嗜酸乳杆菌对运输前后马肠道菌群的影响

【目的】旨在研究运输应激对马肠道菌群结构的影响,并探讨嗜酸乳杆菌对马运输应激的预防作用。【方法】试验选取10匹24月龄的伊犁马,随机均分为试验组和对照组。所有马均进行环境适应1周后,试验组开始在饲喂基础饲粮外补饲嗜酸乳杆菌胶囊,对照组不补饲。饲喂15 d之后,试验组与对照组在第16天同时开展里程约400 km的运输试验,分别于运输前后采集对照组马颈静脉血液进行生理指标检测,并在喂菌前、喂菌15 d后和运输8 h后采集马粪便,试验组喂菌前样品设为A1组,喂菌15 d后样品设为A2组,运输8 h后样品设为A3组,对照组运输8 h后样品设为T3组。采用Illumina MiSeq高通量测序方法对马肠道菌群多样性进行分析。【结果】运输前后血液生理指标测定结果显示,对照组中间细胞比率和血红蛋白在运输8 h后呈现显著性下降(P<0.05),血红蛋白浓度在运输8 h后极显著降低(P<0.01)。补饲嗜酸乳杆菌和运输均能够引起马肠道菌群组成出现差异,补饲嗜酸乳杆菌增加了理研菌科RC9(Rikenellaceae_RC9_gut_group)、毛螺菌科AC2044属(Lachnospiraceae_AC2044_group)等有益菌的菌群丰度,而运输则增加了有害菌拟杆菌门(Bacteroidetes)和变形菌门(Proteobacteria)的数量。【结论】运输能够引起马产生应激反应,饲粮中添加嗜酸乳杆菌能够恢复运输应激带来的马肠道菌群紊乱,并增加了少量的有益菌,从而缓解运输造成的菌群紊乱现象,对机体产生有利影响。

和田羊和小尾寒羊尾脂的显微和超微结构比较

试验旨在探究不同品种羊尾脂的显微、超微结构特点,并比较其各自特点和异同,从而分析不同品种羊尾脂沉积规律的差异,探究羊尾部脂肪形成基因调控网络的结构基础。试验采集15月龄成年雄性和田羊的尾部脂肪、小尾寒羊的尾部脂肪,通过电子显微镜和光学显微镜相结合的研究方法,观察并比较其显微、超微结构。结果表明,和田羊尾脂脂肪细胞较小,内质网呈螺旋状,线粒体分布于细胞内边缘,膜外有"绒毛状"结构和散在的黑色颗粒;小尾寒羊尾脂脂肪细胞体积大,细胞间质较宽,胞内有丰富散在的小脂滴,内质网片状结构清晰,线粒体散在分布。研究显示,和田羊和小尾寒羊尾脂脂肪细胞显微、超微结构具有显著差异。

运输应激对马体温、血液指标及HP、TNF-α、IFN-γmRNA表达水平的影响

旨在研究运输应激对马体温、血常规指标及HP、TNF-α、IFN-γmRNA表达水平的影响,测定马运输前1 h、运输中7 h及运输后1 h和9 h的体温及血液指标,RT-qPCR方法检测外周血淋巴细胞中HP、TNF-α、IFN-γ的mRNA表达水平。结果显示,与运输前1 h相比,运输中7 h时马体温显著增高,运输后1 h的体温极显著增高,运输后9 h的体温逐渐下降但仍显著高于运输前;运输后9 h红细胞平均体积(MCV)显著降低,其他指标无明显差异;外周血淋巴细胞中HP、TNF-α、IFN-γ的mRNA表达量均呈上升趋势,HP和IFN-γ的mRNA表达量在运输后1 h达到高峰,且与运输前相比差异极显著,运输后9 h逐渐恢复;TNF-α的mRNA表达量一直呈上升趋势,运输后9 h TNF-α的mRNA表达量极显著升高。研究表明运输应激会导致马体温上升,MCV下降,上调马外周血淋巴细胞中HP、TNF-α、IFN-γ的mRNA表达水平,结果为进一步阐述运输应激的致病机制提供依据。

不同生长速度阿勒泰羊肠道菌群差异性研究

本文通过研究同一饲喂条件下,不同生长速度的阿勒泰羊肠道菌群差异,以及通过日粮影响生长速度后,肠道菌群物种组成的变化,旨在探讨肠道菌群与绵羊生长发育之间的关系。在300只6月龄羔羊中,按照日增重前10%和后10%筛选生长快和生长慢的雄性阿勒泰羊,分为高体重组和低体重组,高体重组随机选12只分为高体重能量日粮限饲组(HR)和高体重标准日粮对照组(HC),低体重组随机选12只分为低体重能量日粮增加组(LA)和低体重标准日粮对照组(LC),每组各6只。HR、HC、LC和LA组分别饲喂能量摄入为营养需要量75%、100%、100%和125%的日粮。预试期7 d,正试期30 d,记录体重,屠宰并采集相同部位的肠内容物,提取DNA,使用Illumina Miseq测序平台进行检测。研究结果显示,同一饲喂标准下,不同生长速度阿勒泰羊肠道菌群组成有差异,HC组厚壁菌门、放线菌门、Saccharibacteria门、疣微菌门和双歧杆菌属菌群丰度高于LC组,LC组变形菌门和拟乳菌属丰度高于HC组;在日粮调控生长速度的试验中,低能量水平日粮显著降低了高体重组体增重(P<0.05);高能量水平日粮增加了低体重组的体增重(P<0.05);不论促进或是抑制生长速度,肠道中厚壁菌门和拟杆菌门的物种丰度均升高,高丰度的Saccharibacteria门始终存在生长速度较快的组中,高丰度的拟乳菌属始终存在于生长速度较慢的组中。综合分析两部分试验结果可知,阿勒泰羊肠道中厚壁菌门和拟杆菌门的物种丰度变化可能与日粮和生长速度均有相关性,Saccharibacteria门的物种丰度变化与生长速度呈正相关,拟乳菌属的物种丰度变化与生长速度呈负相关。

一株羊源弯曲乳杆菌的分离及安全性评价

本试验旨在评估一株分离得到的羊源弯曲乳杆菌的潜在益生特性和安全性。采集新鲜健康绵羊粪便样品共13份,用于乳酸菌的分离筛选,再进行小鼠致病性试验,以确定分离菌的安全性。结果表明:1)初分离得到55株乳酸菌(编号:Y1~Y55)。2)分离菌Y15可耐受pH=3和1.0%胆盐,对青霉素G、头孢噻肟、氨苄西林、克林霉素和四环素敏感,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑制活性较好,无溶血活性。3)结合生化特性和测序结果将其命名为弯曲乳杆菌Y15。4)弯曲乳杆菌Y15在37℃下迅速生长至16 h达稳定期且具有良好的产酸能力。5)灌胃弯曲乳杆菌Y15对小鼠体征、分泌物、排泄物、体增重、采食量、体腔脏器和血液学参数均无显著影响(P>0.05),可显著增加结肠组织中杯状细胞数量(P<0.05),显著降低肝脏指数(P<0.05),显著升高血清总蛋白含量(P<0.05);小鼠腹腔注射试验中,2组小鼠体重无显著差异(P>0.05),体内脏器无明显眼观病理变化。综上可知,羊源弯曲乳杆菌Y15具有良好的益生特性,无急性毒性作用,通过了小鼠体内安全性试验。

阿勒泰羊生长速度与主要血液生化指标含量及尾脂Leptin基因表达关系

试验通过研究不同生长速度阿勒泰羊主要血液生化指标含量和尾脂中瘦素(Leptin)基因的表达水平,探讨阿勒泰羊生长速度与脂肪沉积之间的关系。选取300只出生时间相近的阿勒泰羊公羔,正常饲喂至6月龄,记录日增重,取平均日增重排前10%和后10%的公羔各30只,分为生长快速组(HBW)和生长慢速组(LBW),从生长快速组随机选12只分为抑制生长组(饲喂低能量饲粮以抑制其生长,HBW-75%,n=6)和生长快速对照组(饲喂标准饲粮,HBW-100%,n=6),生长慢速组随机选12只分为促进生长组(饲喂高能量饲粮以促进生长,LBW-125%,n=6)和生长慢速对照组(饲喂标准饲粮,LBW-100%,n=6);预饲期7 d,正饲期30 d,试验结束后称重并采集血液,屠宰后采集尾部脂肪。检测血液TG、CK、TSH、T3、T4、S.S、GH、INS、PG、Leptin含量或活性及尾部脂肪Leptin mRNA和蛋白表达量,并观察尾部脂肪细胞形态学变化。结果显示,HBW-100%和LBW-100%组初体重与末体重均差异显著(P<0.05),HBW-75%和HBW-100%组初体重与末体重均无显著差异(P>0.05);LBW-100%和LBW-125%组初体重差异显著(P<0.05),末体重无显著差异(P>0.05)。LBW-100%组的T4、S.S、Leptin、TSH、T3含量显著低于HBW-100%组(P<0.05);LBW-125%组T3含量显著高于LBW-100%组(P<0.05);HBW-75%组GH、PG和Leptin含量显著低于HBW-100%组(P<0.05)。LBW-125%组尾部脂肪细胞面积大于LBW-100%组,HBW-75%组小于HBW-100%组(P<0.05)。Leptin mRNA和蛋白表达量检测结果表明,HBW-100%组的Leptin mRNA表达量与LBW-100%组无显著差异(P>0.05),Leptin蛋白表达量极显著高于LBW-100%组(P<0.01)。LBW-125%组Leptin mRNA和蛋白的表达量均显著高于LBW-100%组(P<0.05)。HBW-75%组Leptin mRNA的表达量极显著低于HBW-100%组(P<0.01),Leptin蛋白表达量显著低于HBW-100%组(P<0.05)。综上所述,生长快速组与生长慢速组中,Leptin的表达量与体重和体脂有一定关联;在生长慢速组促进生长后体重和体脂显著增加,Leptin的表达量呈上升趋势;在生长快速组抑制生长后体重和体脂减少,Leptin的表达呈下降趋势。改变生长速度对Leptin的表达量会产生影响,从而改变机体的脂肪沉积状况。

运输对马肠道菌群的影响

本研究运用Illumina MiSeq测序技术研究长途运输对马肠道菌群的影响,在运输前、运输16 h、运输后16 h 3个时间点采集马肛拭子进行检测。结果显示:运输应激对马肠道菌群多样性和组成有显著影响。Alpha多样性显示马运输后16 h较运输前物种丰富度显著增高(P<0.05)。运输对马肠道菌群在不同分类水平上优势菌群组成分析有不同程度的影响,在门水平上,厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和变形菌门(Proteobacteria)为三大优势菌门。运输后厚壁菌门、变形菌门平均含量降低,拟杆菌门平均含量升高。在属水平上,链球菌属(Streptococcus)和埃希氏志贺氏菌属(Escherichia-shigella)为两大优势菌属。运输后链球菌属平均含量增长,埃希氏志贺氏菌属平均含量降低。在物种组成差异比较分析中,在门水平上菌群物种组成差异不显著。在属水平上,克里斯滕森氏菌(Christensenellaceae_R-7_group)相较于马运输前的平均含量(2.87%),运输后的平均含量(1.7%)显著降低(P<0.05)。本研究结果显示运输应激会引起马肠道菌群的变化,为进一步研究马运输应激对肠道菌群的影响提供基础,为研究如何缓解马运输应激引起的肠道菌群变化提供参考。