参麦注射液改善疲劳膈肌舒缩功能的实验研究

目的 :观察参麦注射液与氨茶碱对离体大鼠膈肌条疲劳的发生和 (或 )发展过程的影响之异同性。方法 :设立参麦注射液组、氨茶碱组、参麦注射液和氨茶碱合用组 (合用药组 )及对照组 ,采用电刺激法 ,测定等长收缩膈肌条在疲劳和恢复过程中有关指标的变化。结果 :膈肌疲劳发生时 ,其最大舒张速率(dR/dtmax)的降低较最大收缩峰值 (Pt)及最大收缩速率 (dT/dtmax)为早 ,dT/dtmax恢复较晚且不充分。参麦注射液能延长Pt降低 50 %所需的时间 ,且加快Pt的恢复 ;氨茶碱虽增加Pt,但使膈肌疲劳所需的时间缩短 ,并延缓疲劳膈肌功能的恢复。结论 :舒张功能障碍在膈肌疲劳发生中起着十分重要的作用 ,参麦注射液可能通过增强舒张能力从而改善疲劳膈肌的功能 ;氨茶碱在增加膈肌收缩功能的同时 ,损伤其舒张功能 ,此副作用能被参麦注射液部分拮抗。

青心酮对豚鼠离体气管条张力的影响及其机制

采用气管条浴槽实验方法 ,观察青心酮 (DHAP)对离体豚鼠气管螺旋条张力的影响。结果发现 :DHAP明显松弛豚鼠的离体气管平滑肌 ;抑制由乙酰胆碱 (Ach)、组胺 (His)和氯化钾所致离体豚鼠气管平滑肌的收缩反应 ;对 5 -羟色胺 (5 - HT)诱发的由内钙释放引起的 相收缩和外钙内流所致的 相气管平滑肌收缩均有一定的抑制作用。 3.96× 10 - 5 m ol/L DHAP则仅抑制 相收缩。随着其剂量的增大 (>10 - 4 mol/L ) , 相收缩也被抑制 ,上述抑制作用均呈剂量依赖性 ;消炎痛对 DHAP松驰离体气管平滑肌作用无明显影响。提示 DHAP这一效应可能与其钙拮抗有关 。

青心酮对血管内皮细胞和红细胞生物力学特性的影响

采用微管吸吮技术观察了体外培养肺血管内皮细胞及新鲜分离的红细胞在用青心酮处理后生物力学特性的变化。与未用药组比较 ,在加用青心酮 30 m in后 ,中、大剂量组内皮细胞弹性系数 K1 和 K2 增大 (P<0 .0 5 ) ,粘性系数 μ变化不大 ;红细胞表观变形指数和最大变形值也明显增加 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。提示青心酮可以增加肺血管内皮细胞弹性 ,并使红细胞变形能力明显增强 ,这可能是青心酮改善血液循环的生物力学机制。

溴隐亭对动物急性缺氧的影响

本文研究了溴隐亭对兔急性缺氧性肺动脉高压的影响和对小白鼠常压缺氧耐受力及对亚硝酸钠致小鼠死亡时间的影响。结果提示：溴隐亭可明显抑制兔急性缺氧性肺血管收缩反应，对体循环的影响甚微。氟呱啶醇能阻断溴隐亭这一作用；溴隐亭使常压缺氧小鼠生成时间较未给药者生成时间缩短，此作用亦为氟哌啶醇部分阻断；而溴隐亭对亚硝酸钠致小鼠死亡时间与未用溴隐亭小鼠无明显差别。

丹参改善小鼠慢性酒精性肝损伤机制的研究

目的探讨丹参改善小鼠慢性酒精性肝损伤的机制。方法建立小鼠慢性酒精性肝损伤模型,采用苏木素伊红(Hematoxylin eosin ,HE)染色,观察丹参干预后肝组织形态学改变,逆转录多聚酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT -PCR)检测肝组织toll样受体4(tolllikereceptor 4,TLR4)mRNA及血红素氧合酶1(hemeoxygenase -1,HO -1)mRNA的水平,以免疫组织化学方法检测TLR4蛋白表达水平。结果丹参能减轻酒精所引起的肝细胞脂肪变性、坏死,下调TLR4mRNA表达及HO 1mRNA表达,并能使TLR4阳性细胞数明显减少。结论丹参可通过对TLR4信号传导途径的影响来减少酒精所引起的肝损伤。

川芎嗪对脂多糖诱导巨噬细胞环氧化酶-2表达和心肌细胞凋亡的影响

目的观察川芎嗪对脂多糖 (LPS)诱导RAW 2 64 7小鼠巨噬细胞环氧化酶 2 (COX 2 )基因表达和活性的影响 ,进一步研究川芎嗪对脂多糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法采用RT PCR和免疫印迹检测巨噬细胞COX 2基因表达 ,酶联免疫分析其活性 ,并应用荧光显微镜技术对乳鼠心肌细胞凋亡进行检测 ,荧光分光光度计测定细胞内钙离子浓度。结果 1 0 - 6mol/L ,1 0 - 5mol/L和 1 0 - 4mol/L川芎嗪可显著减少LPS刺激的巨噬细胞COX 2mRNA和蛋白的表达 (P <0 0 5 ,P <0 0 1 ) ,但不同浓度川芎嗪对COX 2活性无明显作用 ;1 0 - 5mol/L川芎嗪可显著降低心肌细胞内钙浓度 ,拮抗LPS诱导的乳鼠心肌细胞凋亡 (P <0 0 5 )。结论川芎嗪具有抑制LPS诱导巨噬细胞COX 2表达和乳鼠心肌细胞凋亡的药理学效应。

青心酮活血化瘀作用机制的研究进展

青心酮是从秃毛冬青叶中提取的一种有效成分 ,具有抗血小板聚集 ,抗血栓形成 ,改善血流动力学及抑制平滑肌增生等作用。

肾上腺素对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞炎症介质表达的影响

目的 研究肾上腺素对脂多糖 (LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞株RAW 2 6 4 7中肿瘤坏死因子 (TNF α)、一氧化氮 (NO)、环加氧酶 2 (COX 2 )等表达的影响。方法 以 10ng/ml的LPS刺激体外培养的RAW 2 6 4 7细胞作为炎症模型 ,加入不同浓度的肾上腺素 (1× 10 -6,5× 10 -6,1× 10 -5,5× 10 -5mol/L)孵育 2 4h后 ,收集培养上清并提取细胞总蛋白 ,酶联免疫法测定上清中TNF α浓度 ,Griess法检测上清NO含量 ,免疫印迹法检测细胞总蛋白中COX 2的表达量。结果 10ng/ml的LPS明显诱导TNF α、NO、COX 2的产生 ,这一效应可被肾上腺素抑制 ;而单独加入肾上腺素时 ,对上述 3种炎症介质的表达无明显影响。结论 肾上腺素下调LPS诱导的巨噬细胞中炎症因子的表达 ,可能对炎症的发生发展起到一定的调节作用。

抗炎中药的药理机制与其促炎症缓解作用的关系研究

目的:基于新的炎症消退学说,结合传统抗炎中药清热疏导的理论,将其抗炎药理学机制与促进炎症缓解过程相结合,着重观察了几种抗炎中药对几种重要炎症缓解因子及细胞凋亡的关系.

青心酮对RAW264.7细胞可溶性Toll样受体4表达及炎症相关因子的影响

目的:观察活血化瘀中药秃毛冬青叶中有效成分青心酮对RAW264.7细胞炎症反应时可溶性Toll样受体4mRNA及蛋白表达、血红素氧和酶1mRNA表达、肿瘤坏死因子α分泌的影响。方法:①实验于2004-03/2005-01在华中科技大学同济医学院病理生理教研室完成。②采用RAW264.7巨噬细胞株建立细胞炎症反应模型。观察下述4种情况下培养液血红素氧和酶1mRNA的变化:脂多糖刺激;青心酮[青心酮注射液,3,4-二羟基苯乙酮40mg/支(2mL),实验用,北京制药三厂]预处理3h后加脂多糖刺激;青心酮和脂多糖同时加入;脂多糖刺激3h后加入青心酮。其他指标测定实验分为3组:空白对照组(正常细胞培养,加入等数量的培养基,不加入任何药物);青心酮预处理组(先加入溶有青心酮1×10-7mol/L的培养基培养3h,再加入脂多糖10μg/L刺激4,8h);未处理组(加入等数量的培养基3h,再加入脂多糖10μg/L刺激4,8h)。③采用反转录聚合酶链反应分析可溶性Toll样受体4、血红素氧和酶1mRNA的变化;Westernblot方法检测可溶性Toll样受体4蛋白水平的改变,用ELISA方法检测培养液肿瘤坏死因子α分泌的变化。④组间数据处理采用配对t检验。结果:①可溶性Toll样受体4mRNA表达:青心酮预处理脂多糖刺激4h后明显高于未处理组(P<0.01)。未处理组经脂多糖刺激4h后,明显低于空白对照组(P<0.05)。②可溶性Toll样受体4蛋白表达:青心酮预处理组脂多糖刺激8h后明显高于未处理组(P<0.05),但与空白对照组比较,差异不明显(P>0.05);未处理组脂多糖刺激8h后,明显低于空白对照组(P<0.05)。③血红素氧和酶1mRNA表达:青心酮预处理后加脂多糖刺激和青心酮、脂多糖同时加入后明显高于脂多糖刺激后(P<0.05)。④培养液中肿瘤坏死因子α:脂多糖刺激后明显增加(P<0.01);青心酮预处理脂多糖刺激后明显低于未处理组(P<0.01)。结论:青心酮预处理能有效的抑制炎症反应,可能与其上调可溶性Toll样受体4mRNA及蛋白表达,增加血红素氧和酶1mRNA表达,减少肿瘤坏死因子α分泌有关。

脂氧素与炎症消退

脂氧素是继前列腺素和白三烯后被证实的又一重要的花生四烯酸代谢产物 ,新近研究发现脂氧素对多种炎性细胞的功能和多种炎症相关基因的表达有广泛的调节作用 ,能促进炎症反应的及时消退 ,被认为是机体内一类重要的内源性脂质抗炎介质 ,因而在炎症 。

青心酮对活化RAW264.7细胞株血红素氧合酶-1mRNA/一氧化碳及TNF-α表达的影响

目的观察青心酮对活化 RAW264.7细胞株血红素氧合酶-1mRNA/一氧化碳(Hemeoxygenase-1/carbon monoxide,HO-1mRNA/CO)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法用 LPS 做刺激剂,建立活化细胞模型。分别用 RT-PCR 法检测 HO-1mRNA 的表达,血红蛋白结合法检测 CO 的相对含量,Western-blot 方法检测 TNF-α蛋白质的表达。结果 10^(-5)mol/L 青心酮使活化巨噬细胞 HO-1mRNA 表达增加,CO 增加,TNF-α蛋白表达下降。结论青心酮上调活化 RAW264.7细胞株 HO-1mRNA/CO 的表达,抑制 TNF-α蛋白的产生,这可能是 DHAP 抗炎作用机制之一。

青心酮防治动脉粥样硬化与内脂素的关系

目的:观察青心酮对ApoE(-/-)小鼠主动脉粥样硬化病变的影响与内脂素的关系。方法:取8只8周龄C57BL/6小鼠为正常对照组;取24只8周龄雄性ApoE(-/-)小鼠,随机分成3组:动脉硬化组(n=8,im,等量生理盐水);青心酮治疗组(n=8,im,10mg·kg-1·d-1);辛伐他汀治疗组(n=8,im,10mg·kg-1·d-1)。所有实验小鼠均饲以"西方类型膳食"饲料至12周。取血检测内脂素、血脂;剪取主动脉根部行冰冻切片,油红O染色观察主动脉粥样硬化病变情况;剪取主动脉根部斑块组织,观察斑块中内脂素的分布情况;行电镜切片,观察青心酮对斑块中平滑肌细胞、内皮细胞的结构影响。结果:青心酮治疗组血清内脂素减少,血脂降低,主动脉粥样硬化病灶形成减少,平滑肌细胞、内皮细胞损伤减轻,斑块中内脂素含量减少。结论:青心酮能减少ApoE(-/-)小鼠主动脉粥样斑块的形成,可能通过抑制内脂素生成而降低血脂发挥其作用。

3、4-二羟基苯乙酮对大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响

目的 研究 3、4 二羟基苯乙酮 (3、4 Dihydroxyace tophenone,DHAP)对钾通道的作用。 方法 建立大鼠肺内动脉平滑肌全细胞膜片钳方法并观察 3、4 二羟基苯乙酮对大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾离子通道的作用。结果 ①将平滑肌细胞钳制在 - 4 0mV ,给予从 - 30mV复极化至 +6 0mV、阶跃电压为 10mV、脉冲时间是 30 0ms的去极化刺激10次时 ,可记录到时间及电压依赖性的延迟整流钾电流。②在指令电位 +5 0mV、+6 0mV时 ,细胞外给予 10 -6mol·L-1DHAP 5min后 ,可使该电流由用药前 (12 97± 2 4 5 )、(16 83± 3 2 8)pA/pF ,增加至 (18 2 9± 2 6 3)、(2 2 90±3 2 1)pA/pF ,增加百分比为 4 1%和 36 % (P <0 0 5 ,n =6 )。结论 DHAP可能通过开放钾通道而舒张肺内动脉平滑肌细胞 ,这可能是其降低肺动脉高压的重要机制之一。

脂氧素A4对内毒素诱导小鼠肺内炎症反应的影响

目的探讨脂氧素A4对脂多糖诱导小鼠急性肺内炎症反应的影响。方法36只雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、脂氧素A4组、ZnPP组、内毒素组、脂氧素A4治疗组和ZnPP+脂氧素A4治疗组,每组6只。雾化吸入脂多糖8 h后,测定肺泡灌洗液总蛋白浓度和TNF-α含量,测定肺组织湿干质量比值、丙二醛(MDA)活性和一氧化氮(NO)浓度,免疫组化测定肺组织HO-1的蛋白表达。结果与LPS组比较,脂氧素A4治疗组肺水肿减轻,肺泡灌洗液总蛋白浓度、TNF-α含量、肺组织MDA活性、NO含量均降低(P<0.01),而HO-1的蛋白表达明显升高,肺组织损伤减轻。HO-1抑制剂ZnPP减弱脂氧素A4保护作用。结论脂氧素A4能减轻内毒素诱导的肺部急性炎症反应,HO-1介导其保护作用。

脂氧素A4对肝细胞生长因子诱导HepG2肝癌细胞血管生成相关细胞因子表达的影响

目的:探讨脂氧素A4(LXA4)对肝细胞生长因子(HGF)诱导的HepG2肝癌细胞血管生成相关细胞因子表达的影响。方法:体外培养HepG2肝癌细胞,实验分为空白组、HGF处理组、HGF+LXA4处理组、HGF+脂氧素受体激动剂BML-111处理组。RT-PCR检测脂氧素受体(ALX)表达情况,Western blotting检测COX-2、MMP-2、MMP-9、IκBα和NF-κB p65的表达量,ELISA检测TNF-α、IL-1β、VEGF和TGF-β分泌水平,荧光素酶报告质粒检测NF-κB转录活性。结果:HepG2肝癌细胞表达ALX,LXA4和BML-111下调COX-2、MMP-2和MMP-9,抑制TNF-α、IL-1β、VEGF和TGF-β分泌,并且干扰NF-κB转位及其转录活性。结论:脂氧素抑制HGF诱导HepG2肝癌细胞表达血管生成相关细胞因子,包括VEGF、COX-2、TNF-α、IL-1β、TGF-β、MMP-2及MMP-9,此效应可能通过干扰NF-κB活化实现。

脂氧素对Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2／白细胞介素-2受体表达的影响

目的:研究脂氧素对JurkatT细胞增殖和白细胞介素-2表达的影响。方法:体外培养JurkatT细胞,anti-CD3(2mg/L)和anti-CD28(2mg/L)单抗刺激Jurkat细胞活化,加入不同浓度脂氧素(0.1nmol/L-100nmol/L)共同孵育24h后,加入[3H]-TdR继续孵育6h,液闪仪测放射性活度;或收集培养上清,ELISA测IL-2水平,收集细胞,流式细胞仪检测细胞表面IL-2受体α亚单位CD25表达,PI染色后经流式细胞仪进行细胞周期分析。结果:脂氧素剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28活化的Jurkat T细胞增殖(P<0.05);细胞周期分析发现脂氧素处理组S期细胞比例减少;脂氧素显著降低培养上清中IL-2含量(P<0.05)但对CD25表达无明显影响(P>0.05)。结论:脂氧素能抑制活化Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2表达;脂氧素可通过影响T淋巴细胞的活化增殖进而发挥免疫负性调节作用。

复发性与初发性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块的比较

提要:目的研究复发性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块的特征及其在脑梗死复发中的预报价值。方法彩色多普勒超声仪对该院5年来收治的复发性脑梗死患者55例(复发组)、初发性脑梗死患者53例(初发组)和健康志愿者56名(对照组)进行颈动脉探查,观察颈动脉粥样硬化斑块的数目及部位,并测量血管壁的厚度和斑块的大小及厚度,计算斑块积分。结果复发性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块的发生率高于初发组和对照组,软斑及溃疡斑数目明显增高。结论颈动脉不稳定性粥样斑块的存在是复发性脑梗死的危险因素。颈动脉超声检查对复发性脑梗死有极好的预报价值。

脂氧素对巨噬细胞表面免疫抑制分子和共刺激分子表达的影响

目的研究脂氧素A4(LXA4)对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,分为空白对照组、脂多糖(LPS)组和LXA4组。各组处理预设时间后,RT-PCR检测PIR-A和PIR-B基因表达水平,总一氧化氮检测试剂盒检测一氧化氮含量,流式细胞仪检测细胞表面MHC-Ⅱ分子、CD80(B7-1)、CD86(B7-2)的表达量。结果LXA4显著上调PIR-B,而几乎不影响PIR-A的基因表达水平;明显促进一氧化氮分泌(P<0.01);抑制LPS活化巨噬细胞表达MHC-Ⅱ和CD86(P<0.05),但对CD80的表达无明显影响(P>0.05)。结论LXA4促进巨噬细胞表达免疫抑制分子PIR-B和一氧化氮,抑制巨噬细胞的抗原提呈能力。