃柑果实为试验材料,利用组织培养法和平板划线法分离病原菌并通过科赫法则验证明确病原菌,形态学和分子生物学分析结合鉴定病原菌,进一步分析病原菌的生物学特性和生物防治菌谱。结果表明,皮壳青霉(Penicillium crustosum)是引起武鸣沃柑霉腐病的病原菌,它在不同培养基、pH值以及温度的环境下生长各不相同,能够适应多种营养环境,生命力强,最适生长pH值为7,最适生长温度为20℃,高盐浓度的环境会抑制病原菌的生长。生物防治菌谱的研究表明,解淀粉芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌、非脱羧勒克菌以及季也蒙迈耶氏酵母对该病原菌的生长有抑制作用,具有开发成为病原菌生物防治菌剂的潜力。综上,本研究鉴定了武鸣地区沃柑霉腐病病原菌为皮壳青霉,并研究了其生物学特性,明确其最适生长环境条件和生物防治菌谱,为防治沃柑霉腐病害提供了理论依据。

果皮酵素的制备及抗氧化活性研究

本文研究以新鲜果皮为原料,采用市面常用菌种来发酵制备果皮酵素。为进一步优化果皮酵素的发酵工艺参数,以超氧化物歧化酶(SOD)活力为测定指标,通过正交试验确定果皮酵素的最优发酵条件。结果表明,糖浓度为25%,发酵时间为36h,接种量为6%,发酵温度为30℃时发酵效果最好。该条件下果皮酵素的超氧化物歧化酶(SOD)活力平均值为46.84U/ml。该研究为果皮酵素的制备和抗氧化活性研究奠定了基础。

氨基酸叶面肥对有机种植条件下‘凌云白毫茶’茶树生长和茶叶品质的影响

本试验探讨喷施氨基酸叶面肥对促进有机栽培条件下‘凌云白毫茶’茶树生长和茶叶品质提升的作用。结果显示,在夏茶采摘时期喷施氨基酸叶面肥茶树的发芽密度提高17.42%,茶叶鲜重和干重分别提高9.82%和22.20%,茶鲜叶中叶绿素含量提高7.33%,茶叶中茶多酚含量提高4.77%、氨基酸含量提高10.91%、可溶蛋白含量提高2.86%、可溶性糖含量提高23.32%。在秋茶采摘时期喷施氨基酸叶面肥茶树的发芽密度提高30.37%,茶叶鲜重和干重分别提高9.09%和16.57%,茶鲜叶中叶绿素含量提高5.48%,茶叶中茶多酚含量提高11.98%、氨基酸含量提高21.54%、可溶蛋白含量提高2.27%、可溶性糖含量提高1.07%。说明氨基酸叶面肥可有效促进有机栽培条件下‘凌云白毫茶’茶树的生长及茶叶品质的提升。

香蕉皮黑色素的提取工艺及稳定性研究

[目的]研究香蕉皮黑色素的提取工艺,并讨论香蕉皮黑色素的稳定性。[方法]以香蕉皮为原料,以碱-酸法提取香蕉皮黑色素,通过单因素和正交试验,优化提取工艺,并对香蕉皮黑色素对温度、光、pH值、金属离子及氧化剂、还原剂的稳定性进行探讨。[结果]香蕉皮黑色素的最佳提取条件为浓盐酸浸泡时间为5 h,加碱后溶液pH值为14,提取时间为20 min,提取温度为70℃,提取物吸光度为0.309 A;香蕉皮黑素色在高温、不同光源照射、还原剂共存条件下均稳定,而在常温、金属离子和氧化剂存在下,稳定性不够。[结论]该研究为香蕉皮黑色素资源优化和深度开发提供了试验依据。

凌云白毫古茶树资源现状及保护对策

凌云白毫古茶树作为广西本土古茶树资源,生长历史悠久,但其野生古茶树和古茶园的地理位置和数量并未得到有效记载。本项目经实地调查研究后发现,凌云白毫野生古茶树零散分布于具有数百年历史的风香坪、先锋岭等地区,但数目所剩无几。野生凌云白毫具有不同程度的病虫害,甚至濒于死亡;在先锋岭地区发现了典型的现阶段存活的、最古老的凌云白毫古茶树,且从地理分布和茶树生长状况上看,这些野生凌云白毫古茶树就是近、现代用于人工栽培茶园的种子源头。本研究可为凌云白毫古茶树的溯源、原生境种质资源保护及其开发与利用等提供一定的理论依据。

高产光学纯（R）-乙偶姻工程菌株的构建与发酵工艺优化

本研究拟在大肠杆菌中构建光学纯(R)-乙偶姻的合成途径和利用辅酶工程调控NADH/NAD+氧化还原平衡,并对工程菌发酵(R)-乙偶姻进行优化。将来源于Enterobacter cloacae的α-乙酰乳酸合成酶基因budB、α-乙酰乳酸脱羧酶基因budA和来源于Lactobacillus brevis的NADH氧化酶基因noxE进行密码子优化后组成基因簇,构建表达质粒并导入大肠杆菌,进一步优化工程菌的培养基成分和发酵条件,提高(R)-乙偶姻的合成能力。结果表明:获得专一性合成高光学纯(R)-乙偶姻的大肠杆菌工程菌株GXASR,对其发酵条件进行系统优化后,摇瓶发酵的(R)-乙偶姻产量为36.82g/L,光学纯度达99.1%,发酵罐补料发酵的(R)-乙偶姻产量达到67.65g/L。在大肠杆菌细胞中过表达外源基因簇budB-budA-noxE能够高效合成光学纯(R)-乙偶姻,经发酵优化后,工程菌的(R)-乙偶姻产量、生产强度和得率均显著提高,为代谢工程改造大肠杆菌生产高光学纯(R)-乙偶姻提供了理论基础。

高产光学纯(R,R)-2,3-丁二醇工程菌株构建与发酵优化

[目的]构建能够专一性合成光学纯(R,R)-2,3-丁二醇的大肠杆菌工程菌,并进行发酵条件优化。[方法]将来源于多粘芽孢杆菌的(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶基因bdh,来源于阴沟肠杆菌的α-乙酰乳酸合成酶基因bud B和α-乙酰乳酸脱羧酶基因bud A与表达载体p Tr C99A连接,导入大肠杆菌中构建人工合成途径。筛选最适的培养基和发酵条件,提高(R,R)-2,3-丁二醇的产量、产率和得率。[结果]获得高效合成(R,R)-2,3-丁二醇的工程菌株GXASB,筛选到最适碳源及其浓度为120 g/L木薯淀粉,最适pH为6.5,最适接种量为10%,在发酵罐中进行同步糖化法发酵,(R,R)-2,3-丁二醇产量达到105.28 g/L,光学纯为99.1%,得率为0.47 g/g,生产强度为1.95 g/(L·h)。[结论]在大肠杆菌中表达基因簇bud B-bud A-bdh能够专一性合成光学纯(R,R)-2,3-丁二醇,经优化发酵条件后,能够显著提高(R,R)-2,3-丁二醇的合成效率。同时工程菌能够利用非粮原料木薯淀粉高效生产(R,R)-2,3-丁二醇,补料发酵产量达到105.28 g/L,为使用廉价原料工业化生产(R,R)-2,3-丁二醇提供参考。