基于UPLC-QAMS同时测定参鹿酒中7种人参皂苷含量

该研究旨在建立超高效液相色谱(UPLC)-一测多评(QAMS)法同时测定参鹿酒中7种人参皂苷(Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2及Rd)的含量。首先采用UPLC测定参鹿酒中7种人参皂苷含量,并进行方法学考察。然后以人参皂苷Rg1为参照物,计算其余6种人参皂苷的相对校正因子及含量,并考察QAMS法的耐用性。最后与外标法相比,验证QAMS的可行性。结果表明,7种人参皂苷在各自范围内线性关系良好(R^(2)>0.999),精密度、重复性及稳定性试验结果的相对标准偏差(RSD)均<3%,加样回收率为100.13%~101.73%。6种人参皂苷的相对校正因子的RSD值均<5%,重现性良好。采用相对校正因子计算得到的13批参鹿酒样品中7种人参皂苷的含量与外标法实测值的相对误差(RE)均<5%,说明所建立的UPLC-QAMS法可有效、快速的评价参鹿酒的质量。

一种基于小波变换的近红外化学指纹图谱分析方法

提出了一种快速无损的化学指纹图谱分析新方法.根据小波变换多分辨分析的特点,对近红外(NIR)光谱进行小波分解,从中提取被测样品的化学特征信息,并作数字信息可视化处理,构建形成可直观识别样品模式特征的NIR指纹图谱.将该方法用于中药材丹参的质量检测,检测结果与色谱指纹图谱检测结果相符,能快速有效地识别丹参质量模式间的差异,有望发展成为一种快速分析检测天然产物质量的方法.

一测多评法测定白芍中5种成分含量

目的:建立白芍中5种成分含量的一测多评法。方法:以芍药苷为参照物,计算芍药内酯苷、1,2,3,4,6-五没食子酰基葡萄糖、苯甲酰芍药苷、丹皮酚的相对校正因子,并利用相对校正因子计算4种成分的含量,同时外标法测定5种成分的含量,验证一测多评法的可行性和适用性。结果:一测多评法的相对校正因子重现性良好,采用相对校正因子计算得到的16批白芍样品中5种成分的含量与外标法实测值相对偏差均在5%以内。结论:一测多评法可用于白芍药材的质量评价,方法可靠准确。

正交试验法优选红参加工工艺

目的优化红参加工工艺。方法采用正交设计试验,对红参蒸制时间、烘干温度、烘干时间进行条件优选,考察指标为人参总皂苷以及活性皂苷Rg3。结果红参最优加工工艺为A2B3C1,即蒸制4 h,70℃下烘8 h。结论 3批验证试验结果表明该工艺稳定可行。

重组人胸腺素原α在大肠杆菌中的表达优化

在 1 5L的生物反应器内 ,对重组人胸腺素原α(huPTMAα)在大肠杆菌TG 1中经IPTG诱导后的表达条件进行优化 ;应用NBS MICROS 1 5L T DR型生物反应器 (1 5L) ,用工程菌E colipGEX IN/PTMA ,研究了诱导时不同的pH、温度、搅拌速率和IPTG浓度 ,利用正交试验对发酵条件进行了优化。经 1次预试验和 9次正式试验结果表明 ,huPTMAα的表达受溶氧条件的影响较显著 ,其中搅拌速率和通气量为最大的影响因子 ,当其为 2 5 0r/min时 ,表达水平最高。经SDS PAGE和凝胶扫描发现表达蛋白占菌体蛋白的 60 %以上。该实验为工程菌的中试提供了最佳的表达诱导条件 ,对其稳定性 。

基于信息融合的中药多元色谱指纹图谱相似性计算方法

用信息融合算法合并多张色谱指纹图谱,解决中药多元指纹图谱相似性评价难题,提出一种多元色谱指纹图谱相似度计算方法.用该方法先对各单元指纹图谱进行串行或并行象素级信息融合,再对融合了各指纹峰信息的多元色谱指纹图谱进行相似度评价.计算机仿真和复方丹参滴丸多元HPLC指纹图谱应用结果表明,该法能够评价中药多元色谱指纹图谱相似度,定量表征中成药产品批次间质量波动情况.

复方丹参滴丸批次间质量稳定性评价方法研究

目的:研究建立复方丹参滴丸产品批次间质量稳定性评价方法。方法:分别建立复方丹参滴丸中丹参酚酸类成分和三七皂苷类成分的 HPLC 指纹图谱,组成复方丹参滴丸多元 HPLC 指纹图谱。结果:工艺参数正常产品的多元 HPLC 指纹图谱相似度高于0.95,而工艺参数异常产品的多元 HPLC 指纹图谱相似度低于0.8。结论:建立的复方丹参滴丸多元 HPLC 指纹图谱可用于复方丹参滴丸产品批次间质量稳定性评价。

3430例观察注射用丹参多酚酸冻干粉上市后临床应用安全性

目的对注射用丹参多酚酸冻干粉的临床应用的安全性进行扩大人群范围的上市后安全性再评价。方法采用观察性研究方法 ,通过2012年7月~2013年7月期间北京中医药大学东直门医院等63家医院的3430例患者的用药情况、患者信息及发生的不良反应。结果共观察记录到,不良反应为16例29例次,发生率为0.466%（16/3430）,其中重度不良反应为0例,中度不良反应为10例次（占全部ADR的34.48%）,轻度不良反应为19例次（占全部ADR的65.52%）。结论注射用丹参多酚酸冻干粉临用应用不良反应发生率低,安全性较高;临床实践的规范性对临床用药安全存在影响,应加强中药注射剂临床应用的监督、培训与指导。

栀子中栀子苷和绿原酸的提取工艺研究

本实验以绿原酸含量和栀子苷含量为响应值,在单因素实验基础上选取试验因素与水平,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,拟合实验因素与响应值的多元二次方程,并对各个因素的显著性及交互作用进行分析。运用Design-Expert 8.0.6软件优化得到栀子超声提取工艺的最佳条件,液料比42.67 m L/g、甲醇浓度56.89%、超声时间15.67 min,在此条件下,绿原酸含量为27.38 mg/g,栀子苷含量为48.47 mg/g,与模型预测值相近,相对偏差分别为0.60%和1.16%,说明响应面优化所得的栀子提取工艺可靠、可行,提取更为完全、充分,更有利于实现栀子质量的综合评价与利用。

注射用益气复脉(冻干)与果糖注射液的配伍稳定性考察

[目的]考察注射用益气复脉(冻干)在室温(25±1)℃下与果糖注射液配伍的稳定性。[方法]模拟临床用药浓度,将注射用益气复脉(冻干)8瓶,分别用注射用水溶解后转注入5%果糖注射液250 mL中,混合均匀后,在室温(25±1)℃下考察6 h内配伍液的色泽、澄清度、pH值、不溶性微粒、紫外全波长扫描图谱、总皂苷变化情况,并采用高效液相色谱法测定皂苷及五味子醇甲的含量,同时考察皂苷及木脂素的指纹图谱变化情况。[结果]在室温(25±1)℃下,0～6 h配伍液的色泽、性状、pH值、不溶性微粒、紫外全波长扫描图谱、皂苷、五味子醇甲含量、皂苷及木脂素指纹图谱均无明显变化。[结论]注射用益气复脉(冻干)与果糖注射液配伍,在室温(25±1)℃下6 h内配伍稳定。

近红外漫反射光谱法快速测定丹参药材中多指标成分的含量

目的:建立快速测定丹参药材中多指标成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法测定丹参药材中丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸、丹参酮类成分(丹参酮ⅡA+丹参酮Ⅰ+隐丹参酮)的含量(作为参考值)。采用偏最小二乘法-近红外漫反射光谱法建立预测丹参药材中上述指标成分含量的定量模型:根据参考值,采集143批样品,以一阶导数法预处理光谱,丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸、丹参酮类成分的最佳波段分别为6 773.98~3 981.12、6 670.85~3 996.54、8 544.66~3 936.28、8 188.06~3 875.31 cm^(-1)。结果:丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸和丹参酮类成分含量测定方法学验证符合要求。丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸、丹参酮类成分的定量校正模型内部交叉验证相关系数(R^2)分别为0.919 0、0.832 2、0.821 5、0.925 6,校正均方差分别为4.46、0.48、1.34、0.71;外部验证R2分别为0.852 6、0.957 3、0.819 3、0.953 1,均方差分别为9.77、0.28、0.94、0.63。结论:该方法快速、准确、简便、无污染,可用于丹参药材中多指标成分含量的快速测定。

注射用益气复脉(冻干)与木糖醇注射液的配伍稳定性研究

目的考察注射用益气复脉(冻干)在室温条件下与木糖醇注射液配伍的稳定性。方法模拟临床用药浓度和使用方法,将注射用益气复脉(冻干)8瓶,分别用木糖醇注射液5 ml溶解后转注入木糖醇注射液250 ml中,混合均匀后,在室温条件下考察6 h内配伍溶液的色泽、澄清度、pH值、不溶性微粒、紫外全波长扫描图谱、总皂苷变化情况,并采用高效液相色谱法测定皂苷及五味子醇甲的含量,同时考察皂苷及木脂素的指纹图谱变化情况。结果在室温条件下,配伍溶液的色泽、性状、pH值、不溶性微粒、紫外全波长扫描图谱、皂苷、五味子醇甲含量、皂苷及木脂素指纹图谱在0～6 h内均无明显变化。结论注射用益气复脉(冻干)与木糖醇注射液配伍,在室温条件下6h内配伍稳定。

色差计法测定注射用丹参多酚酸溶液的颜色

目的:利用色差计建立注射用丹参多酚酸溶液颜色测定的方法。方法:采用《中华人民共和国药典》2010版附录XIA"溶液颜色检查法"第三法(色差计法)测定溶液的颜色。结果:该方法精密度和重复性良好,3 h内色差值△E*的RSD值为1.28%。测定的6批样品均小于黄色3号标准比色液(Y3)。结论:相比目视法,该方法将溶液颜色进行了量化检测、数据直观准确,可作为注射用丹参多酚酸溶液颜色测定的方法。通过色差法对中药注射剂质量进行控制将成为一种趋势,对提高中药注射剂安全性具有重要意义。

多发性脑梗死痴呆大鼠行为学和生化学改变及CO-GBE的保护作用

目的 :探讨复方银杏滴丸 (CO GBE)对多发性脑梗死痴呆 (MID)大鼠的保护作用 .方法 :采用向颈内动脉注入同种大鼠自体血栓的方法制成MID模型 ,测定模型大鼠的学习记忆能力和脑组织生化代谢 .结果 :CO GBE 1 0 ,2 0 ,4 0mg/kg可以不同程度地增强模型大鼠的学习记忆能力 ,主要表现为在Morris水迷宫行为测试中 ,给药组大鼠逃避潜伏期和首次穿越平台的时间明显缩短 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) .与假手术组相比 ,模型组大鼠海马及皮质区乙酰胆碱酯酶活力明显降低 ,乳酸含量明显增加 ,CO GBE可以不同程度地逆转这些异常变化 .结论 :改善胆碱能神经系统功能 ,抑制脑组织乳酸含量的增加 ,可能是CO GBE增强学习记忆能力 ,保护脑组织 。

HPLC-峰面积归一法测定注射用益气复脉(冻干)中总木脂素的含量

目的:建立注射用益气复脉(冻干)总木脂素的含量测定方法。方法:采用Phenomenex luna C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱;柱温30℃;检测波长218nm;进样量10μL;流速1mL/min。结果:五味子醇甲进样量在0.096～0.578μg范围内线性关系良好,其回归方程为:Y=404589x-9426.4,r=0.9998,精密度RSD1.88%,稳定性RSD2.29%,重复性试验RSD1.49%,平均回收率为99.84%、RSD 2.08%。结论:实验结果表明该方法简便,灵敏,专属性强,重复性好,可作为注射用益气复脉(冻干)的质量控制方法。

不同材质及不同截留分子量超滤膜对人参皂苷类成分的影响

目的考察不同材质及不同截留分子量超滤膜对人参皂苷类成分的影响。方法以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3为检测指标,通过HPLC观察其超滤前后所得成分变化。考察不同材质及孔径的超滤膜对有效成分透过率的影响。结果随着膜截留分子量的变大,各人参皂苷类成分的透过率有所提高,且纤维素材质的超滤膜对原人参二醇型皂苷人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3的透过率明显大于相同截留分子量的聚醚砜膜材质的超滤膜。结论纤维素材质的超滤膜对人参皂苷的透过率要优于相同截留分子量聚醚砜材质的超滤膜。

川麦冬药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱的研究

目的:建立川麦冬药材中黄酮类成分的HPLC指纹图谱分析方法,为整体控制和评价川麦冬药材的质量提供依据。方法:采用Waters Symmetry C18柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸梯度洗脱,流速为1.0mL.min-1,检测波长296nm,柱温30℃。以甲基麦冬黄烷酮A为参照物,对10批市售川麦冬药材进行指纹图谱的分析。结果:建立了川麦冬药材黄酮类成分的HPLC指纹图谱共有模式,标定了13个共有峰,10批川麦冬药材的相似度在0.960～0.995。结论:该指纹图谱方法简便、准确、重复性好,可专属性地研究川麦冬药材的指纹图谱,为有效地控制该药材的内在质量提供了科学依据。

复方银杏滴丸对拟气虚血瘀模型小鼠脑保护作用的实验研究

目的观察复方银杏滴丸(CO-GBE)对拟气虚血瘀模型小鼠的脑保护作用。方法采用小鼠8℃冷水负重游泳5min 模拟气虚血瘀模型,测定用 CO-GBE 后,模型小鼠断头喘气持续时间的变化以及脑组织生化代谢的改变。结果与正常对照组比较,模型小鼠断头喘气持续时间明显延长,脑组织乳酸(LA)含量明显增加,乳酸脱氢酶(LDH)、Na^+-K^+-ATP 酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP 酶活力明显降低(P<0.01);CO-GBE 可以延长模型小鼠的断头喘气持续时间,并可以明显逆转模型小鼠脑组织上述生化指标的异常改变(P<0.05,P<0.01)。结论改善脑组织生化代谢异常可能是 CO-GBE 发挥脑保护作用的机制之一。