贵阳地区成人外周血淋巴细胞亚群及活化正常参考值

目的：对贵阳地区100例健康成人外周血淋巴细胞亚群及活化正常参考值进行调查并建立本实验室相应项目的正常参考范围。方法：采用BD Simultest IMK-Lymphocyte四色试剂盒的荧光抗体和BD活化双色试剂对100例体检健康的成人外周血进行染色，以FACSAria流式细胞仪进行分析，FACSDiva Software软件程序获取数据并分析结果，SPSS软件进行统计。结果：18～64岁健康成人的淋巴细胞亚群相对值正常参考范围为：CD3^＋细胞（总T淋巴细胞）为49．41％～79．93％，CD3^＋CD19^＋细胞（B淋巴细胞）为2．09％～16．05％，CD3^＋CD4^＋细胞（Th淋巴细胞）为19．56％～45．03％，CD3^＋CD8^＋细胞（Ts淋巴细胞）为11．96％-38．40％，CD3^＋／CD16^＋CD56^＋细胞（NK细胞）为0．19％～32．05％；活化的CD3^＋细胞的相对值为0％～7．33％，活化的CD8^＋细胞的相对值为0％～5．63％。女性Th淋巴细胞、活化的CD8^＋细胞相对值比男性高（P〈0．05）。结论：不同地域、不同种族健康成人外周血淋巴细胞亚群正常参考值有所不同，各实验室应建立针对本地区人群的相应参考值范围。

血清卵泡抑素对甲状腺癌的诊断及预后影响

目的探讨血清卵泡抑素(FS)对甲状腺癌的诊断与预测预后的价值。方法选择2018年4月~2020年4月收治的86例甲状腺癌患者,选择同期90例甲状腺良性病变患者和50例健康体检者为研究对象,检测血清FS水平、甲状腺球蛋白(Tg)和降钙素,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清FS、Tg、降钙素对甲状腺癌的诊断效能,并分析血清FS、Tg、降钙素与甲状腺癌预后指数的相关性。结果三组间血清Tg、降钙素、FS水平差异具有统计学意义(P<0.05),其中甲状腺癌组的血清Tg、降钙素、FS水平均明显高于甲状腺良性病变组和健康对照组,差异比较有统计学意义(P<0.05);血清FS以483.10 ng/L为截断值,AUC为0.842,灵敏度、特异度、准确度分别为45.3%、51.4%、51.8%,低于血清Tg、降钙素;86例甲状腺癌患者的预后指数为61.57(43.20~84.93),相关性分析显示,血清Tg、FS水平与预后指数无关(r=0.218、0.084,P>0.05),而血清降钙素水平与预后指数呈负相关(r=-0.604,P<0.05)。结论血清FS在甲状腺癌诊断及预测预后方面的价值有限。

Bayer ADVIA120全自动血细胞分析仪性能评价

目的对BayerADVIA120全自动血细胞分析仪(ADVIA120仪)进行性能评价。方法检测ADVIA120仪的精密度、总重复性、稳定性、线性范围及携带污染率,并与手工法进行对比检验。结果精密度、总重复性、稳定性、线性范围、携带污染率等均在允许范围内,与手工法测定WBC、RBC、PLT及HGB等主要参数的结果有良好的相关性,无统计学差异(P>0.05)。结论ADVIA120仪主要参数检测性能符合要求。

血清HE_4与CA_(125)对卵巢上皮性癌诊断价值及其与临床病理特征的关系研究

目的：探讨血清人附睾蛋白4（HE4）与癌抗原125（CA125）检测对卵巢上皮性癌的诊断价值及其与临床病理特征的关系。方法：测定47例卵巢上皮性癌患者和48例卵巢良性疾病患者血清HE4和CA125水平,通过HE4与CA125的检查值计算出二者诊断卵巢上皮性癌的敏感性、特异性,并绘制ROC曲线,计算ROC曲线下面积（AUC）,分析比较两者的诊断效能。并分析血清HE4与CA125水平与卵巢上皮性癌临床分期及病理组织分级的关系。结果：1卵巢上皮性癌组血清HE4、CA125平均水平（中位数分别为534.53 pmol/L和687.26 U/ml）均显著高于卵巢良性疾病对照组（中位数分别为46.65 pmol/L和32.86 U/ml,P〈0.01）。2HE4单项检测的AUC为0.952（95%CI 0.910-0.995）,临床诊断效能优于CA125（AUC 0.852,95%CI 0.772-0.952）。3在卵巢上皮性癌患者中血清HE4的表达水平随患者临床分期、病理组织分级的增高而上升;血清CA125的表达水平随临床分期、病理组织分级的增高而上升不明显。结论：血清HE4具有比CA125更优的诊断卵巢上皮性癌的价值。血清HE4的表达水平随患者临床分期、病理组织分级的增高而上升较CA125明显,可作为卵巢上皮性癌筛查的肿瘤标志物。

ADVIA 120型血液分析仪异常报警参数及其可靠性分析

目的 了解ADVIA120型全自动血液分析仪对细胞形态异常提示功能的可靠性。方法 将160例仪器提示异常参数的标本和112例无异常提示的标本作血涂片，经瑞特-姬姆萨染色镜检后比较结果。结果 真阳性率：未成熟粒细胞（IG）、血红蛋白浓度不等（HC-VAR）、小红细胞（MICRO）、核左移（LS）、大红细胞（MAC—RO）、低色素性红细胞（HYPO）、大血小板（LPLT）、原幼细胞（BLASTS）、红细胞大小不等（ANISO）为86．7％～100．0％，高色素性红细胞（HYPER）为69．2％，有核红细胞（NRBC）、变异淋巴细胞（ATYP）、血小板凝集（PLT-CLM）为13．3％～32．3％；以上所有参数真阴性率为82．8％～100．0％（平均95．0％）。结论 仪器对报警参数的真阴性率高而有较强的筛检能力。仪器对NRBC、ATYP、PLTCLM的异常报警提示准确性不理想，而对其他参数的异常报警提示有较高的可信性。因此，对于结果有异常提示的标本应当配合手工镜检确诊。

趋化因子CCL22和CCL20协同皮肤抗原诱导的调节性T淋巴细胞对皮肤移植的影响

目的:研究小鼠皮肤移植模型中趋化因子CCL20和CCL22联合调节性T细胞对移植皮肤存活时间的影响。方法:将皮肤移植小鼠分为四组,每组3只小鼠,分别为Treg组、Treg+CCL20组、Treg+CCL22组与对照组。其中Treg细胞经同种异体皮肤抗原诱导。以C57BL/6小鼠为同种异体供体,BALB/c小鼠为受体行皮肤移植手术。进行皮肤移植后立即于异体皮下注射Treg细胞2×105个细胞/鼠,体积为200μl。以后每日于异体皮下注射趋化因子CCL20或CCL22,共连续注射10d,观察并记录皮肤的存活情况。Treg细胞定植实验:首先利用磁珠分选方法分离皮肤抗原诱导Treg细胞,并利用锝99标记分离到的Treg细胞;皮下注射3 h后,处死小鼠,用GC-2016γ放射免疫计数器检测各脏器及移植皮肤的放射性活度。结果:1经Treg进行干预的小鼠,其异体皮肤存活时间均显著长于手术对照组(P<0.05),而且同种异体抗原诱导Treg在趋化因子CCL20或CCL22存在下异体皮肤存活时间显著高于单纯使用Treg组和对照组(P<0.001)。2注射皮肤抗原诱导的Treg细胞后,自体和异体皮肤移植组Treg细胞主要分布在自体和异体皮肤,分别占注射Treg组细胞的60%和98%;加趋化因子CCL20组和CCL22组的Treg主要分布在肝脏。结论:趋化因子CCL20和CCL22能够协同促进经皮肤抗原诱导的Treg细胞延长异体皮肤的存活时间,这种作用效果可能与趋化因子CCL20和CCL22趋化Treg细胞向肝脏大量定植相关。

血清HE_4与CA_(125)水平在诊断卵巢上皮性癌中的应用价值

目的检测血清人附睾蛋白4（HE4）与癌抗原125（CA125）水平,探讨其在上皮性卵巢癌中的诊断价值。方法测定47例上皮性卵巢癌患者和48例卵巢良性疾病患者血清HE4和CA125水平,通过HE4与CA125的检测值来分析比较两者对上皮性卵巢癌的诊断效能。结果 （1）上皮性卵巢癌组血清HE4、CA125平均水平,中位数分别为534.53pmol/L和687.26U/mL,结果均显著高于卵巢良性疾病对照组（中位数分别为46.65pmol/L和32.86U/mL,P〈0.01）。（2）HE4单项检测的ROC曲线下面积（AUC）为0.952（95%CI∶0.910-0.995）,临床诊断效能优于CA125（其AUC为0.852,95%CI：0.772~0.952）。结论 HE4较CA125更具有早期诊断和鉴别诊断上皮性卵巢癌的价值,可作为上皮性卵巢癌筛查的肿瘤标志物。

血涂片法血小板计数方法学的建立及临床应用研究

目的通过多种方法计数血小板(PLT)结果比较研究,以探讨血涂片染色直接镜检法 (简称直接涂片法)和米勒氏窥盘法(简称米氏法)(合称血涂片法)PLT计数结果的可靠性。方法在检查并确定直接涂片法和米勒氏法计数PLT精密度后,分别采用血细胞分析仪、手工稀释法、直接涂片法、朱氏法同时计数60份血样PLT。结果直接涂片法和米氏法重复检测同一涂片PLT的CV值分别为2．13％和1．21％;检测同一血样20张涂片PLT的CV值分别为4．24％和2．35％。4种方法计数PLT结果接近(P>0．05)。结论严格控制操作条件下,血涂片法镜下PLT计数结果可用于临床诊断疾病。

可溶性细胞间黏附分子-1在脑梗死中的临床意义

目的探讨可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)在脑梗死发生、发展中的作用,以指导临床脑梗死病程的判断。方法采用双抗夹心ABC酶联免疫吸附试验动态检测35例急性脑梗死患者血清sICAM-1水平,同时设立30例脑供血不足对照组和30例健康对照组。结果脑梗死患者血清sICAM-1水平在脑梗死发生第1天即明显增高,高于脑供血不足对照组和健康对照组(P<0.01);1～3d呈增高趋势,3～7d呈下降趋势,7～14d又呈增高趋势。不同脑梗死体积组的sICAM-1水平差异无统计学差异(P<0.05)。结论sICAM-1与急性脑梗死密切相关,与脑梗死的发生、发展有一定的联系,可用作监测脑梗死发生及病程进展的辅助指标。

进展性脑梗死的细胞因子研究

目的探讨进展性脑梗死与细胞因子的关系。方法从2007-02—2012-02我院收治的进展性脑梗死患者中随机选择240例作为进展性脑梗死组,选择同期一般血栓性脑梗死患者254例作为一般脑梗死组,另外随机选取同期来我院体检中心接受体检的健康者280例作为对照组。结果当患者出现进展性脑梗死时,血清IL-6、IL-8等细胞因子的水平会明显上升,并随着时间的发展出现不同的动态变化。结论了解细胞因子在脑梗死发病中的水平变化和具体作用,有助于发现脑梗死的发病机制,寻找有效的临床干预办法。

全自动血细胞分析仪HGB测定多种室内质控方法应用研究

目的探讨自动化血细胞分析仪简便有效的室内质量控制(IQC)方法,确保血红蛋白(HGB)检验结果准确可靠。方法参照1988年美国临床实验室修正法规(CLIA'88)能力比对检验的分析质量要求,BayerADVIA120全自动血细胞分析仪(ADVIA120)定标后,每天随机抽取已测标本(记录结果为靶值)置4～8℃冰箱,第二天同法检验(简称A法);用已知定值全血质控液在ADVIA120仪上随标本上机检验(简称B法);采用A法病人标本手工法与仪器法盲法对比检验(简称C法),以这三种方法(简称ABC法)联合应用进行室内质控。用ADVIA120仪检测的同一样本(记录结果为靶值)在AC970血细胞仪(AC970仪)、KX-21血细胞仪(KX-21仪)和MEK8118K血细胞仪(MEK8118K仪)同时检验(简称ABC-D法),以控制其三台仪器检验质量。结果ADVIA120仪ABC法HGB室内质控检测误差绝对值(%)分别为A法0.0～7.1,B法0.0～3.4和C法0.0～6.6,为在控范围。AC970、KX-21仪和MEK8118K仪ABC-D法室内质控检测结果比较稳定。结论建立的ABC和ABC-D法用于全自动血细胞仪HGB测定室内质控,效果满意,保证了HGB检测质量,值得推广应用。

人GINS2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其在上皮性卵巢癌中的表达

目的构建人GINS2基因RNA干扰慢病毒表达载体,并建立稳定干扰GINS2基因表达的上皮性卵巢癌细胞系,为研究GINS2蛋白在上皮性卵巢癌发生发展中的作用奠定基础。方法针对GINS2基因序列,按照RNAi序列的设计原则,设计、合成GINS2基因特异性小分子干扰siRNA(small interference RNA,siRNA)靶点,与慢病毒构建重组形成shRNA表达载体,利用PCR和测序鉴定获取正确克隆。将筛选出的最有效重组载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞并测定病毒滴度。随后将其感染上皮性卵巢癌SKOV3细胞株细胞,采用Real-time PCR 检测靶基因的沉默效率。结果慢病毒RNA干扰载体经酶切和测序鉴定证实准确连接测序正确,且包装出来的病毒纯化后滴度达5×10^8TU/mL。RT-qPCR、Western blot结果显示感染后GINS2 mRNA及蛋白水平显著下降。结论成功构建了人GINS2基因特异性的慢病毒干扰载体,并获得了GINS2基因稳定干扰的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系。

不同抗原诱导后小鼠调节性T淋巴细胞趋化特性动态研究

目的:了解不同抗原诱导下调节性T淋巴细胞表面趋化因子受体表达的情况及在趋化因子CCL20、CCL22引导下T淋巴细胞的趋化行为。方法:用C57BL/6小鼠皮肤抗原、卡介苗或生理盐水诱导BALB/c小鼠,于诱导后1、2、3及4周,用流式检测两组小鼠脾脏单个核细胞悬液中CD4+CD25-T、CD4+CD25+CD127-T细胞表面趋化因子受体CCR4和CCR6表达的动态变化,并用趋化试验观察CCL20、CCL22作用下各CD4+T细胞亚型的趋化特性。结果:1皮肤抗原诱导组CD4+CD25-T细胞表面CCR4表达平均荧光强度在第4周时显著高于第3周,卡介苗诱导组趋化因子受体表达无显著变化;皮肤抗原诱导组CD4+CD25+CD127-T细胞表面CCR4表达平均荧光强度在第4周时最高(P<0.05),卡介苗诱导组趋化因子受体表达无显著变化。2皮肤抗原诱导组CD4+CD25-T细胞表面CCR6表达的平均荧光强度在第2周最高(P<0.05),卡介苗诱导组是第4周最高(P<0.05);皮肤抗原诱导组CD4+CD25+CD127-T细胞表面CCR6表达的平均荧光强度前两周显著高于第3周、第4周(P<0.05),在卡介苗诱导组第2周及第4周比第1周高(P<0.05)。3CCL20趋化下CD4+CD25+CD127-T细胞的趋化指数在卡介苗诱导4周时较高(P<0.05),皮肤抗原诱导2周和4周时升高(P<0.05);CCL22趋化下,卡介苗诱导组与皮肤抗原诱导组CD4+CD25+CD127-T细胞的趋化指数变化均无统计学意义。结论:1提示Treg表面趋化因子受体的表达与抗原性质有关。2诱导早期CCL22对Treg细胞的趋化作用明显,诱导后期CCL20作用明显。

罗氏生化试剂用于奥林巴斯全自动生化分析仪的溯源性分析

目的 :研究现用罗氏生化试剂系统在奥林巴斯全自动生化分析仪上使用的溯源性 ,即罗氏生化试剂系统与奥林巴斯试剂系统检测结果的一致性。方法 :依据美国临床实验室标准化委员会 (NationalCommitteeforClini calLaboratoryStandards,NCCLS)EP9-A文件 ,每天取患者样本 8份 ,分别用两种试剂测定血清中常规 14项生化指标 ,连续测定 5天 ,记录检验结果 ,计算线性方程和相关系数 ,并以美国CLIA’88对室间评估的允许误差为判断依据进行结果的判断。结果 :两种试剂系统所测得的检测结果相关性良好 ;除了ALB的中、低浓度范围、UA、CK、BUN、ALT的低浓度范围以及CREA、ALP外 ,其余项目的一定浓度范围均可在奥林巴斯全自动生化分析仪上使用罗氏试剂。结论 :罗氏生化试剂系统在奥林巴斯仪器上使用 。