BMP15对藏鸡等级卵泡颗粒细胞孕酮分泌的影响

为探究骨形态发生蛋白15(Bone Morphogenic Protein 15,BMP15)对体外培养的藏鸡等级卵泡颗粒细胞孕酮分泌的影响,研究体外分离、培养并鉴定藏鸡等级卵泡F1颗粒细胞后,用0、25、50、100 ng/mL四种不同浓度的BMP15蛋白单独处理或者联合25 ng/mL促卵泡素(FSH)处理细胞,72 h后采用ELISA法检测不同处理组细胞培养液中的孕酮含量。同时,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测不同处理组细胞中孕酮合成关键基因StAR、CYP11A1和HSD3B1 mRNA相对表达量。结果显示:免疫组化法鉴定体外分离培养的藏鸡F1卵泡颗粒细胞卵泡刺激素受体(FSHR)抗体阳性率95%以上;BMP15单独处理细胞后,随着BMP15浓度的升高,孕酮分泌量呈下降的趋势,且100 ng/mL处理组的孕酮分泌量极显著低于其他组(P<0.01);BMP15联合FSH处理细胞后,随着BMP15浓度的升高,孕酮分泌量呈现上升的趋势,其中100 ng/mL处理组的孕酮分泌量极显著高于其他组(P<0.01);不同处理组细胞中孕酮合成关键基因StAR、CYP11A1和HSD3B1 mRNA相对表达量与孕酮分泌量趋势基本一致。结果表明,体外BMP15蛋白单独处理抑制藏鸡等级卵泡颗粒细胞孕酮的分泌,但是联合FSH处理促进孕酮的分泌。

乳酸杆菌对牦牛小肠黏膜屏障的保护作用及机制

为探讨乳酸杆菌(Lactic acid bacteria,LAB)对犊牦牛大肠埃希氏菌(Escherichia coli,E. coli)所致小肠黏膜屏障损伤的治疗机制,本研究将24头健康犊牦牛随机分为4组:空白对照组、模型组(E. coli O78)、低LAB组(E.coli O78+1×10^7 CFU LAB)和高LAB组(E. coli O78+1×10^(11) CFU LAB)。HE染色评估犊牦牛小肠病理变化,并计算小肠各肠段肠绒毛长度(VH)与隐窝深度(CD)比值(V/C),Western blot检测小肠黏膜p38和MAPK蛋白表达水平。结果表明:1)E. coli O78处理的模型组犊牦牛小肠绒毛排列紊乱,隐窝深度增加,且界限模糊,黏膜固有层和下层有炎性细胞浸润,经LAB干预治疗,犊牦牛小肠绒毛组织病理结构得到改善。2)模型组小肠VH指数与V/C比值显著低于空白对照组,而随着LAB干预治疗剂量增加,小肠VH指数和V/C比值升高,其中高LAB组VH指数显著高于模型组和低LAB组(P<0.05),同时高LAB组V/C比值显著高于模型组(P<0.05),且高LAB组VH指数和V/C比值与对照组对比无显著性差异(P>0.05)。3)与对照组相比,模型组p38和MAPK蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),且p38和MAPK蛋白表达水平随着LAB干预治疗剂量的增加而降低,其中高LAB组p38和MAPK蛋白表达水平显著低于模型组和低LAB组,与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。综上,LAB可通过改善小肠形态结构,调节p38、MAPK等MAPK相关通路蛋白表达,对E. coli O78所致的犊牦牛腹泻起到治疗作用。本研究为益生菌抑菌产品的研发提供一定理论基础。