鸡源芽孢益生菌JM-42菌株筛选及抑菌物性质分析

为了筛选对雏鸡腹泻具有显著预防作用的芽孢益生菌,采用琼脂平板扩散法,以大肠杆菌菌株为病源指示菌,从健康鸡肠道中筛选到1株具有较强抑菌活性的拮抗细菌JM-42菌株,对该菌株进行形态学、生理生化、16S rDNA序列分析,同时采用有机溶剂萃取和盐析法对其代谢产物进行提取,对其产物物质种类及性质进行分析。结果表明,JM-42菌株与标准菌株Bacillus velezensis的同源性最高,为99.92%,且二者在所构建的系统发育树上的同一分支上,最终鉴定JM-42菌株为B.velezensis。通过对其代谢产物进行初步分析得出,其拮抗物质为蛋白质,50%硫酸铵盐析所得到的蛋白质组分活性最强,且对热及酸碱敏感性较弱,性质比较稳定。

一株拮抗腐霉病菌的枯草芽孢杆菌的分离鉴定及诱变选育

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)可产生多种抗菌蛋白、抗生素及酶类抗菌物质,对多种植物病原真菌有良好的防治效果。通过从土壤中分离抑真菌活性的枯草芽孢杆菌,并进行UV-NaNO2物理化学联合诱变,获得一株对腐霉病菌(Pythium aphanidermatum)具有较强拮抗作用的菌株。突变菌株的生长速率、耐高温性均较出发菌株有较大提高,盆栽试验表明诱变菌株较出发菌株对腐霉病菌引发的黄瓜腐霉病具有更好的防治作用。

生长素和赤霉素对刺果瓜幼苗生长发育的影响

幼苗期是刺果瓜生命周期相对薄弱环节,研究其幼苗的生长机理,对遏制刺果瓜的繁殖和扩展有很大帮助。试验以刺果瓜幼苗为研究对象,应用4个不同浓度(3、30、300、3000μmol/L)的生长素(IAA)、生长素抑制剂三碘苯甲酸(TIBA)、赤霉素(GA3)、赤霉素抑制剂矮壮素(CCC)、IAA+GA3和TIBA+CCC对刺果瓜长出第一片真叶的幼苗进行处理,通过测量6个时间点(1、2、3、5、7、9天)刺果瓜幼苗的株高、根长、鲜重、干重等生理特性,探究IAA和GA3对刺果瓜幼苗的影响。结果表明,300μmol/L的IAA处理植株株高与根长长势超过其他试验组与对照组。3000μmol/L的TIBA植株株高与根长得到明显的抑制。3000μmol/L的GA3处理组株高、干重值、鲜重增长速度最快,为刺果瓜的最适浓度范围;3μmol/L GA3处理,植株增长速度最慢。300μmol/L CCC对刺果瓜的矮化作用最好,但干重、鲜重值增加;接近3000μmol/L的CCC矮化作用较好,对干重、鲜重几乎无促进作用,为控制刺果瓜生长的最适浓度范围。3000μmol/L的TIBA+CCC处理对刺果瓜幼苗的影响极为显著,在喷洒激素6 h后就可以看到刺果瓜幼苗受到抑制出现萎蔫,刺果瓜有极强的抗逆性,所以在12 h后萎蔫状态消失,虽然仍受到抑制,但仍然缓慢生长。9天后,浓度为3000μmol/l的TIBA+CCC处理刺果瓜幼苗仅长高5.53 cm,而对照组长高18.70 cm,3000μmol/L IAA+GA3处理的刺果瓜幼苗长高34.47 cm,说明3000μmol/L TIBA+CCC对刺果瓜的抑制作用极其显著。研究认为,外源激素对刺果瓜的生长有较好的抑制作用,可以作为抵抗外源入侵植物的途径。

专业实践能力培养路线图的构建实施与“创新”型人才培养——以生物技术专业为例

河北农业大学从2009年起开始在全校开展本科生物技术专业实践能力培养方案的制定工作,其培养路线图的总体思路和原则是:夯实基础能力;强化专业核心能力;提高拓展能力。落实措施主要有优化人才培养方案,打造实践能力强的师资队伍,加强实验室和实践基地建设,强化教师的实践教学理念,改革多元化的实验考核制度,将现代技术手段引入实验项目。三年来的实践证明,生物技术实践能力培养线路图的制定与实施对培养学生的实践创新能力发挥了积极有效的作用。

基于专业实践能力培养路线图的生物技术专业应用型人才培养

河北农业大学实践能力培养路线图是学生大学阶段专业能力形成的愿景图,具有系统性、开放性、共享性的特点,根据生物技术专业性质及培养目标,依托生命科学学院生物学一级学科博士授权点、植物学河北省重点学科及国家植物科学与技术实验教学示范中心的优势,本着"夯实基础能力;强化专业核心能力;提高拓展能力"的原则,以实践能力培养路线图为导向,进行实践教学改革,打造应用型生物技术专业人才的培养平台。

“生物技术”特色专业建设的研究与实践

人才培养质量是高校的生命线,专业建设是高等学校提高人才培养质量的基础性工作。河北农业大学生物技术专业通过科学制定专业培养方案、加强师资队伍建设、优化课程体系、强化实践教学、加强教学管理和学生思想政治工作等措施,提高了学生的综合素质和实践能力,提升了人才培养质量。

灰葡萄孢菌核发育相关基因的功能分析

从灰葡萄孢ATMT突变体库中筛选获得一株不产生菌核的突变体,并利用TAIL-PCR技术获得插入位点的侧翼序列,将其在灰葡萄孢基因组数据库中进行Blast比对分析,采用分子生物学技术,对突变菌株BMH174鉴定并获得其突变基因(BC1G_06945.1);并对突变体的形态学、生长速率、分生孢子产量、致病能力、胞壁降解酶活力、毒素的生物学活性等方面进行了研究,这将为深入了解灰葡萄孢的致病机制奠定基础。

青年教师导师制教育管理模式初探

提出了新形势下高等农业院校青年教师导师制的改革内容及预期目标,从导师的遴选与聘任、职责分工以及管理与待遇几个方面进行了阐述,探讨了这一教育管理新模式、新机制、成才新途径,并介绍这一管理制度的预期实践效果及其理论认识成果。

普通高校生物科学类专业创新型人才培养的探索与实践

为深化高校创新创业教育改革,促进生物科学类专业创新型人才培养,河北农业大学生命科学学院组建了创新导师队伍,从创新意识、授课艺术、创新活力等方面加强师资队伍建设;以学术报告和知识竞赛营造学院科技创新环境;建设了以一级学科博士学位授权点和国家级、省级实验教学示范中心为首的科技创新平台;建立健全了师生科技创新支持政策和奖励;增加并优化科技创新课程,加强学生实践环节实训;积极申请各级别科技创新项目,采取系列训练措施增强学生科技创新能力。学院教学成果显著,全方位提高了学生的创新能力,取得了较好的培养效果。

教学管理视角下的学风建设——以河北农业大学生物技术专业为例

学风建设是学校学生管理工作的重要内容,本质是引导、教育、培养学生树立理论联系实际的作风,遵循崇德、务实、求是、创新的校训,形成优良学风。在教学管理视角下的学风建设,意图从现有的现象出发,探索从教学管理角度做好学风建设的问题。

提高高校教学秘书教学管理水平的探讨

通过对河北农业大学教学管理队伍的人数、学历、职称、专业等进行分析、归纳、总结,认为高校教学秘书不仅要具备过硬的政治思想、职业道德、文化业务、生理心理等素质,还要有全局统筹、信息处理、沟通、合作协调、计算机操作、开拓创新、自我提高的能力;提出了加强高校教学秘书队伍建设,重视教学秘书的选拔与培养工作,做好教学管理工作的构想。

蛋氨酸螯合锌在断奶仔猪上的应用

锌作为免疫器官生长发育和免疫应答所必需的营养因子，是直接参与免疫功能的重要生命相关的元素，它对促进体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫都有重要的作用。在动物所必需的微量元素（铁、铜、锰、硒）中，锌的生理生化作用处于首位。但在一般的饲料中，锌的吸收利用率仅有30％～60％，动物由于锌不足易造成生长发育迟缓、生产性能低下、产品质量下降，

粟弯孢霉叶斑病菌G蛋白β亚基基因克隆及表达

旨在获得粟弯孢霉叶斑病菌G蛋白β亚基基因,明确其表达模式,为阐明该基因对粟弯孢霉叶斑病菌致病性的调控机制奠定基础。运用SMART RACE RT-PCR技术,克隆粟弯孢霉叶斑病菌G蛋白β亚基基因ClGβ全长cDNA序列,以qRT-PCR技术,对该基因在粟弯孢霉叶斑病菌不同生长时间的表达特征进行分析。结果表明,ClGβ基因cDNA编码区为1 056 bp,DNA包含4个内含子和5个外显子,编码351个氨基酸。该基因的cDNA序列在GenBank中注册的登录号为JQ768316。qRT-PCR结果表明,Gβ基因在菌株生长过程中表现出前期表达量较低而后期表达量明显升高的趋势。构建了pET28(a)-ClGβ原核表达载体,经IPTG诱导,目的蛋白在宿主菌E.coli BL21中获得表达,表达产物分子量与ClGβ蛋白计算分子量一致。

欧文氏杆菌铁代谢相关基因的生物信息学分析

利用生物信息学软件对欧文氏杆菌(Erwinia carotovora subsp.atroseptica)基因组中与铁代谢相关的基因进行生物信息学分析。结果表明,共筛选到71个与铁代谢相关的基因,其中,有51个为已知功能基因,20个为推测功能基因。在获得的71个基因中,12个基因参与铁载体合成、27个基因与Fe3+吸收有关、3个基因与Fe2+吸收有关、10个基因与亚铁血红素吸收有关、1个基因与编码贮铁蛋白有关、7个基因与铁吸收调控有关、还有11个基因可能与铁代谢有关。

脂肪对畜禽免疫功能影响的研究进展

随着营养免疫学的研究进展．人们普遍认识到营养是增强动物免疫功能、维持动物健康并进行正常生产的物质基础，也是免疫反应成功进行和患病动物恢复健康的重要条件。营养直接影响动物组织的组成结构、生化代谢和生理功能。因此，动物体的营养状况直接影响免疫系统的发育与功能的发挥，从而改变机体的免疫力．影响畜禽抵抗疾病的能力。合理的营养可以视为一种间接的防疫手段。

灰葡萄孢BcKMO在病菌生长、发育和致病过程中的功能

【目的】明确灰葡萄孢BcKMO在病菌生长、发育和致病过程中的功能,为阐明该基因调控灰葡萄孢生长、发育和致病的分子机理奠定基础,并为灰霉病的防治提供理论依据。【方法】利用生物信息学方法,对BcKMO及其编码产物进行分析。扩增BcKMO的编码区,与pBARKS1-eGFP载体连接,构建基因的表达载体pBARKS1-BcKMO-eGFP;利用PEG介导的原生质体转化方法,转化BcKMO的T-DNA插入突变体BCG183的原生质体;利用PCR、Southern blotting和real-time PCR技术,对所获得转化子进行鉴定;对野生型菌株BC22、突变体BCG183和回复突变体BCG183/BcKMO的表型(菌落形态、菌丝形态、生长速度、产孢量等)和致病力进行分析。【结果】BcKMO编码犬尿氨酸单氧酶(kynurenine 3-monooxygenase,KMO),含有单氧酶FAD的保守结构域和4个类似芳香环羟化酶(Aromatic-ring hydroxylase-like)的基序,与核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的Rossmann卷曲NAD(P)(+)-结合蛋白(Rossmann-fold NAD(P)(+)-binding proteins,gi156049701)和从线嘴壳(Ophiostoma piceae)的FAD依赖性氧化还原酶(FAD-dependent oxidoreductase,gi512192943)同源性较高。成功构建了BcKMO的表达载体pBARKS1-BcKMO-eGFP,利用PEG介导的转化方法,转化突变体BCG183的原生质体,获得了草胺膦抗性的转化子;利用PCR、Southern blotting和real-time PCR技术鉴定转化子,获得了BcKMO的回复突变体BCG183/BcKMO。对突变体BCG183和回复突变体BCG183/BcKMO的表型进行了分析,发现BCG183突变体的生长速率减慢,不产生分生孢子和菌核,菌丝纤细;回复突变体和野生型菌株的生长速率、菌丝形态基本一致,均产生分生孢子和菌核。致病力分析发现,BCG183突变体在芸豆叶片和黄瓜叶片上的致病力均较野生型和回复突变体明显增强。【结论】灰葡萄孢BcKMO正调控病菌的生长、发育,负调控病菌的致病力。

金丝小枣中多酚类物质的分离纯化研究

开展枣果中多酚类物质的研究工作对于丰富天然多酚的原料资源库意义重大。从金丝小枣枣皮、枣核中提取多酚类物质,通过酒石酸铁法测定其总酚含量,得到枣皮多酚的总含量(鲜重)为12.50mg/g,枣核多酚的总含量(鲜重)为9.80mg/g。再依次利用萃取、薄层层析、聚酰胺柱层析、高效液相色谱等方法对枣皮、枣核中多酚类物质进行逐级细分离纯化,分段收集后进行含量测定。结果表明:经HPLC分离纯化后,枣核多酚类物质主要为间苯三酚,含量为67.25μg/mL;枣皮多酚类物质主要为间苯三酚和邻苯二酚,含量分别为43.75μg/mL和38.41μg/mL。本研究结果可为开发无毒、安全、高效的枣多酚产品提供有效的科学依据。

应用IC-RT-PCR方法检测齿兰环斑病毒和建兰花叶病毒

根据已报道的建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒外壳蛋白基因序列设计PCR引物,建立了蝴蝶兰建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒IC-RT-PCR检测方法。用该方法对天津地区8个蝴蝶兰标样检测,结果显示:8个标样中有4个检测到建兰花叶病毒,另外4个检测到齿兰环斑病毒。该方法简化了操作程序,为蝴蝶兰种苗病毒的快速检测奠定了基础。

拟南芥AtBT4对灰葡萄孢的抗性机制分析

【目的】揭示AtBT4在拟南芥抗灰葡萄孢中与SA、JA信号途经的相互关系。【方法】利用RT-PCR技术,检测用SA、SA类似物BTH、JA、ACC及灰葡萄孢处理拟南芥野生型Col-0后其AtBT4的表达情况;检测经SA和JA处理后拟南芥SA、JA途径相关突变体AtBT4的表达情况;并检测接种灰葡萄孢后拟南芥野生型Col-0、bt4突变体和回复突变体抗病相关基因的表达情况。【结果】JA处理和接种灰葡萄孢后,拟南芥野生型Col-0中AtBT4的表达明显增强。但经JA处理后,JA不敏感突变体jar1的AtBT4表达变化趋势与野生型明显不同,AtBT4的表达水平不受JA诱导。SA信号途径相关突变体eds5、sid2和npr1中AtBT4的表达明显低于野生型,但变化趋势与野生型基本一致。bt4突变体中抗病相关基因PR1、PR4、PDF1.2和BIK1的表达明显低于野生型和回复突变体。【结论】AtBT4的表达受JA和灰葡萄孢的诱导,AtBT4突变影响抗病相关基因PR1、PR4、PDF1.2和BIK1的表达,AtBT4可能通过SA、JA信号途径影响拟南芥对灰葡萄孢的抗性。

拟南芥T1N6_22在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能分析

【目的】明确拟南芥抗灰霉病基因T1N6_22在抗Pst DC3000过程中的功能,分析T1N6_22影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【方法】对t1n6_22突变体和转基因回复突变体(t1n6_22/T1N6_22)接种Pst DC3000,检测其症状;采用间苯胺蓝染色法检测接种突变体中胼胝质的积累情况;测定接种叶片中Pst DC3000的生长量,明确T1N6_22在拟南芥抗Pst DC3000过程中的功能。利用RT-PCR技术,检测SA、JA和ET对T1N6_22表达的影响及T1N6_22对抗病防御相关基因表达的影响;利用quantitative real-time PCR技术,检测Pst DC3000对T1N6_22及抗病相关基因表达的影响,分析T1N6_22影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【结果】t1n6_22突变体接种Pst DC3000后表现明显的抗病症状,而回复突变体t1n6_22/T1N6_22和拟南芥野生型表现明显的感病症状。SA处理拟南芥野生型,T1N6_22的表达量明显增强,经JA和ACC处理,该基因的表达量无显著变化。t1n6_22突变体中,PAL、PR4、PPO、SOD和CAT的表达水平均明显高于野生型Col-0和转基因回复植株。接种Pst DC3000后,拟南芥野生型中T1N6_22及抗病相关基因PR1、PR3、PR5和PDF1.2的表达量明显增强。【结论】T1N6_22在拟南芥抗Pst DC3000过程中起负调控作用,T1N6_22的表达受SA诱导,可能主要通过调节植物的次生代谢产物的分泌影响拟南芥对Pst DC3000的抗性。