早期体外心脏震波通过抑制TGF-β1-Smad2/3-MMP-9信号通路改善心肌纤维化

目的 探究急性心肌梗死(AMI)大鼠早期经体外心脏震波治疗(CSWT)后心功能和心肌纤维化改善与转化生长因子β1-细胞信号转导分子2/3-基质金属蛋白酶9(TGF-β1-Smad2/3-MMP-9)信号通路的相关性。方法 采用随机数字表法将30只SD大鼠分为sham、AMI、AMI+CSWT、AMI+SB431542和AMI+SB431542+CSWT组,每组各6只。sham组仅开胸,其他4组构建AMI模型。AMI+SB431542组和AMI+SB431542+CSWT组在术后4d行SB431542处理,持续3d。AMI+CSWT组和AMI+SB431542+CSWT组均行9次CSWT[于术后7d开始行CSWT,两次之间间隔1d,能量:0.09m J/mm~2,一个缺血区域共1800震,频率:3Hz(3震/s)]。各组均在术后4d和62d行超声心动图检测左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室舒张末期容积(LVEDV)和左心室收缩末期容积(LVESV)。术后62d行心脏组织取材,HE染色、Masson染色评估心肌组织病理形态学改变及心肌纤维化程度;于心肌梗死边缘区检测TGF-β1-Smad2/3-MMP-9信号通路相关蛋白表达水平及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达水平。结果 (1)术后4d,与sham组相比,AMI、AMI+CSWT、AMI+SB431542和AMI+SB431542+CSWT组的LVEF、LVFS明显降低,LVESV明显扩大(均为P<0.05)。(2)术后62d,与sham组相比,AMI组的LVEF、LVFS明显降低,LVEDV、LVESV明显扩大(均为P<0.05);与AMI组相比,AMI+CSWT组的LVEF、LVFS明显改善,LVEDV、LVESV明显回缩(均为P<0.05);与AMI+CSWT组相比,AMI+SB431542+CSWT组的LVEF、LVFS、LVEDV和LVESV无统计学差异(均为P>0.05)。(3)HE染色显示,AMI组较sham组红色区域排列紊乱、蓝色区域增多;AMI+CSWT组较AMI组红色区域排列整齐、蓝色区域减少,但较sham组蓝染区域增多。(4)Masson染色显示,与sham组相比,AMI组胶原容积分数(CVF)明显升高(P<0.001);与AMI组相比,AMI+CSWT和AMI+SB431542组的CVF明显降低(均为P<0.05);与AMI+CSWT组相比,AMI+SB431542+CSWT组CVF较高,但无统计学差异(P=0.65)。(5)Westernblot结果显示,与sham组相比,AMI组的TGF-β1、Smad3、MMP-9、COL-Ⅰ和COL-Ⅲ表达水平明显升高(均为P<0.05);Smad2水平有升高趋势,但无统计学差异(P=0.40);与sham组和AMI组相比,AMI+CSWT组的TGF-β1、Smad2、Smad3、MMP-9、COL-Ⅰ和COL-Ⅲ表达水平明显降低(均为P<0.05);与AMI+CSWT组相比,AMI+SB431542+CSWT组的TGF-β1、Smad2、Smad3和MMP-9表达水平明显降低,COL-Ⅰ和COL-Ⅲ表达水平明显增加(均为P<0.05)。结论 早期CSWT可改善心功能、抑制心肌纤维化,且与抑制TGF-β1-Smad2/3-MMP-9信号通路相关。

基于排队理论的通道使用问题研究与应用

考虑到通道使用问题在军事和生活中的广泛应用,采用排队理论的方法,简要介绍理论的基本原理,描述了常用排队系统的模型和状态方程。结合演训活动中的实例,计算出排队理论的各数量指标,为指挥员定下决心提供定量的依据。文章立足现有理论和实际场景,为部队在演训活动乃至未来实战中顺利完成任务打下坚实的理论基础。

基于UPLC-Q-TOF/MS的连桂宁心汤体外与入血成分分析及鉴定

目的采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(ultra-performance liquid chromatography-quadrupole-time-of-flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS)对连桂宁心汤化学成分和入血成分进行分析,初步阐明其可能的药效物质基础。方法采用ACQUITYTM UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为A(0.1%甲酸的水溶液)-B(0.1%甲酸的乙腈溶液),梯度洗脱,柱温为45℃,进样量为5μL。采用电喷雾离子源,正/负离子双模式检测,离子源温度120℃,脱溶剂和雾化气为高纯N_(2),锥孔N_(2)反吹流量50 L/h,锥孔电压30 V;毛细管电压3.0 kV(正)/2.0 kV(负);脱溶剂温度450℃,流量800 L/h;分子量范围50~1200 Da。结果结合文献报道和一级MS、二级MS/MS高分辨质谱数据,在连桂宁心汤水煎液中鉴定出68个成分,以黄酮类、生物碱类、三萜类为主,在给药大鼠血浆样本中鉴定出33个成分,以黄酮类、生物碱类、三萜类、挥发油类为主,其中黄酮类及生物碱类鉴定出的成分数量及丰度较体外明显降低。结论UPLC/Q-TOF MS/MS技术是鉴定中药复方成分的有效手段,结合连桂宁心汤化学成分及其入血成分,初步阐明连桂宁心汤的药效物质基础,为探讨其作用机制及其质量控制提供了有效的科学依据。

山岭隧道抢救性施工风险管理研究

山岭隧道抢救性施工因施工地点、性质的特殊性和复杂性,其相较普通施工任务存在较大安全风险。为提高山岭隧道抢救性施工风险管理的系统性和科学性,将风险管理划分为风险识别、风险评估和风险应对三个部分,描述了风险识别、评估的方法和步骤,风险应对的手段及预警体系,提出智慧工地理念应用于抢救性施工风险管理的具体方法,制定了标准化、规范化、科学化的风险管理流程,为山岭隧道抢救性施工风险管理提供了理论基础。

体外心脏震波治疗促进梗死心肌血管再生和抑制心肌纤维化的机制研究

目的探讨急性心肌梗死(AMI)大鼠经体外心脏震波治疗(CSWT)后心肌缺血和心功能改善与外周血内皮祖细胞(EPCs)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)的相关性,以揭示CSWT促血管生成机制。方法采用随机数表法将20只SD大鼠分为假手术+CSWT组(5只)、AMI组(5只)和AMI+CSWT组(10只)。假手术+CSWT组仅开胸,其他两组构建AMI模型。假手术+CSWT组和AMI+CSWT组均行9次CSWT治疗[能量:0.09 m J/mm^(2),次数:900次,频率:3 Hz(3次/s)]。各组均在术前和术后1 d、30 d抽取外周静脉血检测SDF-1、TGF-β1含量和EPCs集落数,并于术后5 d、30 d实施超声心电图检测左室射血分数(LVEF)。术后30 d行心脏组织取材,分别采用HE染色、Masson染色评估心肌组织病理形态学改变及心肌纤维化程度;于心肌梗死边缘区检测TGF-β1蛋白含量,Ⅷ因子免疫组化染色计数心肌毛细血管密度。结果(1)术前,三组间的EPCs、SDF-1和TGF-β1含量均无统计学差异(均为P>0.05)。(2)各组观察期内EPCs、SDF-1随时间推移呈上升趋势;术后1 d,假手术+CSWT组EPCs明显高于AMI组、AMI+CSWT组[(0.71±0.08)×10^(-3)%比(0.52±0.04)×10^(-3)%、(0.61±0.07)×10^(-3)%,均为P<0.05];术后30 d,三组间的EPCs无统计学差异(P>0.05)。(3)术后1 d和30 d,假手术+CSWT组的SDF-1明显低于其他两组(均为P<0.05);术后30 d,AMI+CSWT组的SDF-1明显高于AMI组[(203.80±110.13)ng/ml比(127.82±19.61)ng/ml,P=0.012]。(4)术后1 d,AMI组和AMI+CSWT组的TGF-β1含量均较术前明显增加(均为P<0.05);术后30 d,除AMI组外,其他两组的TGF-β1含量较术后1 d均降低,且假手术+CSWT组、AMI+CSWT组明显低于AMI组[(37448.72±7987.74)ng/ml、(38402.03±8993.55)ng/ml比(56844.75±8311.27)ng/ml,均为P<0.05]。(5)与AMI组相比,AMI+CSWT组的心肌结构虽有破坏,但细胞水肿程度较轻,局部可见完整心肌和新生血管排列,心肌纤维化程度较轻,TGF-β1蛋白含量明显降低,心肌毛细血管密度高。(6)三组大鼠组内比较:术后5 d和30 d三组大鼠的LVEF均无统计学差异(均为P>0.05),AMI+CSWT组的LVEF术后30 d较术后5 d绝对值增加1.14%(P>0.05)。结论CSWT促进缺血心肌血管生成、抑制心肌纤维化的机制之一,可能是通过上调SDF-1、抑制TGF-β1的生成,来共同促进EPCs增殖、转化和向缺血心肌区域的动员。

癌胚抗原相关细胞黏附分子源性多肽KM17对血小板活化作用的研究

目的探讨癌胚抗原相关细胞黏附分子(CEACAM1)源性多肽KM17对血小板聚集、释放、黏附功能的影响。方法采用血小板聚集仪观察多肽KM17对凝血酶、胶原、花生四烯酸(AA)、二磷酸腺苷(ADP)等激动剂诱导的血小板聚集的影响;流式细胞术观察多肽KM17对ADP激活血小板后P-选择素释放的影响;显微镜下观察多肽KM17对血小板静态黏附于胶原基质的影响。结果多肽KM17能显著促进ADP诱导的血小板聚集且呈剂量依赖(P<0.05),而对AA、胶原及凝血酶诱导的血小板聚集差异均无统计学意义(P>0.05);此外,多肽KM17对ADP激活血小板后P-选择素释放及血小板静态黏附于胶原基质的差异也无统计学意义(P>0.05)。结论多肽KM17可明显促进ADP诱导的血小板聚集,但对ADP活化血小板后P-选择素释放及血小板静态黏附于胶原基质未见明显作用。

超声心动图三维斑点追踪技术对乳腺癌曲妥珠单抗治疗中心脏毒性评估的应用

目的 探讨超声心动图三维斑点追踪技术对乳腺癌曲妥珠单抗治疗中心脏毒性评估的应用。方法 选取昆明医科大学第一附属医院2020年11月至2022年7月收治的应用曲妥珠单抗治疗乳腺癌患者65例,分别在治疗后3个月、6个月、9个月、12个月后给予常规超声心动图及三维斑点追踪技术(threedimensional speckle tracking technique,3D-STI),观察不同时间点的心脏指标参数的差异,包括左室射血分数(LVEF)、左房容积指数(LAVI)、二尖瓣舒张早期血流速度/二尖瓣环舒张早期移动速度(E/Em)、二尖瓣环舒张早期移动速度/二尖瓣环舒张晚期移动速度(Em/Am)、二尖瓣环收缩期移动速度(Sm)、二尖瓣舒张早期血流速度(E峰)、二尖瓣舒张晚期血流速度(A峰)、二尖瓣舒张早期环移动速度(Em)、二尖瓣舒张晚期环移动速度(Am)、左室扭转(LVtw)、左室整体纵向应变(GLS)、整体环周应变(GCS)、整体径向应变(GRS)、整体面积应变(GAS)指标。结果 治疗后3个月、6个月、9个月、12个月相关参数和治疗前相比,LAVI、E/Em、Am有所升高,Em/Am和Em有所下降,LAVI和E/Em之间呈正相关性;与治疗前相比,治疗后3个月、6个月、9个月、12个月的LVEF、GLS、GRS、LVtw、GCS、GAS均有所下降(P <0.05)。结论 乳腺癌患者应用曲妥珠单抗治疗时应用超声心动图三维斑点追踪技术效果理想,可以早期、准确对心脏毒性情况进行判断,可以为早期治疗提供参考依据,改善预后、临床结局方面价值显著。

运动康复对心肌梗死大鼠心脏纤维化及心功能的影响

目的探究运动康复对心肌梗死大鼠心脏纤维化及心功能的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为4组:心肌梗死运动组(MI-E组)、心肌梗死不运动组(MI-Sed组)、假手术运动组(Sham-E组)、假手术不运动组(Sham-Sed组),每组5~7只。采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)制备心肌梗死模型,而假手术组只穿针不结扎。术后1周开始运动训练,包括适应性运动1周和正式运动4周,而不运动组全程不参加运动训练。运动结束后行超声心动图检查,HE、Masson和Tunel染色,以及透射电镜检测。结果与Sham组比较,MI组左心室室壁变薄及收缩功能降低,以MI-Sed组明显(P<0.05);而MI-E组与MI-Sed组比较,LVESD、LVEF和FS有所改善(P<0.05);Sham-E组与Sham-Sed组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示与Sham组比较,MI组心肌细胞呈现不同程度溶解,伴炎性细胞浸润,成纤维细胞增生,而MI-E组损伤较轻。Masson染色显示MI组较Sham组心肌细胞排列紊乱,心肌纤维化明显增加,而MI-E组与MI-Sed组、Sham-E组与Sham-Sed组相比较,胶原容积分数(CVF%)降低(P<0.05)。Tunel染色显示MI组较Sham组心肌细胞凋亡数增多,而MI-E组与MI-Sed组、Sham-E组与Sham-Sed组相比较,心肌细胞凋亡指数降低(P<0.05)。透射电镜显示MI组较Sham组心肌细胞及线粒体损伤严重,肌纤维疏松紊乱,而MI-E组较MI-Sed组心肌细胞损伤较轻,线粒体结构较完整,自噬小体形成较多。结论运动康复可减少MI大鼠的心肌细胞损伤和细胞凋亡,减少心肌梗死面积,改善心肌纤维化及心功能;运动可适度诱导自噬水平发挥心脏保护作用。

基于自然拼读方法的中小城市英语课程构建与教学设计

自然拼读法在我国大城市小学英语教学中效果显著,但在某些中小城市尚未得到落实。基于自然拼读教学对小学英语教学的显著作用,文章分析了中小城市自然拼读发展现状与问题,并结合自然拼读教学法的实施现状,提出符合其发展趋势的课程构建模式:降低接触拼读法教学的起始年级、设置有关自然拼读教学内容的课程、开辟第三课堂-绘本阅读、多渠道培养儿童自然拼读兴趣、拓展自然拼读课外学习途径、健全相应课后评价体系。

中小城市小学英语自然拼读教学现状与应对策略研究--以宿迁市为例

自然拼读近年来为学者广泛关注,其对学生英语学习有着独特作用。宿迁作为中小城市,小学英语教材呈现如下特征:宿迁市小学英语教材统一使用省编教材,没有相关的教材编制,宿迁市并未实施自然拼读法,但已有教师在词汇教学、阅读教学、写作教学等教学活动中使用自然拼读。为提升学生听说能力、语篇能力,为学生英语学习长远发展奠定基础,为教师教授自然拼读提供借鉴,本文从以下几方面提出中小城市小学英语自然拼读应对策略:新课程改革推进、国家政策保障、抓住语言学习关键期、新教材引领新方向、学校管理者转变观念、教师拓展专业知识、改革小学英语考试与评价模式、推行语篇阅读或课后阅读绘本的活动。

生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45α在心血管疾病中的研究进展

哺乳动物细胞受到DNA损伤刺激时,生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45α(GADD45α)可与多种生物大分子相互作用在细胞周期阻滞、DNA损伤修复、细胞增殖、凋亡等细胞应答反应中发挥重要的调控作用。GADD45α表达调控的信号通路与肿瘤、心血管疾病等多种疾病的发生、发展密切相关。阐明GADD45α的功能及其在疾病中的作用机制,有助于了解许多疾病的发病机制,为诊断及治疗提供新的靶点。

左室憩室伴二尖瓣重度关闭不全一例

1临床资料患者女性,53岁,因“反复胸闷,活动后气促”就诊,查体:呼吸20次/min,脉搏104次/min,血压121/89 mmHg。心界向左扩大,心率110次/min,心房颤动节律,心尖可闻及3/6级收缩期吹风样杂音。既往有高血压病史,规律服用贝那普利10 mg/d,血压控制不佳。心电图提示:持续性心房颤动(图1)。经胸壁超声心动图(TEE)提示:(1)二尖瓣重度关闭不全致左房、左室增大;(2)左室憩室形成(二尖瓣后瓣环)(图2)。

论网络媒体言论自由的规制

网络媒体言论自由是言论自由的外在表现形式之一,其本质体现为法律对于公民在网络空间中合法发表评论、交流思想且不受个人或公权力干涉权利的保护。网络媒体言论自由是维护我党政治意识形态安全、国家政治安全和国防安全、促进我国网络秩序健康绿色发展的应有之义。但由于当前我国监管技术滞后以及立法、执法、司法环节还不够完善,使得我国网络秩序及意识形态安全的稳定性正遭受严峻考验。为此我国应依宪治理以网络谣言为主的不良言论,健全法律规制体系,加强对不良言论的监督,以达到网站空间健康发展、行稳致远之目的。

对两项政策工具执行情况的调查——以镇江市为例

疫情以来,为进一步落实金融支持实体经济的政策措施,助力市场主体纾困发展,人民银行创新普惠小微信用贷款支持政策、中小微企业贷款阶段性延期还本付息政策两个直达经济实体的货币政策工具,加大对小微企业的直接支持,实现金融支持稳企业保就业的总体目标。为了解两项政策工具出台后的执行情况,人民银行镇江市中心支行对辖内28家主要银行业金融机构进行了调查,发现政策执行中存在的问题,进一步提出相关建议。

全三七片抗血小板聚集作用及优势分析研究

目的:评价三七创新新药全三七片的抗血小板聚集作用及其作用优势。方法:采用人富血小板血浆和洗涤血小板,检测全三七片对不同血小板激活剂诱导的血小板聚集率和Ca^(2+)浓度;采用大鼠富血小板血浆,对比全三七片和三七提取物对二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集率;通过注射80%乙醇建立胃出血模型大鼠,考察全三七片与阿司匹林对便潜血的影响;通过小鼠凝血实验和大鼠凝血四项的检测,观察全三七片的止血作用。结果:全三七片可以剂量依赖性地抑制ADP、凝血酶、U46619、胶原、anti-CD9诱导的人血小板聚集率(均P<0.01)和Ca^(2+)释放(P<0.05或P<0.01);可以抑制ADP诱导的大鼠血小板聚集率(P<0.01),且作用明显优于传统三七提取物;全三七片以及与阿司匹林联合用药均可降低胃出血模型大鼠的便隐血等级(均P<0.05),而单用阿司匹林则未见显著性差异(P>0.05);全三七片还可显著缩短小鼠的凝血时间和大鼠的活化部分凝血活酶时间,具有一定的止血作用。结论:三七创新药物全三七片具有显著的抗血小板聚集作用,具有多途径、多靶点的作用特点,且因其出色的止血作用还可以降低出血风险,是一种安全、有效的抗血小板新药。

人甲状腺激素受体相互作用蛋白15的初步结晶实验及其在人组织表达的研究

目的:构建人甲状腺激素受体相互作用蛋白15(thyroid hormone receptor interacting protein15,TRIP15)的原核表达载体,在大肠杆菌表达并纯化、结晶表达产物;证实TRIP15在人脐静脉内皮细胞株、血小板、二尖瓣、胆囊和胶质瘤存在表达。方法:以人肝细胞cDNA文库为模板,通过PCR扩增TRIP15的全长编码区序列,双酶切后连接到pGEX-6P-1载体上,转化E.coli BL21(DE3)菌株,通过亲和层析及分子筛对表达产物进行纯化,采用气相扩散悬滴法筛选并优化结晶条件,通过X射线晶体衍射技术检测晶体衍射;采用RT-PCR和Western blot研究TRIP15在人脐静脉内皮细胞株、血小板、二尖瓣、胆囊和胶质瘤的表达情况。结果:成功构建了TRIP15的原核表达载体,获得了电泳纯TRIP15蛋白,得到了蛋白质晶体,但衍射能力很弱;通过RT-PCR证实其在人脐静脉内皮细胞株、血小板、二尖瓣、胆囊和胶质瘤存在表达。结论:成功构建了TRIP15的原核表达载体、建立了表达纯化策略并获得了初步结晶的实验条件,为最终解析其三维结构奠定了基础;初步证实TRIP15在人脐静脉内皮细胞株、血小板、二尖瓣、胆囊和胶质瘤存在表达,为相关研究的开展奠定了基础。