谈法学成人教育的发展瓶颈与改革方向

法学成人教育是一种特殊的教育形式,为丧失机会的学习者提供一个学习法律的平台。当前,传统学历型的法学成人教育正面临生源萎缩、教学模式单一、教学质量低下等诸多现实问题。本文认为,法学成人教育单位应转变办学观念、转换教育目标,加强实践教学方式改革,积极应对社会的发展变化。

登革病毒感染与输血安全

登革病毒是属于黄病毒科的单股正链RNA病毒,其感染可以引起登革热、登革出血热和登革休克综合征。登革病毒主要通过蚊虫叮咬传播,目前在我国尚未纳入输血前常规病原体检测,因此存在通过输血传播的风险。本文就登革病毒的生物特征、流行病学、其感染后的临床特征、致病机理和治疗策略作简要概述,主要介绍登革病毒感染与输血安全。

关于医疗纠纷处置的调查与思考

近年来,医疗纠纷数量呈明显上升趋势,鉴于此"医疗纠纷第三方介入解决机制"的形式在我国不少地方开始试点,调解已经为医患双方所认可和接受,并将发展成为医疗纠纷的主要解决方法之一。笔者在《宁波市医疗纠纷预防与处置暂行办法》于2008年3月1日起正式实施这样的背景下,就地方上运用人民调解机制处置医疗纠纷的实践提出一些思考。

MicroRNA-155对3种可经输血传播RNA病毒复制的影响及机制探究

目的 了解经血传播的RNA病毒感染细胞后对小分子非编码RNA-155 (miR-155)的诱导作用及miR-155对这类病毒复制的影响。方法 在2×10~5/mL肝癌细胞系Huh7.5.1中分别感染3种RNA病毒HCV、DENV和ZIKV,感染复数(MOI)为0.2,感染后48 h,提取胞内RNA,通过荧光定量PCR (qRT-PCR)的方法,检测病毒感染后miR-155的相对表达变化;同时在2×10~5/mL Huh7.5.1细胞中转染10 pmol的miR-155模拟物(miR-155 mimic)使miR-155高表达,转染后12 h分别接种0.2 MOI的3种病毒,感染后48 h提取胞内RNA,通过荧光定量PCR检测3种病毒RNA的复制水平及宿主抗病毒先天免疫相关基因表达水平。结果 与未感染病毒的Huh7.5.1细胞相比,HCV、DENV及ZIKV感染Huh7.5.1细胞48 h后,miR-155的相对表达分别升高了132倍、157倍和8倍。与转染阴性对照组相比,miR-155高表达的Huh7.5.1细胞中,HCV、ZIKV和DENV的复制分别降低了48%、54%和70%;miR-155高表达的Huh7.5.1细胞中,IFNβ及一些干扰素刺激基因的表达明显升高。结论 HCV、DENV和ZIKV感染Huh7.5.1细胞后,显著诱导细胞中miR-155的表达;miR-155在细胞中高表达后,通过调节宿主细胞中Ⅰ型干扰素及一些干扰素刺激基因的表达来抑制HCV、DENV和ZIKV的复制。

益母草中生物碱的提取、分离、鉴定实验

以1%盐酸溶液为溶剂煎煮提取益母草中总生物碱,进行醇沉处理,再酸沉后,采用732阳离子交换树脂,进一步对上述益母草中生物碱的浓缩液进行分离纯化。以生物碱的沉淀反应、薄层层析法和分别以70%乙醇、0.5%盐酸甲醇、甲醇为溶剂进行紫外光谱扫描对其进行初步鉴定。结果表明:以5%氨水和70%乙醇为洗脱剂得到的2份干燥生物碱在硅胶薄层板上的展开情况基本相同,溶于3种溶剂的紫外图谱也基本一致。经5%氨水洗脱和用70%乙醇洗脱所得的生物碱所含成分相同且可能为同一种物质。

论竞业禁止的制度构建

在现代社会的商业经济生活中,竞业禁止随着市场经济的扩大而不断蔓延,并逐步在就业者与管理者之间签订的协议上占据了举足轻重的地位。但是由于相关法律的空缺,使得正常商业运作的成本提高了许多倍。因此,笔者将就如何构建竞业禁止制度进行可行性设计,进而推动经济社会制度化的进一步发展。

四种病毒灭活方法用于登革病毒灭活效果的比较

目的评价常用病毒灭活方法对血液制品中登革病毒(DENV)的灭活效果。方法将单采新鲜冰冻血浆(FFP),人凝血因子Ⅷ(FⅧ)和静脉注射免疫球蛋白(IVIG)3种血浆及其制品中加入高滴度(8.00-9.25)的登革病毒液,分别采用亚甲蓝(MB)光化学法灭活FFP、有机溶剂/去污剂(S/D)法灭活FⅧ、低pH常温孵化法和巴氏消毒法灭活IVIG;以1×10~6/mL A549细胞接种于T25的培养瓶中作为病毒传代及滴度滴定指示细胞,将灭活前后的血浆及制品接种于A549细胞并检测其DENV滴度,并通过qRT-PCR对DENV RNA做定量检测;评估不同的灭活方法对DENV的灭活效果。结果 DENV滴度下降:MB光化学法灭活FFP下降滴度≥5.92 log,S/D法灭活FⅧ下降滴度≥5.17 log、巴氏法和低pH法灭活IVIG均下降滴度≥5.92 log,其中MB光化学法灭活FFP、SD灭活FⅧ及巴氏法灭活IVIG后DENV RNA(cp/mL)降低1.25 log-2.25 log,低pH法灭活IVIG后DENV RNA(cp/mL)降低0.17 log。所有血浆和血液制品样品经灭活后,在DENV宿主细胞上3代盲传后均未检测到DENV RNA。结论 4种常用病毒灭活方法均能有效灭活血浆及血液制品中的DENV。

环状RNA hsacirc0000290调控寨卡病毒复制的分子机制的初步探究

目的探究可经血液传播的寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)在体外感染细胞后对环状RNA hsa_circ_0000290表达的影响及hsa_circ_0000290对寨卡病毒复制的影响。方法ZIKV感染A549或U251细胞后,连续1~4 d收集细胞并提取细胞总RNA。通过RT-qPCR检测hsa_circ_0000290的表达变化;hsa_circ_0000290由PDHX转录产生。通过转染siRNA敲低hsa_circ_0000290的表达后,通过RT-qPCR和Western blot检测对ZIKV和PDHX表达的影响。通过核质定位实验验证hsa_circ_0000290在细胞中的定位。结果与对照组相比,hsa_circ_0000290在感染ZIKV 1~4 d的A549和U251细胞中表达上调;hsa_circ_0000290主要定位于细胞核,敲低细胞内hsa_circ_0000290的表达水平可以抑制ZIKV RNA复制和ZIKV NS1蛋白的表达,促进PDHX的表达。结论ZIKV感染细胞后,hsa_circ_0000290表达水平显著升高;hsa_circ_0000290定位于细胞核中,特异性敲低hsa_circ_0000290表达水平后,明显抑制ZIKV复制。

HBV诱导生成的外泌体对巨噬细胞表型和功能的影响

目的 探究感染乙肝病毒(HBV)的肝细胞产生的外泌体对巨噬细胞细胞表型和功能的影响。方法 超速离心法结合免疫吸附法收集能够产生HBV颗粒的HepAD38细胞和普通肝癌细胞HepG2分泌的外泌体,通过粒径分析(NTA)、扫描电子显微镜及Western blot检测所提取外泌体的质量和纯度。人单核细胞(THP-1)经PMA诱导后分化为M0巨噬细胞并加入外泌体刺激,在不同时间点分别收取RNA和蛋白样本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞因子mRNA表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞因子蛋白表达水平;同时,用中性红实验检测巨噬细胞胞饮功能,用试剂盒检测巨噬细胞活性氧(ROS)产生水平。对提取纯化后的外泌体进行人逆转录芯片检测,选取差异表达的microRNA,通过qRT-PCR进行进一步验证。结果 与HepG2来源的外泌体相比,HepAD38细胞产生的外泌体可以引起巨噬细胞IL-1β、MCP-1及TNFα表达水平明显升高但对巨噬细胞胞饮功能和ROS生成量无明显影响。人逆转录芯片检测结果经KEGG分析及qRT-PCR验证,发现miR-6824-3p在高表达后也可引起IL-1β、MCP-1及TNFα表达水平明显升高。结论 感染HBV的HepAD38细胞可以通过外泌体影响巨噬细胞炎症因子的表达,而外泌体中的miR-6824-3p可能在这个过程中发挥重要作用。

泛素特异性蛋白酶18刺激乙型肝炎病毒复制的初步研究

目的了解泛素特异性蛋白酶18（USP18）对乙型肝炎病毒（HBV）复制的影响及其潜在机制。方法 1）USP18和Pol质粒构建：采用常规基因克隆方法,将人USP18编码序列及HBV多聚酶（Pol）编码序列分别构建到pcDNA3.1-3tag真核细胞表达载体内。2）研究Pol对USP18的影响：高表达转染Pol质粒至Hep AD38细胞内,抽提细胞内总RNA,逆转录成c DNA,用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测Pol对USP18的影响。3）研究USP18对HBV的影响：高表达转染USP18质粒至Hep AD38细胞内,抽提细胞内总RNA和总DNA,qRT-PCR检测USP18对HBV复制的影响。4）研究Pol与USP18之间的相互作用：将Pol质粒按一定比例转染到铺有293T细胞的10cm培养皿中,采用免疫共沉淀的方法检测Pol与USP18之间是否存在相互作用。结果成功构建USP18和Pol表达质粒,并在HepAD38细胞中高表达;过表达Pol蛋白促进USP18表达;过表达USP18刺激HBV复制;Pol与USP18存在相互作用。结论初步证明USP18可能通过与Pol相互作用促进HBV复制。

甲氨蝶呤对固有免疫关键分子干扰素的影响研究

目的为了探究具有免疫抑制和抗肿瘤作用的甲氨蝶呤(MTX)对干扰素(IFN)的影响,以及IFN在风湿免疫性疾病中的作用。方法以5、20、100μg/mL浓度梯度的MTX作用于Huh7.5.1细胞48h,采用实时荧光定量PCR法定量检测MTX干预后Huh7.5.1细胞内IFN-α、IFN-β、IFN-γ、干扰素刺激基因15(ISG15)、抗黏病毒蛋白(MxA)的mRNA表达量。结果 Huh7.5.1细胞在MTX(5、20μg/mL)干预下内源性IFN-α、IFN-β的mRNA表达量与对照组相比均明显上升,差异均有统计学意义(P<0.05),并且随着MTX干预浓度的上升而上升;MTX浓度为100μg/mL时,与对照组相比虽有上升但差异无统计学意义(P>0.05)。而IFN-γ的mRNA表达量仅在MTX浓度为20μg/mL时与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),在5、100μg/mL时虽有上升但差异无统计学意义(P>0.05)。在MTX干预后,MxA和ISG15的mRNA表达量均有不同程度的上升(P<0.05)。结论小剂量MTX治疗风湿免疫性疾病取得良好的疗效与IFN相关。

雷公藤对固有免疫分子干扰素诱导的研究

目的:为了探索具有免疫抑制和抗炎作用的雷公藤对干扰素的影响,以及雷公藤的风湿免疫性疾病治疗效果与干扰素的关系。方法:以1 ug/m L、5 ug/m L、10 ug/m L 3个浓度梯度的雷公藤作用于Huh7.5.1细胞48 h,采用荧光定量聚合酶链反应法定量检测甲氨蝶呤干预后Huh7.5.1细胞内IFN-α、IFN-β、IFN-γ、ISG15、Mx A的mRNA表达量。结果:雷公藤能够诱导细胞产生内源性IFN-α、IFN-β、IFN-γ,使干扰素信号通路下游因子ISG15和Mx A高表达。结论:雷公藤治疗风湿免疫性疾病的良好疗效与干扰素相关,为进一步研究雷公藤的作用机制和开发利用提供理论依据。

寨卡病毒感染与输血安全

寨卡病毒(ZIKV)是1种通过蚊虫传播的虫媒病毒。ZIKV感染人体后通常引起轻微的自限性疾病,绝大多数感染者症状较轻,常被忽视,但少数感染者会产生严重的神经系统并发症,特别是孕妇感染ZIKV有可能造成胎儿或婴儿小头畸形,因此近年来受到广泛关注。由于ZIKV存在高比例无症状感染者,且存在较高的病毒血症发生率,目前我国并未将该病毒纳入献血前常规病原体筛查,因此存在通过输血传播的风险。本文简要介绍ZIKV的生物学特征、流行特点、致病机理等,主要探讨ZIKV感染与输血安全。

静脉配置中心审方药师在促进抗菌药物应用合理性的药学干预效果

目的探讨静脉配置中心审方药师在促进抗菌药物应用合理性的药学干预效果。方法选取2016年1月至2018年10月于萍乡市人民医院使用抗菌药物治疗的患者作为对照组(n=48),另选取2018年11月至2021年8月于萍乡市人民医院使用抗菌药物治疗的患者作为观察组(n=52)。对照组在一般药学服务干预指导下静脉注射抗菌药物,观察组均在静脉配置中心审方药师指导下静脉注射抗菌药物,比较两组不合理处方类型分布情况、不合理处方严重程度、观察组临床不合理用药情况及干预结果、两组治疗费用及住院时间。结果观察组不合理处方率为7.02%,低于对照组的21.56%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组中、低风险处方占比比较差异无统计学意义;观察组抗菌药物处方里的高风险处方占比少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组各种不合理用药情况采取对应的干预措施,患者总采纳率为75.00%。观察组人均药物费用、人均抗菌药物费用少于对照组,住院时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论静脉配置中心审方药师可明显提高抗菌药物应用合理性,缩短患者住院时间,缩减患者住院费用。

哮喘患者用药依从性的影响因素分析及干预措施探讨

目的探讨哮喘患者用药依从性的影响因素,并针对影响因素提出干预措施。方法收集本院2017年5月~2019年5月收治的80例哮喘患者作为研究对象,依据CPAT评价标准进行分组,分别为依从性良好组(n=38)与依从性差组(n=42)。对两组患者进行问卷调查,并对用药依从性的影响因素进行多因素分析。结果单因素分析结果显示,年龄、文化程度、用药用法、哮喘知识掌握程度与用药依从性有关(P<0.05)。多因素分析结果显示,年龄、文化程度、用药用法是否正确、哮喘知识掌握程度为影响哮喘患者用药依从性的独立危险因素。结论影响哮喘患者用药依从性的危险因素为年龄、用药用法、文化程度、哮喘知识掌握程度,应采取针对性措施,以保证患者良好的用药依从性。

环保节能型发光透水混凝土的制备及应用

将发光骨料应用于透水混凝土面层中,制备具有照明与装饰功能的发光露骨透水混凝土路面。研究了骨料及不同胶材体系对发光露骨透水混凝土性能的影响。研究表明：应用5-10 mm石质发光碎石作为骨料,采用“水泥-超细粉煤灰”胶材体系,可制备出工作性、透水性、力学性能及表观效果良好的C20发光露骨透水混凝土路面。

磷渣复合粉对超轻质泡沫混凝土的性能影响研究

利用硅酸盐水泥和磷渣复合粉制备出湿容重为400kg/m3的超轻质泡沫混凝土,探讨了磷渣复合粉对泡沫混凝土凝结时间、孔结构、抗压强度、吸水率和导热系数的影响。结果表明:磷渣复合粉的适宜掺量在20%以内,泡沫混凝土各项性能与基准组相差不大,但后期强度高于基准组;超出这一范围,泡沫混凝土的凝结时间延长、孔径变大、早期强度降低、吸水率和导热系数增加。

锂渣在LC50轻集料混凝土中的应用研究

研究了锂渣对水泥净浆及胶砂性能的影响,依据该基础试验结果,分析了锂渣对LC50轻集料混凝土拌合物及混凝土硬化后力学性能的影响。试验结果表明,锂渣可以显著改善混凝土的保水性,是一种良好的保水增稠材料,锂渣—粉煤灰双掺(30%)时,锂渣的掺量为15%较为适宜,混凝土的坍落度/扩展度为270mm/690mm,28d抗压强度为59.5MPa,满足LC50轻集料混凝土的设计要求。

预拌现浇屋面泡沫混凝土施工技术

结合工程实例,介绍了预拌现浇屋面泡沫混凝土的整套施工工艺及过程质量管控措施,阐述了这一新型建筑屋面保温材料的性能优势及应用前景。

一种适用于普通预拌砂浆的复合型稠化剂的试验研究

以锂渣为载体,通过复合添加剂y、减水剂j、缓凝剂a、缓凝剂b、引气剂z等多种材料,研制出一种适用于普通预拌砂浆的复合型稠化剂A,在此基础上,以M15抹灰砂浆为研究对象,对比评价复合型稠化剂A的性能。结果表明:添加复合型稠化剂A的M15抹灰砂浆出机稠度为110 mm,4 h后为70 mm,分层度为6 mm,28 d抗压强度为24.6 MPa,14 d拉伸强度为0.26 MPa,28 d收缩率为0.060 8%,该砂浆的施工性能、力学性能以及收缩性能均满足工程施工要求。