柑橘大实蝇对不同颜色和糖类的偏好及对糖类的嗅觉反应

为探明影响柑橘大实蝇Bactrocera minax(Enderlein)成虫取食偏好的因素,本文研究了其对不同颜色和糖类物质的选择及其嗅觉反应。结果表明:柑橘大实蝇成虫明显偏好黄色和橙色基质的食物,对绿、白、蓝、黑、红色食物趋性较弱;对不同糖类的选择顺序是:红糖>蜂蜜>蔗糖和白糖;不同采集地间和不同性别间的柑橘大实蝇对颜色、糖类物质的选择差异不显著。嗅觉行为测试结果,柑橘大实蝇雌雄虫对所测试几种糖的气味均表现明显趋性,其中,雌虫对红糖和蜂蜜气味的嗅觉反应比雄虫更敏感。研究结果可以为柑橘大实蝇成虫食诱剂的研制和诱捕器的设计提供重要参考依据。

柑橘大实蝇气味结合蛋白基因BminOBP25的克隆、原核表达及组织表达分析

【目的】昆虫的气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)与嗅觉识别密切相关,在触角感受器淋巴液内运输外界的脂溶性气味分子顺利到达嗅觉受体过程中起着关键的作用。本研究对柑橘大实蝇Bactrocera minax的气味结合蛋白基因进行了克隆和表达分析,旨在更好地了解气味结合蛋白在柑橘大实蝇嗅觉识别中的作用及为进一步研究柑橘大实蝇嗅觉传递的分子机制奠定基础。【方法】利用RT-PCR和RACE技术克隆柑橘大实蝇的气味结合蛋白基因,并进行生物信息学分析;构建重组表达载体p ET28a(+)-Bmin OBP25,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中,SDS-PAGE及Western blotting鉴定重组表达蛋白;采用荧光定量PCR检测该基因在柑橘大实蝇成虫不同组织中的表达。【结果】克隆获得柑橘大实蝇气味结合蛋白基因的c DNA全长序列,命名为Bmin OBP25(Gen Bank登录号:MH181875)。测序结果表明,Bmin OBP25开放阅读框全长447 bp,编码148个氨基酸,预测分子量为17.5 k D,编码序列具有OBPs典型的6个保守半胱氨酸和6个α螺旋区域特征。在IPTG诱导下目标蛋白以6×His标签融合蛋白的形式在宿主菌中得到稳定表达。荧光定量PCR分析表明,Bmin OBP25 mRNA在成虫触角、头(去除触角)、胸、腹、足、翅和产卵器中均有表达,其中在触角、头(去除触角)、足和产卵器中表达量较高。【结论】Bmin OBP25在柑橘大实蝇成虫触角、头、足和产卵器中具有高转录活性,提示该基因在非嗅觉组织中可能也具有生理功能,特别是可能在昆虫的取食与产卵地选择过程中起重要作用,其功能还需深入研究。本研究实现了Bmin OBP25基因的原核表达,为深入研究Bmin OBP25基因的功能奠定基础。

基于mtDNA COI基因序列的中国柑橘果实蝇的分子鉴定及柑橘大实蝇种群的遗传多样性分析

【目的】探明危害我国柑橘的实蝇种类以及柑橘大实蝇Bactrocera minax不同地理种群和不同寄主种群的遗传多样性。【方法】利用mtDNA COI基因对危害柑橘的果实蝇进行种类鉴定,采用MEGA软件对其中28个地理种群的535头果实蝇COI基因片段(约505 bp)序列进行比对,分析种间及种内遗传距离,构建系统发育树。使用DnaSP软件分析柑橘大实蝇不同地理种群和不同寄主种群的遗传多样性。【结果】从柑橘虫果内共鉴定出4种实蝇,分别为柑橘大实蝇B.minax、桔小实蝇B.dorsalis、蜜柑大实蝇B.tsuneonis和瑞丽果实蝇B.ruiliensis。这4种实蝇的种间遗传距离为0.0264~0.2410,种内遗传距离为0.0000~0.0140,种间与种内遗传距离没有重叠区域。单个柑橘虫果内一般仅有1种实蝇,极个别柑橘果实可同时被两种实蝇危害(4/43);在这些为害柑橘的实蝇种类中,以柑橘大实蝇的个体数量比例最大,占90.70%。柑橘大实蝇地理种群遗传多样性高,28个种群共有17个单倍型。【结论】柑橘大实蝇是所调查地区柑橘实蝇的绝对优势种,其种群遗传分化程度较高,扩散危害风险大。本研究结果对柑橘果实蝇类的监测和防控具有重要意义。

湖南洞庭湖区蝶类群落多样性动态及其影响因素分析

为掌握湖南洞庭湖区蝶类的多样性及其与生境的相关性,在2018年4—10月对岳阳地区6种生境的蝴蝶进行了连续观测。共记录和采集蝴蝶4511头,经鉴定隶属于5科36属50种,其中,蛱蝶科种类最多(21种,占42.00%),灰蝶科次之(9种,占18.00%),凤蝶科和粉蝶科各7种(占14.00%),弄蝶科6种(占12.00%)。区系组成分析表明:广布种31种(占62.00%),东洋种18种(占36.00%),古北种1种(占2.00%)。不同生境的蝶类多样性存在差异,其中,针阔叶混交林生境的汨罗神鼎山(A5)的蝶类物种丰富度最高(5.422),优势度指数最低(0.092);而农田生境的岳阳建新农场(A2)的蝶类物种丰富度最低(2.086),优势度指数最高(0.738)。菜粉蝶(Pieris rapae)为农田、小型湖泊、典型草原和人工幼林生境的优势种,分别占样线个体数的85.70%、76.12%、44.91%和35.78%;连纹黛眼蝶(Lethe syrcis)为常绿和落叶阔叶林的优势种,占样线个体数的25.24%;酢浆灰蝶(Pseudozizeeria maha)为典型草原生境的另一个优势种,占样线的33.73%。不同生境的蝶类多样性在各月份间呈现时序动态变化(春季和秋季的蝶类物种丰富度较高),同时,受植被类型、人为干扰和气象条件等因素的影响。

柑橘大实蝇对不同颜色和糖类等物质的趋性及嗅觉反应

为探明柑橘大实蝇[Bactrocera minax(Enderlein)]成虫补充营养取食选择的影响因素,以研制成虫食诱剂和设计诱捕器应用于柑橘大实蝇的防控,我们采用杯碟法研究了其对不同颜色和糖类等物质的选择及其嗅觉反应。结果表明:柑橘大实蝇成虫对黄色和橙色基质的食物趋性最强,其次为绿色,对白、蓝、黑、红色基质的食物趋性较弱;在对不同颜色和糖类组合的选择测试中发现,该虫对浸有5%白糖水和5%红糖水的橙色海棉趋性较强,浸有5%红糖水的白色海绵和5%白糖水的黄色海绵选择性较弱。不同柑橘产区来源的柑橘大实蝇雌、雄虫对颜色的选择及不同颜色和糖类组合的选择间差异不显著。成虫对红糖水有明显的取食趋性,蜂蜜水次之,对蔗糖水和白糖水取食趋性弱,不同采集地和性别的柑橘大实蝇对四种糖类物质的选择趋性差异不显著。'Y'型嗅觉仪的行为测试结果表明,柑橘大实蝇成虫对红糖、白糖的气味均表现明显趋性,而且雌虫对红糖的嗅觉反应显著敏感于雄虫;乙酸乙酯和乙酸对大实蝇雄虫和雌虫均具有极显著嗅觉引诱作用,雌雄虫之间差异不显著;但乙醇对雌虫和雄虫的引诱作用均不明显。依据室内测试结果,我们自行研制的食诱剂结合简易诱瓶使用在桔园的田间试验中,获得了很好的诱捕效果,不仅诱捕的虫量较大,而且诱捕到的雌虫明显多于雄虫,较之于一般市售的多种实蝇类诱剂和诱集器所诱集的雄虫数量较多,我们研制的诱捕剂和诱捕器对柑橘大实蝇种群数量的控制效果更好。