miR-21通过PTEN/AKT通路抑制白血病细胞K562的迁移和增殖

目的 miR-21在多种肿瘤中的研究已有大量文献报道,但其对白血病细胞迁移和增殖的影响及其可能机制尚未完全阐明,文中旨在探讨抑制miR-21对白血病K562细胞迁移和增殖能力的影响及可能的作用机制。方法将miR-21 inhibitor用LipofectamineTM2000转染K562细胞,荧光定量PCR检测miR-21的表达水平;Transwell迁移实验和Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测细胞迁移和增殖变化;Western blot检测PTEN、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达变化。结果抑制miR-21表达后K562细胞的迁移和增殖能力均受到明显抑制;抑制miR-21能明显增强PTEN蛋白和减低p-AKT蛋白表达水平,对AKT蛋白水平无明显影响。结论抑制miR-21表达可能通过调控PTEN/AKT通路抑制白血病K562细胞迁移和增殖。

生长分化因子15蛋白在宫颈上皮内瘤变和鳞癌中的表达及意义

目的:探讨生长分化因子-15(growth differentiation factor-15,GDF-15)蛋白在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和鳞癌中的表达及其在宫颈鳞癌发生和发展中的意义。方法 :采用免疫组织化学法分别检测45例宫颈癌(宫颈癌组),90例CIN(CIN1、CIN2、CIN3各30例),30例正常宫颈组织(对照组)的GDF-15的表达情况。结果 :GDF-15在对照组、CIN组、宫颈癌组的阳性率分别为10.0%(3/30)、45.6%(41/90)和80.0%(36/45),CIN组中,阳性率CIN1组为26.7%(8/30),CIN2组为53.3%(16/30),CIN3组为56.7%(17/30)。统计发现GDF-15在CIN组中阳性表达率明显高于对照组中的表达(Z=870.0,P=0.000),CIN2和CIN3的阳性表达率均明显高于CIN1(分别Z=330.0,P=0.037;Z=315.0,P=0.019),宫颈癌组中的阳性率明显高于CIN3组(Z=-2.16,P=0.031)。结论:GDF-15蛋白在正常宫颈组织、CIN、宫颈鳞癌中随着宫颈病变的进展其阳性表达率呈明显上升趋势,检测GDF-15表达可能有助于预测宫颈高度病变的转归。

细胞块在宫颈液基细胞学疑难病例中的应用价值

目的:探讨细胞块在宫颈细胞疑难病例中的应用价值。方法:宫颈细胞标本应用液基细胞学技术(TCT)制片诊断,疑难病例制备细胞块并行HE染色及p16INK4A、Ki67染色,将单纯TCT(TCT组)与TCT结合细胞块HE和免疫细胞化学诊断(联合组)进行比较。结果:p16INK4A、Ki67在26例反应性不成熟鳞状化生细胞中均无表达,在22例HSIL阳性表达分别为81.8%(18/22)、90.9%(20/22);在30例绝经的萎缩上皮中均不表达,萎缩背景中的19例HSIL/SCC均阳性表达。TCT组和联合组的符合率分别为70.1%和95.9%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:疑难宫颈TCT病例行细胞块制作、HE染色及p16INK4A和Ki67染色,可提高宫颈癌筛查的准确性。

miR-137基因转染对人眼葡萄膜黑色素瘤细胞侵袭能力的影响及机制

目的探讨miR-137基因转染对人眼葡萄膜黑色素瘤细胞系M23细胞侵袭能力的影响及其机制。方法将正常培养的M23细胞分为转染组和对照组,每组3孔,分别采用LipofectamineTM2000瞬时转染miR-137 mimic及miR-137 mimics阴性对照。转染18 h后用Transwell侵袭试验检测两组细胞侵袭能力(穿膜细胞数);48 h后采用Western blot法检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达,采用ELISA法检测细胞培养上清液中MMP-2和MMP-9水平。结果转染组穿膜细胞数明显少于对照组(P均<0.05);MMP-2和MMP-9蛋白表达低于对照组(P均<0.05);细胞培养上清液中MMP-2和MMP-9水平低于对照组(P均<0.05)。结论 miR-137基因转染对M23细胞的侵袭能力有抑制作用;其机制可能为抑制细胞MMP-2和MMP-9表达。

妊娠期糖尿病产妇胎盘组织内质网应激状态及其对胎盘组织形态学的影响

目的观察妊娠期糖尿病(GDM)产妇胎盘组织内质网应激(ERS)发生情况并探讨其对胎盘组织形态学的影响。方法 GDM产妇(GDM组)和健康产妇(对照组)各30例,分娩时收集胎盘组织,Western blot法检测胎盘组织中的磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)。HE染色对胎盘组织行病理学观察。结果 GDM组p-PERK、CHOP相对表达量均高于对照组(P均<0.05)。病理检查显示,GDM组胎盘组织出现绒毛成熟不良、干绒毛小动脉管壁增厚及管腔狭窄、合体细胞结节增多、绒毛间质内毛细血管过度充盈、细胞滋养叶细胞及血管合体膜形成增加的例数高于对照组(P均<0.05)。GDM组胎盘组织中p-PERK、CHOP表达与胎盘组织异常形态学改变呈正相关关系(r分别为0.359、0.366,P均<0.05)。结论 GDM产妇胎盘组织呈ERS状态,其与产妇胎盘组织异常形态学改变有关。

石蜡包埋细胞芯片的手工制备方法及其应用价值

目的介绍一种石蜡包埋细胞芯片的简易制备方法及验证其应用价值。方法收集科研培养细胞或临床细胞学标本,手工法制作石蜡包埋的细胞芯片,并进行HE染色、免疫组织化学法及TUNEL检测法验证细胞芯片的应用价值。结果此法熟练掌握后能制备出60个点阵左右的细胞芯片,肉眼观察点阵完整,排列均一,经HE染色、免疫组化染色及TUNEL凋亡染色证实,染色效果良好,结果可靠。结论简易手工法制备的石蜡包埋细胞芯片的操作容易,设备简单,能够迅速成型制备出多种不同类型的细胞芯片,值得推广应用。

p16^(INK4A)、Ki-67检测在宫颈液基细胞学疑难病例鉴别诊断中的应用

目的探讨p16INK4A、Ki-67检测在宫颈液基细胞学疑难病例鉴别诊断中的临床应用价值。方法宫颈细胞学诊断疑难病例54例,其中绝经25例;液基细胞学技术(TCT)初诊后制片,进行p16INK4A、Ki-67免疫细胞化学检测。结果反应性不成熟鳞状化生18例,p16INK4A、Ki-67均为阴性表达,组织活检或TCT复查均未见上皮内病变;ACS-H或HSIL 11例,p16INK4A、Ki-67阳性表达分别为11例和10例,病理活检证实为CINⅡ或CINⅢ。25例绝经患者中上皮萎缩鳞状7例,p16INK4A、Ki-67均阴性,活检结果或TCT复查未见上皮内病变或恶性病变;HSIL 12例,p16INK4A、Ki-67均阳性,病理活检CINⅢ8例、鳞癌4例;鳞癌6例,p16INK4A、Ki-67均阳性,病理活检结果均为鳞癌。结论 TCT结合免疫细胞化学在诊断疑难宫颈细胞学病例中具有重要临床意义,p16INK4A、Ki-67对非上皮内病变和上皮内瘤变有鉴别诊断价值。