产乳糖酶酵母菌株的筛选及高产酶酵母K.fragilis株培养产酶条件的优化

从9株能诱导产乳糖酶的酵母菌株中,筛选出一株既能利用蔗糖糖蜜增殖良好,又能利用乳糖诱导产酶最高的K.frasilis菌株。完成了对该菌株的增殖培养及产酶条件的优化,证实该菌株不仅可利用蔗糖糖蜜为主要原料替代乳糖作增殖碳源,且酶产量高于用乳糖作增殖的。确定了乳糖量为1.5％的诱导培养液及产酶培养的其它条件。将增殖和诱导培养二步法组成一连续发酵工艺,经实验室培养液发酵试验所得单位酶产量达38IU/ml,比“七五”科技攻关合同要求的单位酶产量(3IU/ml)提高了许多,为利用廉价原料生产“医用乳糖酶制剂”奠定了基础。

含乳糖酶冻干酵母制剂的研究

在研制双糖酶肠溶微囊及乳糖酶复合微囊的同时,我组还研制了含乳糖酶冻干酵母,具有成本低廉而利用广、酶活性高而稳定、生产流程短而简便等优点.该冻干酵母可制备成含乳精酶冻干酵母抗酸肠溶胶囊,该抗酸肠溶胶囊置人工胃液中2h,乳糖酶剩余活性仍在60%以上;置人工肠液中lh,乳糖酶释放率达100%.

酵母生产乳糖酶工厂试验

在前文报道增殖诱导二步法连续培养产乳糖酶的基础上,本文报道工厂150升罐及1.5吨罐发酵试验。150升罐经一级增殖再诱导培养,全流程发酵占罐时间为28小时,平均酶产量为47×10~6IU/吨发酵液;1.5吨罐经二级增殖再诱导培养,全流程发酵占罐时间为27小时(300升罐12小时,1.5吨罐15小时),平均酶产量为57×10~6IU/吨发酵液。

产乳糖酶酵母Kfragilis株增殖培养发酵条件的优化

目的：提高发酵液单位体积的酵母细胞总量，以提高酶得率。方法：采用单因素试验方法，对影响酵母生长的主要限制因子──培养液中可利用的糖含量进行了试验。用细胞浊度法来表示酵母细胞的增殖情况，Nelson－Somogyi法测定培养液中可利用的糖含量，凯氏定氮法测培养液中的氮含量，PH计测定PH值。结果：确定了Kfragilis酵母株增殖培养的较佳配方，当选择原色砂糖浓度为10％、pH为6时，细胞量比原配方提高了3．65倍。单位酶产量达122．4IU／ml。结论：优化后的该菌株增殖培养条件下，该菌株生长产酶情况良好，可用于生产。

消化道酶类药物剂型研究——双糖酶肠溶微囊

人体肠道各种双糖酶均可因先天性或继发性缺乏而引起相应的双糖消化吸收障碍。其中乳糖酶缺乏在东方人种内普遍存在。所引起的不良影响,对处于哺乳期的婴幼儿尤为严重。用外源性的双糖酶口服以辅助双糖消化吸收是一个较好的治疗方法。但是,由于微生物来源的双糖酶在消化道易被胃酸和胃肠道蛋白酶破坏,国外在临床试验中曾采取高剂量酶制剂口服的方法,以保证有足够的双糖酶残留量进入小肠发挥作用。此法成本高且疗效不稳定。本文报道双糖酶肠溶微囊的研制。体外实验证实,本制剂能使双糖酶在人体小肠内释放而避免被胃液破坏。有希望用于双糖吸收障碍症的临床治疗。