结晶紫分子印迹微球的合成及其性能

以结晶紫(CV)为模板分子、α-甲基丙烯酸(MAA)为功能单体、二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)为交联剂,采用沉淀聚合法合成结晶紫分子印迹微球。同时,考察合成过程中不同交联剂、模板分子与MAA的配比以及交联剂用量对微球性能的影响。结果表明:采用恒温水浴振荡法,以30 mL乙腈为溶剂,模板分子、功能单体和交联剂物质的量比为1∶4∶20,所制备的聚合物微球最大吸附量Q为39.1μmol/g,分离因子(α)和印迹效率因子(β)分别为3.76和3.18,对目标分子结晶紫具有良好的特异性识别和吸附能力。

草地贪夜蛾组织蛋白酶B的基因克隆、序列分析、三维结构预测及其分子对接模拟

昆虫组织蛋白酶B(Cathepsin B)在昆虫发育和代谢过程中发挥重要作用。本研究首先克隆了草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J.E.Smmith)的组织蛋白酶B基因Cathepsin B(SCB),获得其开放阅读框(ORF)序列(Gen Bank登录号:HQ110064)。生物信息学分析表明,该基因的开放阅读框包含1 026 bp的片段,编码341个氨基酸,预测N-末端含有长度为20个氨基酸残基的信号肽序列,去除信号肽序列后,预测成熟蛋白分子量为35.6 k D,等电点为6.59。氨基酸序列与15种物种Cathepsin B比较有51.2%-96.2%的一致性,与甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hiibner)相似度最高,达96.2%。利用同源建模预测SCB的三维结构,经动力学的优化,SCB折叠成紧密而稳定的球状结构,含6个对结构有稳定作用的二硫键,亲水性氨基酸主要包被在蛋白表面。同时分子对接模拟结果表明,SCB结合口袋比较浅,形状不规则,袋口较宽。ARG19、VAL23和ASN24为活性位点关键氨基酸残基,抑制剂CA与SCB活性位点3个关键氨基酸残基有较强的相互作用,且均主要表现为静电相互作用能,其中VAL23、ASN24与CA形成氢键。以期为进一步运用生物实验手段研究Cathepsin B的结构和功能,设计和开发昆虫组织蛋白酶类抑制剂类杀虫剂奠定基础。

基于自制水培装置培养的花生芽苗白藜芦醇含量分析

研究花生芽不同培养方式、不同培养天数、不同组织部位白藜芦醇含量的差异及其进一步培养成花生苗白藜芦醇含量的变化。运用水培和土培两种方式进行花生发芽,利用高效液相色谱仪(HPLC)检测分析不同发芽天数花生芽白藜芦醇含量,选出最优发芽时间,再利用自制水培装置将花生芽培养成花生苗,对其根、茎、叶白藜芦醇含量进行分析。结果表明:花生芽发芽后5 d,其白藜芦醇含量最高,土培和水培含量分别为117.6、42.27μg/g。自制水培装置培养的花生苗根系发达,其白藜芦醇含量明显高于花生芽含量,花生苗根部白藜芦醇的含量达143.4μg/g,远高于茎、叶的含量。装置制备成本为350.0元,制作材料简单,使用操作简单,可种植各种蔬菜及花卉,改变了传统果蔬主要由大田种植的格局。

花生根茎中白藜芦醇提取工艺的优化及含量测定

为了优化花生根茎中白藜芦醇提取工艺,以提取时间、提取温度、乙醇浓度和液料比为影响因素,通过单因素实验和响应面实验考察其对白藜芦醇提取量的影响。结果表明,提取温度对花生根茎中白藜芦醇提取量影响最大,提取时间影响最小,并通过响应面法优化得到最佳工艺。使用优化的提取工艺提取并测定了4种不同的花生品种根茎中白藜芦醇的含量,结果表明从化花生品种白藜芦醇含量最高,可达863.3 μg/g。

喜树碱对B16F10细胞增殖及黑色素合成抑制机理

为研究喜树碱(Camptothecin,CPT)对B16F10小鼠恶性黑色素瘤细胞的增殖及黑色素合成抑制机制,利用噻唑蓝(Methylthiazoletetrazolium,MTT)检测法、显微观察法、Na OH裂解法和多巴氧化法分析不同浓度的CPT对细胞增殖、形态、黑色素合成及酪氨酸酶活性的影响.结果显示:随着CPT浓度的增高和处理时间的延长,B16F10细胞的增殖抑制增强. 160μmol/L CPT处理72 h,B16F10细胞增殖抑制率达77. 0%,一定范围内呈现时间和浓度依赖性(P <0. 05).同时不同浓度CPT对细胞黑色素合成和酪氨酸酶活性也具有明显抑制作用,40μmol/L CPT处理72 h,细胞中黑色素的合成量为85. 37%,酪氨酸酶的活性为56. 4%(P <0. 05).结果表明,喜树碱能有效抑制小鼠黑色素瘤细胞B16F10的增殖和细胞内的黑色素的产生,其机制可能与抑制酪氨酸酶的活性有关.

分子印迹聚合物固相萃取花生根茎中白藜芦醇

为考察花生废弃物的综合利用价值,以白藜芦醇(Resveratrol,RES)为模板分子、α-甲基丙烯酸(α-methacrylic acid,MAA)为功能单体、二甲基丙烯酸乙二醇酯(Ethylene glycol dimethacrylate,EGDMA)为交联剂,按1∶4∶25的摩尔比,以甲醇为溶剂采用沉淀聚合法合成了白藜芦醇分子印迹聚合物微球,并以此印迹聚合物微球作为固相萃取柱填料,制备了白藜芦醇分子印迹固相萃取柱,探究柱子的最佳吸附条件,再用此固相萃取柱对花生根、茎中的白藜芦醇进行分离、纯化.结果表明,制备的印迹微球其印迹因子为1.62,固相萃取柱对白藜芦醇具有显著的特异性吸附效果,白藜芦醇分离、纯化后的纯度可达92.5%,回收率为76.2%.研究结果表明花生废弃物可综合利用.