用两次聚合酶链反应检测血清中丙型肝炎病毒核糖核酸

应用丙型肝炎病毒核酸序列中的两对引物F-1(1—21),R-1(324—304),F-3(28—48),R-3(284—264),对4名抗-HCV阳性的献血员血清进行了两次聚合酶链反应("nested"PCR),经电泳鉴定1例为阳性,核酸长度为257bp。这一方法的建立为我国开展丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的检测提供了可能性。

一种简单、快速提纯腹水单克隆抗体(IgG)的方法

利用辛酸首先沉淀掉非 IgG 类蛋白,再用硫酸铵沉淀出 IgG.此法提纯的 IgG 纯度与 DEAE-32柱层析、Pro-tein A 亲和层析纯化的结果相似.抗体提纯前、后的效价不变,抗体收获量达90%以上。该法可广泛应用于鸡、猪、绵羊血清 lgG 的纯化,适用于从大批量样品中提纯lgG.

慢病毒感染致病的分子机理

慢病毒归属于反转录病毒科慢病毒亚科,具有反转录病毒族的共同生物学性质。1.基因组为2倍体RNA,2.病毒粒子中有反转录酶,3.基因表达经过DNA中间体。慢病毒是致病性反转录病毒,能引起人及动物漫长的感染过程,感染机体后,能够躲过宿主免疫系统的攻击,长期寄生或缓慢地在机体内复制,最后导致宿主的死亡。

病毒基因组中的增强子及基因表达

真核生物病毒的基因结构具有类似其宿主染色体DNA的生物学特性。病毒基因的复制、转录、表达以及其调控在某种程度上和真核生物相似。随着原核生物基因表达调控的机理逐渐被弄清楚,人们的兴趣已转到了真核生物方面来。基因表达和调控是当代分子生物学研究的一个中心课题,而基因转录的起始事件在生物传息的流向、基因表达过程中占有举足轻重的位置。DNA重组、分子克隆、核酸探针、体外及体内DNA定点突变、核苷酸序列分析等技术的广泛应用,真核生物及其病毒基因转录的研究取得了很大进展。研究发现:许多真核生物基因转录起始时,和两个重要的核苷酸序列区域有关。一个为起始位点上游约30个核苷酸处的富含“AT”碱基对序列(称为“TATA”或“Goldberg-Hogners”盒);

建立艾滋病动物模型的可能性分析

艾滋病(AIDS)足一种由人淋巴细胞白血病病毒(HTLV—Ⅲ或HIV)引起的人类获得性免疫缺陷综合征。马传染性贫血(EIA)也是一种病毒病,由马传染性贫血病毒(EIAV)引起的马的贫血病。

大肠癌组织中RB基因的点突变现象

为了进一步了解大肠癌中ＲＢ基因呈过度表达状态的机制，本文作者研究了ＲＢ基因存在点突变的可能性。利用ＲＮａｓｅ保护试验，在一例结肠癌中首次证实了其ＲＢ基因存在着点突变现象，同时也针对同大肠癌中ＲＢ基因过度表达相关的机制进行了讨论。

c－myc基因表达水平是评价大肠腺瘤恶变倾向的一个临床实用的指标

本文作者利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、斑点杂交技术，比较了大肠癌、腺瘤（癌前期病变）与正常粘膜组织中ｃ－ｍｙｃ基因的表达水平。实验结果表明：在大多数结肠癌（１４／１７）和一部分腺瘤（直径＞１ｃｍ）中ｃ－ｍｙｃ基因的表达水平显著增高，而另一部分小腺瘤（直径（１ｃｍ）中仅有轻度增高。我们认为：ｃ－ｍｙｃ基因的表达水平对于判断大肠腺瘤是否恶变是一个具有潜在临床应用价值的指标。

RB、p53基因表达异常同大肠癌发生、发展的关系

本文以大肠正常粘膜为对照，利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、斑点杂交技术，检测了大肠癌、腺瘤中肿瘤抑制基因（ＲＢ和ｐ５３）的表达情况。实验结果表明：大多数大肠癌有ＲＢ基因、ｐ５３基因或二者同时存在的过表达现象，在个别腺瘤中也可见到这种现象。推测：可能由于ＲＢ、ｐ５３基因发生了点突变，导致基因产物失活，引起细胞增殖活动增强，反过来通过某种调节机制诱导ＲＢ基因出现过表达现象。

抗绵羊 IgG 单克隆抗体的理化特性及生物学特性

研究酸碱度、温度、硫酸铵、辛酸、NalO_4/HIO_4和冻融对特异性抗绵羊 IgG MeAb 活性的影响。纯化单抗对56℃加热处理敏感,在 pH7.0～9.6间活性保持稳定,辛酸处理单抗活性不变。培养杂交癌细胞时,血清浓度可降低到2%,其细胞土长繁殖状况、抗体分泌量与10%血清培养时相以。SS-14和 SS-39两株单抗对绵羊 IgG 不同表位是特异的,与绵羊 IgG 结合的亲和力较高。

RB基因异常改变在大肠癌发生、发展中的意义(英文)

目的 :深入了解RB基因过表达在大肠癌发生、发展中的意义。方法 :利用Northernblot,Dotblot在 1 6例大肠癌及 1 5例大肠腺瘤中测定RB基因的表达情况。运用核酸酶保护试验观察RB基因的点突变现象。结果 :发现在大多数大肠癌 ( 1 4/1 6 )及部分大肠腺瘤 ( 2 / 1 5 )中 ,同相应的正常大肠粘膜相比 ,存在着RB基因过表达现象。在 2例RB基因过表达的大肠癌标本中观察到RB基因发生了点突变。结论 :导致突变失活型Rb蛋白含量增高的RB基因异常改变与大肠癌发生。

RB、P53、c-myc和Ki-ras基因异常改变在大肠癌发生、发展中的意义

为了进一步了解肿瘤从良性表型向恶性表型转化过程的分子生物学基础,我们选择大肠癌及腺瘤为研究对象,在同一组癌及腺瘤标本中,同时观察肿瘤抑制基因(RB和P53基因)、癌基因(myc和ras基因)的表达水平及基因结构的变化情况,现报道如下。