产黑芥子酶鞘氨醇杆菌属菌株RJ35的筛选、鉴定及酶学性质

从油菜田的土壤中筛选到1株产黑芥子酶菌株RJ35,对其进行形态学与分子生物学鉴定,并对RJ35产的黑芥子酶进行纯化和酶学性质研究。菌株鉴定结果显示RJ35为鞘氨醇杆菌属。通过超滤浓缩及凝胶层析对黑芥子酶进行纯化,结果显示该黑芥子酶分子质量约为100 kDa。酶学性质研究结果显示该黑芥子酶的最适pH值和最适温度分别为7.5和40℃,且金属离子对其无显著激活作用。高效液相色谱测定结果表明该黑芥子酶可水解萝卜种子提取物产生萝卜硫素。当粗酶液在最适条件下水解萝卜种子提取物30 min时,萝卜硫素产率可达5.95 mg/g(占种子提取物质量计)。本研究结果为微生物源黑芥子酶的开发及应用奠定了实验基础。