植物激素对茶树春季新梢生长发育的调控作用研究

激素在植物生长发育调控中发挥重要作用,为明确不同激素对茶树新梢生长发育的影响,挖掘参与调控这一过程的主要通路和关键基因,以龙井43为试材,在茶树处于萌动期时分别进行100μmol·L^(-1)脱落酸(ABA)、100μmol·L^(-1)赤霉素(GA_(3))和100μmol·L^(-1)吲哚-3-乙酸(IAA)喷施处理,观察新梢萌发表型,并对处理后第7天的新梢进行转录组测序分析。结果显示,外源ABA处理抑制新梢生长,处理7 d后芽长极显著短于对照;GA_(3)和IAA处理则具有促进作用,GA_(3)处理7 d芽长极显著长于对照,IAA处理14 d芽长极显著长于对照。转录组分析表明,ABA处理新梢中的氨基酸生物合成通路、GA_(3)处理的氧化磷酸化通路和光合作用通路及IAA处理的类黄酮生物合成通路是差异基因富集的主要通路;植物激素通路、光合作用通路相关的GAI、PSBO2、PSBQ-2和PSBP-1可能是参与新梢生长发育的关键基因。对部分候选基因的表达模式进行实时荧光定量验证,表明转录组分析结果可靠。以上研究明确了激素影响茶树新梢生长发育的主要通路和关键基因,将为全面揭示茶树新梢生长发育调控机制提供理论依据。

蛋白质-RNA相互作用鉴定技术研究进展

RNA结合蛋白(RNA binding protein,RBP)是基因表达调控的关键因子,参与包括蛋白质复合物的协调与稳定、RNA的加工与成熟以及mRNA的转运、稳定、翻译和降解等重要的细胞生物学过程。而RBP和RNA之间的相互作用可以在它们各自的生物学过程中起到重要作用。因此,快速、准确检测RBP-RNA相互作用的技术对研究RBP和RNA的功能至关重要。对近些年发展起来的RNA纯化的染色质分离(chromatin isolation by RNA purification,ChIRP)、RNA靶标的捕获杂交分析(capture hybridization analysis of RNA targets,CHART)、三分子荧光互补技术(trimolecular fluorescence complementation,TriFC)、RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)、紫外交联免疫沉淀(UV-crosslinking and immunoprecipitation,CLIP)、RNA Pull-down和RNA电泳迁移分析等主要RBP-RNA相互作用鉴定技术的基本原理和优缺点以及应用进行了综述,旨在为新型技术的发现提供新的思路。

茶树镁离子螯合酶H亚基基因CsChlH的克隆及其表达分析

克隆获得茶树(Camelliasinensis)镁离子螯合酶H亚基基因CsChlH完整开放阅读框序列(NCBI登录号:ON256194),对应编码1382个氨基酸残基。系统进化树分析显示,茶树CsChlH与猕猴桃AcChlH的亲缘关系密切。启动子克隆及序列分析显示,CsChlH可能响应光照、干旱、热激、低温、ABA和乙烯等多种信号,且可能调控叶绿素、类黄酮、糖等代谢以及叶绿体、叶肉、保卫细胞等器官发育。CsChlH蛋白定位于叶绿体中。茶树不同组织表达分析显示,CsChlH在富含叶绿素的源组织中表达量高,而在缺乏叶绿素的库组织中表达量低。CsChlH响应长时程弱光、低温、干旱而表达下调,短时程ABA、乙烯以及长时程高温信号能诱导其表达上调。研究结果揭示了CsChlH在茶树叶绿素代谢和胁迫响应中的重要作用。