大鼠骨髓源性内皮祖细胞的体外分离、培养及鉴定

目的:体外分离、扩增培养大鼠骨髓源性内皮祖细胞,并进行生物学特性鉴定,为后续实验研究提供材料准备。方法:采用密度梯度离心法和差速贴壁法分离获得单个核细胞,置于特殊培养基EGM-2MV进行扩增培养,对细胞行免疫荧光法检测CD34、CD133、VEGFR2的表达情况,摄取DiI-ac-LDL、结合FITC-UEA-1双染色鉴定及细胞迁移实验。结果:刚分离的单个核细胞小而圆,诱导培养4d左右细胞开始变大,部分呈梭形或多角形,2周左右呈条索状排列;细胞免疫荧光法鉴定CD34、CD133、VEGFR2为阳性,细胞既能吞噬DiI-ac-LDL又能与FITC-UEA-1结合;细胞迁移实验可见每个视野迁移细胞数为(16.6±1.05)个。结论:通过密度梯度离心法和差速贴壁法能成功获取单个核细胞,在特定培养基EGM-2MV中培养后可分化成为内皮祖细胞,为后续实验提供了细胞来源。

Cas9基因编辑技术对巴马小型猪生命体征的影响

为探讨Cas9基因编辑技术应用在小型巴马猪时,在麻醉状态下对其生命体征的影响和重要脏器组织学变化,为基因编辑巴马猪在麻醉手术中的应用提供基础生理数据。使用诱导麻醉配合呼吸麻醉对20头野生型巴马猪和24头Cas9基因编辑型巴马猪进行麻醉,监测麻醉实验动物的呼吸频率、心率、体温和血压等生命体征,比较麻醉后野生型巴马猪和基因编辑型巴马猪之间生命体征和重要脏器组织学差异。结果表明,在排除月份差异的情况下,野生型巴马猪和Cas9基因编辑型巴马猪的体长和体重无明显差异(P>0.05),在麻醉状态下,二者呼吸频率、心率、体温和血压均无显著性差异(P>0.05);与野生型相比Cas9基因编辑型巴马猪的肺脏、心脏、肝脏及肾脏等重要脏器的组织病理学不存在明显变化。研究表明,Cas9基因编辑技术对巴马猪的生命体征无影响,对重要组织器官组织学上影响不明显。

携抗ICAM-1单抗和抗CD34单抗双靶向微泡的制备及体外寻靶研究

目的制备同时携抗ICAM-1单抗和抗CD34单抗的双靶向微泡，鉴定其基本性质，并观察体外寻靶能力。方法采用“生物素-亲和素”桥连法分别构建携抗ICAM-1单抗和抗CD34单抗双配体（MBD）、携抗ICAM-1单抗（MBICAM-1）和携抗CD34单抗（MBCD34）3种靶向微泡，光学显微镜下观察靶向微泡的形状，并用马尔文激光粒度分析仪、DFY超声图像定量分析仪、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪检测靶向微泡的基本特性和抗体结合率。倒置显微镜下观察双靶向微泡与内皮祖细胞（EPCs）和损伤人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的结合情况。结果3种靶向微泡的形状、粒径、表面电位及抗体结合率差异均无统计学意义（P〉0．05），MBD的回声强度高于MBICAM-1、MBCD34和普通生物素化微泡（MBBiotin）（P〈0．01）。MBD与EPCs和损伤HUVECs的结合率明显高于MBBiotin（P〈0．01），MBD和MBCD34与EPCs的结合率、MBo和MBmm与损伤HUVECs的结合率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论成功制备了携抗ICAM-1单抗和抗CD34单抗的双靶向微泡，体外实验证实此双靶向微泡与内皮祖细胞和损伤血管内皮细胞均能特异性结合。

超声心动图心尖四腔心切面图像质量智能评分研究

目的探讨基于深度学习的多尺度图像质量评价Transformer网络(MUSIQ)对超声心动图质量智能评分的可行性。方法选取2021年12月至2022年4月在四川省人民医院完成超声心动图检查的457例受检者的心尖四腔心切面动态图像(共70181帧)。由2位高年资专科医师根据图像切面质量,将图像标注为0分(极差)~5(优秀)分,所有图像按照8∶1∶1的方式划分为训练集、验证集和测试集。然后采用MUSIQ模型进行网络训练和验证,并选取在验证集上综合性能表现最好的模型作为最终模型。将测试集中MUSIQ模型预测分数与专业医师所标注的分数进行比较,以精确率、召回率、F1分数对模型的诊断性能进行评价。结果模型预测结果在0~5分的精确率平均为0.941,召回率平均为0.941;F1分数平均为0.941,均处于较高值范围。同时,当图像大小为600×800时模型在GPU上的单帧推理时间为18 ms,满足实时部署要求。结论基于深度学习的MUSIQ网络对心尖四腔心切面图像质量智能评分结果与超声医师人工打分结果一致性较高,具有较高的可行性;同时由于该方法对心尖四腔心切面没有做任何前置假设,原理上可以推广到任何标准超声切面,有利于实现超声图像质量智能化评估的标准化和规范化。